Хвороба Гамборомоніторинг якості вакцинації методом ІФА

Ви маєте на увазі місцевий веб-сайт для доступу до іншого веб-сайту в групі.

Хвороба Гамборо: моніторинг якості вакцинації методом ІФА

Др. Сілвіан Комт, Сева Санте Анімаль, Франція

Хвороба Гамборо становить серйозну загрозу для промислового птахівництва, викликає високу смертність і втрату продуктивності курчат як м'ясного, і яєчного напрями. Застосування проміжних плюсвакцин забезпечує захист курчат від гострої та субклінічної форми даного захворювання. Для дослідження сироваток крові курчат на наявність антитіл до вірусу хвороби Гамборо вже більше 15 років використовують метод ІФА, який має ряд переваг, наприклад, швидкість і дешевизна, але головна його перевага в тому, що метод є достовірним і стандартизованим. У цій статті представлені результати дослідження сироваток крові бройлерів методом ІФА в період вирощування (з 1 по 45 день).

Захист протягом усього періоду вирощування

Одне з основних завдань вакцинації проти хвороби Гамборо – створити захист курчат протягом усього періоду вирощування. Добові курчата захищені від захворювання на МА, які вони отримали від курей батьківського стада. Курчата-бройлери стають чутливими до вірусу хвороби Гамборо до 20-денного віку, а курчата яєчного спрямування – до 30-денного. Наявність МА у курчат у ранньому віці перешкоджає їх вакцинації, тому що МА нейтралізують вакцинний вірус (рис. 1).

Доведено, що при імунізації курчат із високим рівнем МА вакцинний вірус не спричиняє сероконверсію. При вакцинації курчат із критичним рівнем МА (той рівень МА, який може подолати вакциннийштам) формується хороша імунна відповідь, що запобігає клінічним і субклінічним ознакам хвороби Гамборо - смертність, геморагічне запалення бурси, зниження показників продуктивності. у 12-денному віці (559). Курчат вакцинували наступного дня. При серологічному дослідженні перші антитіла виявили на 4-й день після вакцинації. Середній титр антитіл досягнув свого максимального значення у 26-денному віці (3338) і залишався на високому рівні аж до забою птиці (3398). Польовий вірус також може викликати сероконверсію, але в такому випадку поряд з останньою проявляються клінічні ознаки та знижується продуктивність курчат. При оцінці титрів (рис. 3) антитіл також дуже важливо враховувати їхню однорідність. Висока однорідність свідчить про хорошу якість вакцинації курчат.

Визначення дати вакцинації

Не менш важливе завдання вакцинації курчат – створити плавний перехід від пасивного імунітету (МА) до активного. Однак у реальних умовах розрахувати точну дату вакцинації можна тільки у тому випадку, якщо курчата надходять від одного постачальника та з однорідного батьківського стада. Сироватки крові для серологічного дослідження, як правило, беруть у курчат протягом перших трьох днів життя. часто використовують у лабораторіях, тому що вони додаються до програмного забезпечення обладнання. Дата вакцинації, визначена таким чином, повинна підтверджуватись ветеринарним фахівцем або керівником, відповідно до реальної ситуації нафабрике. У цьому досвіді курчат імунізували вакциною Cevac® IBD L методом випоювання в 13-денному віці (Сева Санте Анімаль, Лібурн, Франція). Середній титр антитіл у курчат перед вакцинацією у 12-денному віці становив 559, причому більша кількість проб (8) знаходилася в першій групі з титром антитіл від 0 до 396 (рис. 4). Коефіцієнт варіації 97%. Курчат імунізували одноразово проміжною плюс вакциною Cevac® IBD L, тому що вона долає рівень МА у розведенні 1:500.

Сероконверсія та тривалість циркуляції антитіл

При дослідженні зразків сироваток крові у курчат у 26-денному віці (через 2 тижні після вакцинації) відзначали високу та однорідну сіркоконверсію (рис. 5), з коефіцієнтом варіації 32%. Позитивним титром антитіл проти хвороби Гамборо прийнято вважати від 1000 до 2000. У цьому дослідженні середній титр антитіл становив 3338 і всі спроби були позитивними. Результати дослідження методом ІФА залежить від багатьох умов - типу набору, навичок оператора, зовнішніх умов постановки реакції (температура, вологість). Порівнювати результати досліджень можна лише в тому випадку, якщо вони були виконані одночасно одним оператором і з використанням наборів одного виробника.

Однорідність титрів антитіл можна оцінити за коефіцієнтом варіації (див. рис. 5). На діаграмі представлені зразки сироваток крові, які розподілені за групами: від 0 до 395, від 396 до 999, від 1000 до 1999 і т. д. Умовно прийнято вважати, що для статистично достовірних результатів при виконанні ІФА необхідно відбирати від 18 до 2 (18 мінімум) зразків сироваток крові [2, 11]. Інформація у формі діаграми дозволяє оцінити розташування титрів по групах (більшість зразків в одній групі або зразки розподілені покільком групам) і по відношенню до середнього значення (гетерогенні або гомогенні титри). При дослідженні сироваток крові добових курчат (див. рис. 3) більшість титрів антитіл розташовувалися в одній групі і були близькі до середнього значення.

Хороша однорідність та високий рівень МА свідчить про задовільний стан здоров'я батьківського поголів'я та про правильну програму вакцинації курей до початку яйцекладки з використанням живих та інактивованих вакцин.

У багатьох дослідженнях відзначено позитивну кореляцію між реакцією вірус нейтралізації та методом ІФА [1, 4, 5, 7, 8]. Крім того, відмінності середніх титрів між двома групами курчат, щеплених різними вакцинами, не завжди свідчить про імуногенність вакцини. Наприклад, середнє значення титру антитіл 3000 у курчат 25-денного віку, імунізованих вакциною А, і 4500 у курчат, щеплених вакциною Б, не говорить про те, що імунізація краще при використанні вакцини Б. Можна лише сказати про те, що курчата обох груп були успішно імунізовані. Відмінності в середньому значенні титру можуть бути спричинені відмінностями в наборах чи іншими умовами. За значенням середнього титру можна оцінювати якість вакцинації (погана чи хороша), але не порівнювати різні вакцини. При ІФА найістотнішим критерієм для оцінки результатів є однорідність титрів, яка залежить, головним чином, від якості вакцини, умов її транспортування та зберігання, техніки вакцинації курчат. Для перевірки якості вакцинації можна провести додаткове дослідження зразків сироватки у курчат 45-денного віку. У наведених дослідженнях середній титр антитіл у курчат 45-денного віку становив 3398 (рис. 6) з коефіцієнтом варіації 23% (висока однорідність).