Середовище для вирощування бульбочкових бактерій
СЕРЕДОВИЩЕ ДЛЯ ВИРОЩУВАННЯ КЛУБЕНЬКОВИХ БАКТЕРІЙ, що містить мелясу , джерело органічного азоту та фізіологічно активних речовин, сірчанокислий а1.1моній, фосфорнокислий однозаміщений калій, фосфорнокислий двозаміщений калій, сірчанокислий магній, бульбочкових бактерій , як джерело органічного азоту та фізіологічно активних речовин середовище містить сухий ферментолізат кормових дріжджів, отриманий за допомогою ферментного препарату з Actinomyces rutgersensis 88, при наступному співвідношенні компонентів , г/л: Меласса20,0-30,0 Сіркокислий амоній0,5 0 Фосфорнокислий5J однозаміщений (Л калій0,25-0,5 Фосфорнокислий двоз аміщений калій0,25-0,5 Сірчанокислий магній 0,2-0,3 Мел1,0-3,0 Сухий ферментолізат кормових дріжджів 2,0-5,0 Вода
H АВТОРСЬКИМ СВІДЧЕННЯМ виття і Ь v 1 r д ;"0,5-1,0
ДЕРЖАВНИЙ ХОМІТЕТ СРСР
ПО СПРАВАХ ВИНАХОДІВ І ВІДНРИТТІВ (21) 3471434/30-15 (22) 19.07.82 (46) 30. 06. 84. Бюл. Р 24 (72) Е. В. Чекасіна, A. П. Ужкуренас, A. f3. Хотянович, A. І. Позднякова, А. П.Шпокене, Н. Ю. Амстердамська, В. І. Шрамко, A. І. Черемухіна та В.С.Краснопільська (71) Всесоюзний науково-дослідний інститут сільськогосподарської мікробіології, Всесоюзний науково -дослідний інститут мікробіологічних засобів захисту рослин і бактеріальних препаратів та Всесоюзний науково-дослідний інститут прикладної ензимології (53) .576. 851. 155 (088. 8) (56) 1. Авторське свідоцтво СРСР
9 540852, кл. З 12 і 1/20, 1976.
2. Авторське свідоцтво СРСР
9 293785, кл. З 05 F 11/00, 1972. ! (54) (57) СЕРЕДОВИЩЕ ДЛЯ ВИРІЦЮВАННЯ КЛУ
БЕНЬКОВИХ БАКТЕРІЯ, що містить мелясу, джерело органічного азоту та фізіологічно активнихречовин, сірчанокислий амоній, фосфорнокислий,. , в якості джерела органічного азоту і фізіологічно активних речовин середовище містить сухий ферментоліеат кормових дріжджів, отриманий за допомогою ферментного препарату Actinomyces rutgersensis 88, при наступному співвідношенні компонентів, г/л:
Фосфорнокислий однозаміщений калій О, 25-0, 5
Фосфорнокнслий двозаміщений калій 0,25-0,5
Сірчанокислий магній 0,2-0,3 ф
Сухий ферментолізат кормових дріжджів IaeaL
Винахід відноситься до сільськогосподарської та технічної мікробіології і може бути використане при виробництві йнокулянтів для бобових культур.
У зв'язку з розширенням виробництва препаратів бульбочкових бахтерій у СРСР. виникає необхідність пошуку раціональних поживних середовищ для культивування бульбочкових бактерій з використанням доступних і стандартних субстратів, що забезпечують отримання високих титрів бульбочкових бактерій в едійиці обсягу ферментаційної рідини. В даний час як джерело органічного азоту і фізіологічно активних речовин для вирощування бульбочкових бактерій у виробничих умовах використовують різні екстракти.
Відома живильне середовище, що містить як джерело органічного азоту і фізіологічно активних речовин бобовий н дріжджової екстракти. Однак вони являють собою нестандартні продукти: крім того, вартість їх досить висока 1Х
Відома середовище, що містить у зазначеній якості кукурудзяний екстрак12).
Однак він також не є стан- 30 дартним продуктом,що виключає можливість отримання стандартизованого (органічного азоту) живильного середовища. Крім того, в кукурудзяному екстракті містяться леткі 35 органічні кислоти, що інгібують зростання бульбочкових бактерій, що перешкоджає накопиченню максимального їх титру. Кукурудзяний екстракт є порівняно дефіцитною сировиною, 40 і пошук його замінників є актуальним.
Метою винаходу є стандартизація середовища і підвищення титру бульбочкових бактерій.
Поставлена мета досягається тим, що середовище для вирощування бульбочкових бактерій, що містить ме" ласу, джерело органічного азоту та фізіологічно активних речовин, сірчанокислий амоній, фосфорнокислий однозаміщений калій, фосфорнокислий 50 двозаміщений калій, сірчанокислий магній, м азоту та фізіологічно активних речовин містить сухий ферментолізат кормових дріжджів 55. отриманий за допомогою ферментного препарату з Actinошусеї rutgersensiв
88, при наступному співвідношенні компонентів, r/ë:
Меласса 20, 0-30, Про 60
Сірчанокислий амоній 0,5-1,0
Фосфорнокислий однозаміщений калій 65
Фосфорнокислий двозаміщений калій О, 25-0,5
Сір нохи магній 0 2-0 3
Сухий ферментолізат кормових дріжджів 2,О-5,0
Культивування повільно зростаючих бульбочкових бактерій сої та люпину та швидкозростаючих бульбочкових бактерій гороху та люцерни.
П р і м е.р 1. Культуру бульбочкових бактерій сої (шт. 646) вирощували в рідкому поживному середовищі складу, r/ë: меляса 20,0„ сірчано-кислий амоній 0,5; фосфорнокислий однозаміщений калій 0,5; фосфорнокислий двозаміщений калій 0&5; сірчанокислий магній 0,2; крейда 2,0; (ферментолізат ВВК 5,0. Вирощували бульбочкові бактерії сої в колбах та суліях з 2,0 л поживною.середовища на гойдалці при 220 об/MHH при 28-30"С і протягом 72 год. Отримали титр в культуральній рідині 26,3 млрд/мл бактерій.
17,7 млрд/мл бактерій.
П р і М е р 2. Культуру бульбочкових бактерій люпнна (шт. 363а) вирощували в рідкому поживному середовищі складу, г/л: меляса 30,0; сірчанокислий амоній 1,0„ фосфорйокислий однозаміщений калій 0,5; фосфорно" кислий двозаміщений калій 0,5 сірчанокислий магній 0,2; крейда 1,5 Ферментолізат ВВК 3,0. Вирощування культури проводили в колбах і суліях з
2,0 л живильного середовища на гойдалці при 220 об/Мін при 28-30 С протягом 90 год. Отримали титр у культуральній рідині 23,0 млрд/мл бактерій, у контрольному середовищі титр був
15, 8 млрд/мл бактерій.
Приклад 3, Культуру бульбочкових бактерій гороху (шт,250а) вирощували в рідкому поживному середовищі складу, r/ë: меляса 30,0; сірчанокислий амоній 05; фосфорнокислий однозаміщений калій 0,25; Фосфорнокислий двозаміщений калій 0,25 сірчанокислий магній; крейда 3,0
Ферментолізат БВК 4.0. Вирощували бульбочкові бактерії гороху в колбах і суліях з 1,5 л живильного середовища а також у ферментаторах протягом 28-42 ч при 28-30 С. Отримали титр в культуральній рідині
19,7 млрд/мл, у калітрольному середовищі (з кукурудзяним екстрактом) титр був
12,5 млрд/мл бактерій гороху.
П р і.м е р 4. Культуру бульбочкових бактерій люцерни (шт. 425a) вирощували в рідкому поживному середовищі складу, г/л: меляса 20,0; сер1100307
Редактор Т. Веселова ТехредС. Мігунова Коректор А.Ільїн
Замовлення 4543/23 Тираж 522, Передплатне
ВНДІПД Державного комітету СРСР у справах винаходів та відкриттів
113035, Москва, Ж-35, Рауська наб., д. 4/5
Філія ППП "Патент" r.Óærîðîä,вул. Проектна, 4 нокислий амоній 1,0g фосфорнокислий одноеамісний калій 0,25; фосфорнокислий двоеамісний калій
0,25; сірчанокислий магній 0,3; крейда
1 0> ферментолізат БВК 2,0. Вирощування культури бульбочкових бактерій люцерни проводили .в колбах і бути-. лях з 1,5 л живильного середовища на гойдалці при 220 об/хв при 28-30 С протягом 30-40 год а також у ферментаторах. Отримали титр у культуральній рідині 38 млрд/мл, у контрольному середовищі титр становив 19,8 млрд/мл бактерій люцерни.
Застосування винаходу дозволяє підвищити титр бульбочкових бактерій