Методика з ботаніки
Влаштування мікроскопа. Будова рослинної клітини
Мікроскоп - це оптичний прилад, за допомогою якого можна отримати збільшене зворотне зображення об'єкта, що вивчається, і розглянути дрібні деталі будівлі. У мікроскопі виділяють дві системи: оптичну та механічну. До оптичної системи відносять об'єктиви, окуляри та освітлювальний пристрій.
Об'єктив – одна з найважливіших частин мікроскопа. Об'єктив складається з металевого циліндра та вмонтованих у нього лінз, число яких може бути різним. Ступінь збільшення знаходиться у прямій залежності від числа лінз. Об'єктив із великим збільшенням має вісім-десять лінз. Першу лінзу, звернену до препарату, називають фронтальною. У верхній частині об'єктива є гвинтова нарізка, за допомогою якої його загвинчують у гніздо револьвера. Збільшення об'єктива позначено цифрами Х8, Х20, Х40. Слід пам'ятати про акуратність під час роботи з об'єктивами великого збільшення, оскільки вони робоче відстань, т. е. відстань від покривного скла до фронтальної лінзи, вимірюється десятими частками міліметра. Робоча відстань при об'єктиві Х8 дорівнює 138 мм, при об'єктиві Х40 - 06. Об'єктив малого збільшення має максимальну робочу відстань та найбільше поле зору.
Окуляр подібно до лупи дає пряме уявне збільшене зображення об'єкта, що спостерігається, побудоване об'єктивом. Він не виявляє нових деталей будови, і в цьому плані його збільшення марно. Окуляр складається з двох-трьох лінз, вмонтованих у металевий циліндр. Збільшення окулярів позначено ними цифрами: Х7, Х10, Х15. Для визначення загального збільшення мікроскопа слід помножити збільшення об'єктиву збільшення окуляра (наприклад, 40X10).
Освітлювальний пристрій складається з дзеркала та конденсора з ірисовою.діафрагмою, що розташовані під предметним столиком. Воно призначене для висвітлення об'єкта пучком світла.
Дзеркало служить для спрямування світла через конденсор та отвір предметного столика на об'єкт. Воно має дві поверхні: плоску та увігнуту. У навчальних лабораторіях із розсіяним світлом зазвичай використовують увігнуту поверхню дзеркала. Ірисова діафрагма розташована між дзеркалом та конденсором. Вона служить зміни діаметра світлового потоку, направляемого дзеркалом через конденсор на об'єкт.
Механічна система мікроскопа складається з підставки, коробки з мікрометрним гвинтом, тубусоутримувача, гвинта грубого наведення, конденсора, гвинта переміщення конденсора, револьвера та предметного столика.
Підставка - основа мікроскопа.
Мікрометренний гвинт служить для незначного переміщення тубусоутримувача, а, отже, і об'єктива на відстані, що вимірюються мікрометрами. Повний оборот мікрометренного гвинта пересуває тубусодержатель на 100 мкм.
Тубус або труба - циліндр, який зверху вставляють окуляр. Він рухомо з'єднаний з головкою тубусодержателя і фіксується стопорним гвинтом у певному положенні.
Револьвер призначений для швидкої зміни об'єктивів, загвинчених у його гнізда. Центроване положення об'єктива забезпечує клямка, розташована всередині револьвера.
Гвинт грубого наведення використовують для значного переміщення тубусоутримувача, а, отже, і об'єктива з метою фокусування об'єкта.
Предметний столик призначений розташування на ньому препарату. У середині столика є круглий отвір.
Правила поводження з біологічними мікроскопами
Для налаштування мікроскопа виконують послідовно такі операції:
1. Працюють із мікроскопом завжди сидячи.
2.Ставлять мікроскоп на краю столу так, щоб окуляр знаходився проти лівого
очі та протягом роботи його не пересувають.
3. Відкривають повністю діафрагму, піднімають конденсор у крайнє верхнє положення, щоб його фронтальна лінза знаходилася на одному рівні
із предметним столиком.
4. Ставлять об'єктив Х8 у робоче положення - на відстань 1 см від предметного столика. Роботу з мікроскопом завжди починають із малого збільшення.
5. Дивлячись лівим оком в окуляр і користуючись увігнутим дзеркалом, направляють світло від вікна (але не прямої сонячної) або електричної лампи.
6. Кладають препарат на предметний столик так, щоб об'єкт, що вивчається, знаходився під об'єктивом, і, дивлячись збоку, опускають об'єктив за допомогою гвинта грубого наведення до тих пір, поки відстань між фронтальною лінзою об'єктива і препаратом не стане 4-5 мм.
7. Дивлячись в окуляр і обертаючи гвинт грубої наведення, плавно піднімають об'єктив до положення, при якому добре видно зображення об'єкта. Якщо зображення не з'явилося (проскочило), треба повторити всі операції спочатку.
Не можна дивитися в окуляр і опускати об'єктив, обертаючи гвинт грубого наведення від себе, тому що при цьому фронтальна лінза може розчавити покривне скло і на ній з'являться подряпини.
8. Для вивчення якоїсь ділянки об'єкта при великому збільшенні ставлять цю ділянку в центр поля зору, пересуваючи препарат рукою. Піднімають тубусоутримувач і після цього повертають револьвер так, щоб об'єктив X40 зайняв робоче положення. Дивлячись збоку, опускають об'єктив великого збільшення до торкання покривного скла препарату. Потім, вже дивлячись в окуляр, обертають макрометренний гвинт на себе, доки не з'явиться зображення препарату. І лише після цього проводять фокусування об'єкта придопомоги мікрометрного гвинта.
10. Після закінчення роботи з великим збільшенням повертають револьвер,
встановлюють мале збільшення та знімають препарат. Не можна виймати
препарат з-під об'єктива Х 40, тому що робоча відстань його дорівнює 0,6 мм і під час переміщення скла легко можна зіпсувати передню лінзу.
Якщо механічні частини мікроскопа рухаються важко, не слід застосовувати силу. Необхідно з'ясувати причину несправності та усунути її.
Після закінчення роботи протирають чистою ганчіркою усі частини мікроскопа, накривають його поліетиленовим мішком і ставлять у шафу. Переносять мікроскоп двома руками: однією тримають за тубусоутримувач, іншою — за підставку.
Рис.1. А – мікроскоп марки МБР-1, Б – мікроскоп марки «Біолам»:
1 – окуляр, 2 – тубус, 3 – тубусоутримувач, 4 – гвинт грубого наведення, 5 – мікрометренний гвинт, 6 – підставка, 7 – дзеркало, 8 – конденсор та ірисова діафрагма, 9 – предметний столик, 10 – револьвер з об'єктивами.
Тимчасові препарати виготовляються з використанням води або гліцерину, вони можуть зберігатися не більше місяця. Постійні препарати можна зберігати тривалий термін, вони виготовляються з використанням канадського бальзаму за спеціальною технологією.
Лейкопласти в клітинах епідерми аркуша традесканції
Для виготовлення тимчасового препарату лист традесканції обернути навколо вказівного пальця лівої руки, щоб нижня сторона листа була звернена назовні. Препарувальною голкою надірвати нижню епідерму по серединній жилці біля основи листа та пінцетом зняти її шматочок. Зірваний шматочок помістити на предметне скло в краплю води і накрити зверху покривним склом. На малому збільшенні розглянути витягнуті клітини, безбарвні або забарвлені в блідо-фіолетовий колір завдяки присутності у вакуолях пігменту антоціану. Замалювати клітини епідерми, зробивши позначення. Малювати простим олівцем, підписи до малюнка можна робити ручкою.