Середовище тіогліколеве рідке, Контент-платформа
Середовище тіогликолеве рідке
Thioglycollate Fluid Medium (USP)
Фасування 500 р. Термін придатності до 4 років. Зберігати при температурі 20°С
Середовище для культивуванняаеробнихтаанаеробнихмікроорганізмів при аналізі на стерильність
Формула в грамах на літр
Панкреатичний гідролізат казеїну 15,0 Глюкоза (моногідрат) 5,0
Дріжджовий екстракт 5,0 Хлорид натрію 2,5
L-цистин 0,5 Тіогліколят натрію 0,5
Резазурин 0,001 Бактеріологічний агар 0,75
Кінцева величина pH 7,1±0,2 при 25°C
Розвести 29 г середовища на 1 літрі дистильованої води. Ретельно перемішати та нагріти. Часто помішуючи, довести до кипіння. Кип'ятити протягом хвилини до розчинення. Розлити в пробірки 15×2 см (по 15 мл на кожну пробірку) і стерилізувати 15 хвилин при 121°C. Готове середовище має світло-бурштинове забарвлення з рожевим верхнім шаром і повинне зберігатися при 2–8°C. Охолодити перед використанням та зберігати в темному місці.
Готове середовище можна використовувати через деякий час після приготування, поки воно не окислиться на 30%, на що вказує рожевий колір на поверхні резазурину. Якщо рівень окислення вище, середу можна нагріти повторно лише один раз на пару або в киплячій воді, охолодити і використовувати.
Середовище тіогіколева рідкавикористовується для виявлення мікроорганізмів у тестах на стерильність (відповідно до стандарту Фармакопеї США та стандартів Британської та Європейської Фармакопей).
Тіогліколят натрію нейтралізує бактеріостатичний ефект сполук, що використовуються як консерванти у фармацевтичних препаратах, особливо призначених для ін'єкцій. Казеїновий пептон тадріжджовий екстракт – джерела азоту, вітамінів, мінеральних солей та амінокислот. Тіогліколят натрію та L-цистин знижують окисно-відновний потенціал за рахунок видалення кисню для підтримки низького значення Eh. Декстроза – вуглеводне джерело енергії, сприяє швидкому та бурхливому зростанню мікроорганізмів. Хлорид натрію підтримує осмотичний баланс. Резазурин – індикатор окислення, що набуває рожевого кольору. Бактеріологічний агар уповільнює дисперсію CO2 та дифузію O2.
При використанні даного середовища необов'язково застосовувати нашарування стерильного парафінового масла або проводити інкубацію у спеціальних контейнерах для анаеробів. Анаеробні організми розвиваються на дні пробірки, мікроаерофіли – у середній частині середовища, аероби – у верхньому шарі, що окислюється.
Інокулювати та інкубувати при температурі 35±2°C не більше 3 днів.
Європейська Фармакопея при оцінці стерильності продуктів, що містять ртутні консерванти, рекомендує проводити інкубацію в рідкому середовищі тіогликолі при температурі 20–25°C. Для проведення тесту на стимулювання зростання аеробів, анаеробів та грибів інокулювати порції даного середовища невеликою кількістю (не більше 100 КУО)Clostridium sporogenes ATCC 11437, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027таStaphylo8. Для визначення стерильності інкубувати порції середовища протягом 14 днів.
У разі вмісту досліджуваного матеріалу інших консервантів розчинити інокулят у достатній кількості тіогліколяту для придушення бактеріостатичного ефекту.
Наступні результати були отримані при використанні середовища тестових культур після інкубації при температурі 35±2°C і спостерігалися через 24 години.