Читати Гістологія

ЖАНРИ
АВТОРИ
КНИГИ 563 765
СЕРІЇ
КОРИСТУВАЧІ 510 019

Метод диференціального центрифугування – вивчення окремих органел і навіть їх фрагментів, виділених із клітини. Для цього шматочок досліджуваного органу розтирають, заливають фізіологічним розчином, а потім розганяють у центрифузі при різних обертах (від 2 до 150 тис. за 1 хв). В результаті центрифугування отримують фракції, що цікавлять, які потім вивчають різними методами.

Методи морфометрії – кількісні методи. Вони дозволяють визначати розміри та обсяги ядра – каріометрія, клітин – цитометрія, органел – електронна морфометрія, а також визначати кількість клітин різних популяцій та субпопуляцій. Дані методи широко використовуються у наукових дослідженнях.

Різні експериментальні методи – харчове та водне навантаження, фізичні методи (УВЧ, НВЧ, лазери, магніти). Вони застосовуються для вивчення реакції структур, що цікавлять, на той чи інший вплив і поєднуються з методами морфометрії, цито- і гістохімії. Ці методи також застосовуються в наукових дослідженнях.

Таким чином, основним та найбільш поширеним методом вивчення в гістології є мікроскопія. Приготування гістологічного препарату включає наступні етапи.

1.Взяття матеріалу– шматочка тканини чи органа. При заборі матеріалу необхідно виконувати такі правила:

1) забір матеріалу повинен проводитися якомога раніше після смерті або вибою тварини, при можливості від живого об'єкта, щоб якнайкраще зберегти структуру досліджуваних клітин;

2) забір матеріалу повинен проводитися гострим інструментом, щоб не травмувати тканини;

3) товщина шматочка не повинна перевищувати 5 мм, щоб фіксуючий розчин змігпроникнути на всю глибину тканини;

4) обов'язково необхідно провести маркування шматочка, при цьому вказуються найменування органу, номер тварини або прізвище людини, дата забору.

2.Фіксація матеріалу. Даний етап проводиться для того, щоб зупинити обмінні процеси в клітині та зберегти її від розпаду. Для цього взятий на дослідження шматочок тканини занурюють у фіксуючий розчин. Розчин може бути простим (спирт або формалін) та складним (розчин Карнуа, фіксатор Цинкера). Фіксатор викликає денатурацію білків і зберігає структуру клітин у стані, близькому до прижиттєвого. Фіксацію можна проводити також шляхом заморожування – охолодженням рідким азотом чи струменем вуглекислого газу.

3.Заливання шматочків тканини в ущільнюючі середовища(парафін, смоли) – або заморожування. Даний етап необхідний для того, щоб у подальшому з тканини, що досліджується, можна було виготовити тонкий зріз.

4.Приготування зрізів на мікротомі або ультрамікротомі за допомогою спеціальних ножів. Після цього зрізи для світлової мікроскопії приклеюються на предметні шибки, а для електронної – монтуються на спеціальні сіточки.

5.Забарвлення зрізів або їх контрастування(для електронної мікроскопії). Перед забарвленням зрізів необхідно видалити середовище ущільнювача - виконати депарафування. За допомогою фарбування досягається контрастність досліджуваних структур. Барвники можна поділити на основні, кислі та нейтральні. Найбільш широко застосовуються основні барвники (гематоксилін) та кислі (еозин). Часто використовуються складні барвники.

6.Просвітлення зрізів у ксилолі та толуолі. Їх укладають у смоли (бальзам та полістирол) та закривають покривним склом.

Після цих процедур препарат можна досліджувати під світловим мікроскопом.Вміщені під скло зрізи для світлового мікроскопа можуть довго зберігатися і багаторазово використовуватися. Для електронної мікроскопії кожен зріз використовується лише 1 раз, при цьому він фотографується, і вивчення структур тканин проводиться по електронограмі.

Якщо тканина має рідку консистенцію (наприклад, кров, кістковий мозок), то препарат виготовляють у вигляді мазка на предметному склі, який також фіксується, фарбується і вивчається.

З ламких паренхіматозних органів виготовляють препарати у вигляді відбитка органу, проводять розлам даного органу, потім до місця розлому прикладають предметне скло, на яке приклеюються вільні клітини. Після цього препарат фіксується та вивчається.

З деяких органів (наприклад, брижі, м'якої мозкової оболонки) або пухкої волокнистої сполучної тканини виготовляють плівкові препарати шляхом розтягування або роздавлення між двома стеклами з наступною фіксацією і заливкою в смоли.

Тема 3. ВСТУП У КУРС ГІСТОЛОГІЇ

Гістологія– наука про будову, розвиток та життєдіяльність тканин живих організмів. Отже, гістологія вивчає один із рівнів організації живої матерії – тканинний.

Розрізняють такі рівні організації живої матерії:

3) структурно-функціональні одиниці органу;

7) популяційний та інші рівні.

Гістологія розглядається як дисципліна, що включає чотири основні розділи:

1) цитологію, яка вивчає будову клітини;

2) ембріологію, що вивчає формування клітин та тканин під час внутрішньоутробного розвитку;

3) загальну гістологію - вивчає структуру, функціональні, клітинні елементи різних тканин;

4) приватну (або макроскопічну) гістологію, що вивчає структурипевних органів та їх систем.

Таким чином, у гістології є кілька розділів, що вивчають певні рівні організації живої матерії, починаючи з клітинного і закінчуючи органним та системним, що становить організм.

Гістологія належить до морфологічних наук. На відміну від анатомії, що вивчає будову органів на макроскопічному рівні, гістологія вивчає будову органів та тканин на мікроскопічному та електронно-мікроскопічному рівні. При цьому підхід до вивчення різних елементів проводиться з урахуванням виконуваної ними функції. Такий спосіб вивчення структур живої матерії називається гістофізіологічним, і гістологія часто називається гістофізіологією. При вивченні живої матерії на клітинному, тканинному і органному рівнях розглядаються не тільки форма, розміри і розташування структур, що цікавлять, але методами цито-і гістохімії визначається хімічний склад речовин, що утворюють дані структури. Досліджувані структури також розглядаються з урахуванням їх розвитку як у внутрішньоутробному періоді, і протягом початкового онтогенезу. Саме з цим пов'язана необхідність включення до гістології ембріології.

Основним об'єктом гістології у системі медичної освіти є організм здорову людину, і тому дана навчальна дисципліна називається як гістологія людини.

Головним завданням гістології як навчального предмета є виклад знань про мікроскопічну та ультрамікроскопічну (електронно-мікроскопічну) будову клітин, тканин органів та систем здорової людини в нерозривному зв'язку з їх розвитком та виконуваними функціями. Це необхідно для подальшого вивчення фізіології людини, патологічної анатомії, патологічної фізіології та фармакології. Знання цих дисциплін формує клінічне мислення.

Завданням гістології як науки є з'ясування закономірностей будови різних тканин і органів для розуміння фізіологічних процесів, що протікають у них, і можливості управління цими процесами.

Тема 4. МОРФОЛОГІЯ І ФУНКЦІЇ ЦИТОПЛАЗМИ І ОРГАНЕЛ КЛІТИНИ

Цитологія –наука про будову, розвиток та життєдіяльність клітин. Отже, цитологія вивчає закономірності структурно-функціональної організації першого (клітинного) рівня організації живої матерії. Клітина є найменшою одиницею живої матерії, що має самостійну життєдіяльність і здатність до самовідтворення. Субклітинні утворення (ядро, мітохондрії та інші органели) хоча і є живими структурами, але не мають самостійної життєдіяльності.

Клітка –це обмежена активною мембраною, упорядкована, структурована система біополімерів, що утворюють ядро і цитоплазму, що беруть участь у єдиній сукупності метаболічних та енергетичних процесів, що здійснюють підтримку та відтворення всієї системи в цілому.