Методи визначення

Розрізняють так зв. «тваринний» індикан, що виявляється в крові та сечі тварин і людини, який являє собою калієву або натрієву сіль індоксилсерної або індоксилглюкуронової кислоти (див. Індол), і «рослинний» індикан, що зустрічається в індигоносних рослинах (горець фарбувальний, олеандр фарбувальний і ін) і є глюкозидом індоксилу. Рослинний І. використовується як вихідний продукт для отримання індиго.

визначення

методи

Будова І. була встановлена ​​А. Байєром в 1905 р. «Тваринний» І. являє собою безбарвні кристали, що відрізняються гірким смаком, легко розчиняються у воді. Усі види І. при кислотному або ферментативному гідролізі дають індоксил:

визначення

«Тваринний» І. утворюється в печінці людини і тварин у процесі знешкодження індоксилу, що надходить з кров'ю ворітної вени і є продуктом життєдіяльності мікрофлори кишечнику. Гідроксильна група індоксилу етерифікується сірчаною або глюкуроновою кислотою. І., що утворюється в печінці, надходить у кров і виводиться із сечею. У нормі в сироватці крові міститься 0,02-0,08 мг% І., із сечею на добу у здорової людини виділяється від 5 до 20 мг І.

Методи визначення

У крові присутність І. визначають за допомогою якісної реакції, що має назву проби Розенберга. Сироватку крові або кров беруть в облогу рівною кількістю 20% трихлороцтової до-ти, після чого центрифугують; 1 мл центрифугату наливають у тонкостінну пробірку, по стінці якої обережно додають конц. соляну до-ту. Через кілька хвилин на межі рідин утворюється фіолетове кільце. Позитивність проби визначають за швидкістю появи та інтенсивністю забарвлення цього кільця. Проба позитивна завжди важкої ниркової недостатності.

При визначенні І. сечі до 2-3 млбезбілкової сечі доливають рівний об'єм конц. соляної к-ти з уд. вагою 1,19, кілька крапель 2% марганцевокислого калію та 10-15 крапель хлороформу. Вміст пробірки ретельно перемішують. У присутності І. хлороформ забарвлюється у синій колір. Інтенсивність забарвлення пропорційна кількості синього індиго, що утворився. Слід врахувати, що надлишок марганцевокислого калію окислює синє індиго в ізатин, що має жовтий колір. Модифікацією цієї якісної проби на присутність І. у сечі є так зв. реакція Яффе: до 15 мл сечі додають 1,5 мл ацетату свинцю (10% розчин), фільтрують, до фільтрату додають рівний об'єм конц. соляної к-ти, 2-3 краплі 5% хлористого кальцію та 2-3 мл хлороформу, ретельно перемішують. Якщо сеча нормальна, водний шар забарвлюється в зелено-синій колір, а хлороформний — у синій.

У тих випадках, коли досліджуваний приймав лікарські речовини, що містять йод, хлороформна витяжка сечі забарвлюється в рожевий або червоний колір, іноді з фіолетовим відтінком. Червоне забарвлення зникає після додавання невеликої кількості гіпосульфіту.

Бібліографія:Каррер П. Курс органічної хімії, пров. з ньому., с. 693 та ін., Л., I960; Майстер А. Біохімія амінокислот, пров. з англ., с. 409, М., 1961; Carbohydrates, ed. by W. Pigman, p. 543, N. Y., 1957; Handbuch der Pflanzen-pliysiologie, hrsg. v. W. Ruhland, Bd 6, S. 761, B. u. a., 1958.