Імуномодулюючі властивості ендогенного інтерферону

ІМУНОМОДУЛЮЮЧІ ВЛАСТИВОСТІ ЕНДОГЕННОГО ІНТЕРФЕРОНУ У ТЕЛЯТ

І.А.ОСМАЄВ, К.П.ЮРОВ ВНДІЕВ ім. Я. Р. Коваленко М.П.НЕУСТРОЄВ Якутський НДІВГ

З часу відкриття Айзеке і Лінденман (1957) інтерферону встановлено широкий спектр біологічної активності інтерферонових білків, які поряд з іншими цитокінами мають численні властивості, включаючи антивірусну дію, регулювання взаємодії головних інтегративних систем організму - нервової, імунної, ендокринної.

Система інтерферону не має спеціалізованих клітин або органів, вона існує у кожній клітині, яка у разі вірусної інфекції має бути захищена від зараження вірусом (Ф.І. Єршов, О.І. Кисельов, 2003). Розрізняють три основні типи інтерферонів: альфа – а, бета – b та гамма – у.

Створення технології отримання генно-інженерних інтерферонів дозволило, зокрема, з'ясувати відповідальність кожного білка за той чи інший захисний ефект. Так, у-інтерферон є активатором макрофагів і посилює їхню протипухлинну активність, пригнічує внутрішньоклітинних паразитів. При вірусній інфекції він викликає зміни поверхні клітинної мембрани, що захищає клітини від проникнення вірусу, порушує внутрішньоклітинний синтез вірусів внаслідок посилення утворення ферменту олігоаденілатсинтетази та ін.

Завдяки рекомбінантній технології до медичної практики увійшли чисті препарати інтерферонів, які мають широкий спектр дії у людини. Не менше значення феномен вірусної інтерференції має і ветеринарії. Проте внаслідок низки об'єктивних причин у багатьох випадках використання чистих інтерферонів на тваринах економічно мало виправдане чи неефективне, незважаючи на всі їхпозитивні властивості щодо антивірусної, антибактеріальної, протипухлинної дії або гармонізації гомеостазу, у тому числі імуногенезу. p align="justify"> Найбільш перспективним напрямом у ветеринарії, на нашу думку, є пошук активних індукторів ендогенного інтерферону, в першу чергу активних природних індукторів захисних білків клітини. Сумарний ефект захисної дії а-, b-, у-інтерферонів в організмі як результат застосування вдало підібраного індуктора може бути використаний у комплексі профілактичних та лікувальних заходів при вірусних інфекціях сільськогосподарських тварин.

Все це визначило мету нашого дослідження - оцінити вплив індукованого ендогенного інтерферону на формування захисних реакцій організму при вакцинації телят проти інфекційного ринотрахеїту (ІРТ) та парагрипу (ПГ-3), використовуючи як індуктор культуру В. subtilis.

Матеріали та методи.Мікроорганізми: культура В. subtilis, вирощена на МПБ з концентрацією бактеріальних клітин 2 млрд/мл (комерційний препарат сахабактисубтил); вірус інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби, штам ТК – А; аглютинуючий антиген ПГ-3; вакцина, асоційована проти ІРТ та ПГ-3, виробництво Ставропольської біофабрики; вірус везикулярного стоматиту (ВПС), штам Індіана; тварини: телята віком 5,5 - 6 міс; культура клітин: MDBK, на середовищі Голка Мем з 10% сироватки великої рогатої худоби.

Шість телят поділили на три рівні групи. Тваринам першої групи підшкірно вводили по 3 мл культури Ст subtilis, а через 3 дні асоційовану вакцину проти ринотрахеїту (штам ТК - А) і ПГ-3, телятам другої групи - культуру Ст subtilis (індуктор інтерферону) одночасно з вакцинним вірусом, в третьої (позитивний контроль) щепили тількивакцину проти ринотрахеїту.

До вакцинації та введення культури В. subtilis у телят визначали до вірусу ІРТ та ПГ-3 імунний (в РН та РТГА) та інтерфероновий статус.

Перші 6 днів досвіду від телят щодня отримували проби крові, потім кров брали на 30-й і 75-й дні відповідно.

Для визначення загального (сумарного) інтерферону сироватку крові прогрівали при 56 - 57 °С протягом 1 години. Реакцію нейтралізації (РН) з вірусом ІРТ проводили за стандартною методикою з використанням 96 пластикових мікропанелей фірми Nunc.

За позитивний результат приймали розведення сироватки крові, при якому репродукція вірусу пригнічується на 50%.

Результати та обговорення.У попередньому досвіді на 2 телятах було показано, що підшкірне введення культури В. subtilis викликає утворення у телят ендогенного інтерферону. Протягом наступних 3 діб (термін спостереження) титр інтерферону в крові телят становив 1:16 проти 1OOTCD5oMn ВПС та знизився на другу добу до 1:8. Віруси ІРТ та ПГ-3 є досить активними індукторами інтерферону. У нашому досвіді щеплення телятам третьої групи асоційованої вакцини стимулювало у них продукцію цього інгібітора на 4 добу до титру 3 log2 з подальшим зниженням до 30-го дня.

У першій та другій групах введення вакцини та культури В. subtilis призводило до істотного зниження титру інтерферону (1,5 - 2,5 log2) у ті ж терміни дослідження, з подальшим підвищенням його рівня на 3-ю та 4-ту добу.

Використані у цьому досвіді телята мали гуморальні антитіла до вірусів ІРТ та ПГ-3, що було встановлено дослідженням їх сироваток крові у РН та РТГА відповідно.

Вакцинація цих телят асоційованою вакциною призвела до зниження через 48 годин титру антитіл до обох вірусів. При цьому найбільше зниження рівня антитіл відзначали у телят третьої групи тварин, яким вводили Ст subtilis, зменшення кількості антитіл було менш виражено, особливо при одночасному введенні вакцини та індуктора інтерферону (ІІ). У наступні терміни спостереження рівень антитіл до вірусів ІРТ та ПГ-3 відновлювався і на 3 – 4 добу перевищував вихідні показники у 4 – 8 разів.

Інтерфероніндукуюча активність властива дуже строкатій групі високо- та низькомолекулярних природних та синтетичних сполук (Ф.І.Єршов, 1998; В.В.Зверєв та співавт., 2002).

У ветеринарній практиці переваги ІІ перед екзогенними інтерферонами визначається кількома факторами. При використанні ІІ утворюється власний інтерферон (ІФН), який на відміну від рекомбінантних не має антигенності, при одноразовому введенні індуктор забезпечує тривалу продукцію ІФН, тоді як для досягнення подібних концентрацій необхідні багаторазові ін'єкції екзогенного ІФН, що в більшості випадків неможливо в умовах тварини. Використання ІІ знижує ризик розвитку аутоімунних реакцій та надає імуно-моделюючий вплив (Ф.І.Єршов та співавт, 1983; Ф.І.Єршов, 1998).

У наших дослідах показано, що Ст subtilis (ІІ) індукує утворення ІФН як у вигляді монопрепарату, так і при спільному парентеральному введенні з двовалентною (асоційованою) вакциною ІРТ і ПГ-3 великої рогатої худоби. При одночасному введенні відзначають виражений імуностимулюючий ефект щодо обох вірусів, що реєструється за збільшенням у 4 - 8 разів титру виукраінспецифічних сироваткових антитіл.

Висновок.Ендогенний інтерферон, що утворюється утелят у відповідь на парентеральне введення культури Ст subtilis, впливає на динаміку імунної відповіді до вірусів ІРТ і ПГ-3. Більше виражене підвищення імунної реакції відмічено при одночасному введенні вакцини ІРТ та ПГ-3 та індуктора інтерферону (В. subtilis).