Аналіз на виявлення АТ до цитоплазми нейтрофілів, Медичні Аналізи - патронажна служба
АТ до цитоплазми нейтрофілів
В організмі хворої людини при ряді аутоімунних захворювань утворюються специфічні антитіла до антигенів, розподілених у цитоплазмі білих клітин крові – у нейтрофілах. Ці, так звані,антинейтрофільні цитоплазматичні антитіла (скорочено АНЦА)спочатку були виявлені та описані пригранулематозних запальних захворюваннях стінок кровоносних судин> є білкові та ферментативні комплекси, які мають бактерицидні та мікробіцидні властивості, і знаходяться в азурофільних гранулах нейтрофілів: протеїназу-3, лізоцим, еластазу, мієлопероксидазу, катепсин G, лактоферин і білок BPI. В ході аутоімунної реакції відбувається активація нейтрофілів та їх дегрануляція. Вони починають виробляти вільні радикали, що ушкоджують ендотеліальні клітини судин крові.
Підготовка до дослідження
Для дослідження проводиться забір венозної крові пацієнта, яка для отримання сироватки, поміщається в пробірку з розділовим гелем. Перед аналізом не потрібно спеціальної підготовки. Єдиною умовою є взяття аналізу натще, або після вживання їжі має пройти більше чотирьох годин.
Проведення тесту
Для визначення наявності антитіл до цитоплазми нейтрофілів застосовується метод непрямої імунофлюоресценції, за якого використовуються здорові донорські нейтрофіли, фіксовані етанолом. При позитивній реакції (присутність антитіл) проводиться ідентифікаційний аналіз, у якому використовуються очищені антигени. У ході дослідження виявляються два основних види антитіл з різними видами флюоресценції (свічення), обумовленими різною антигенною спрямованістю: ц-АНЦАцитоплазматична та п-АНЦА – перинуклеарна.
Диференціація антитіл
При ц-АНЦ флюоресценції спостерігається світіння гранул нейтрофілів, які розподілені рівномірно по всій поверхні цитоплазми клітини. Це вказує на наявність антитіл до мієлобластину (протеїназа-3 лізосомальна).
При п-АНЦ флюоресценції, світіння локалізується навколо клітинного ядра, залишаючи його незабарвленим. У цьому випадку є антитіла, мішенню яких, є антигенні комплекси: фермент мієлопероксидаза, а також катепсин G, лізоцин, лактоферин і еластазу.
Крім основних видів світіння бувають атипові типи флюоресценції.
Значення методу визначення АТ до цитоплазми нейтрофілів
Аналіз проводиться для виявлення аутоімунних васкулітів при гранулематозі Вегенера, вузликовому періартеріїті, при синдромах Гудпасчера і Чарга-Стросса, при системному червоному вовчаку, мікроскопічному поліангіїті.
Позитивний тест на антитіла до цитоплазми нейтрофілівспостерігається і при швидко прогресуючому ідіопатичному гломерулонефриті, і при виразковому коліті. Є невеликий відсоток (6%) виявлення антитіл практично здорових людей.