Міжклітинні взаємодії в крові в патогенезі порушень гемостазу у хворих на хронічну ниркову
Порушення у системі гемостазу одна із поширених ускладнень захворювань нирок, їх частота і тяжкість корелюють зі ступенем втрати функції нирок під час прогресування захворювання. При хронічній нирковій недостатності (ХНН) описані як геморагічні, так і тромбоемболічні ускладнення [6, 15]. У хворих на ХНН виникають порушення реології крові, системи згортання та протизгортання, судинної стінки, які призводять до цілого ряду клінічних проявів. Основною причиною цих порушень є уремічна інтоксикація, і відповідно їхня тяжкість зменшується після початку адекватної замісної терапії. У той же час гемодіаліз як основний метод еферентної терапії у хворих на ХНН може посилювати розвиток тромбогеморагічних порушень. Хронічний гемодіаліз як процедура, пов'язана з підключенням екстракорпорального кола кровообігу, з одного боку, робить свій внесок у протромбогенний стан, викликаючи активацію тромбоцитів при контакті з чужорідними поверхнями, зниження рівня кофакторів гепарину та підвищуючи рівень факторів згортання [18]. З іншого боку, процедура гемодіалізу має позитивний ефект, знижуючи рівень уремічної інтоксикації. Крім того, хворі на ХНН, що перебувають на гемодіалізі, часто отримують як антиагреганти, так і непрямі антикоагулянти з метою запобігання тромбозу судинного доступу, а також у зв'язку з низкою супутніх захворювань. Нами встановлено, що ряд ендогенних регуляторів гомеостазу, що циркулюють у крові, таких як еритропоетин, церулоплазмін, альфа-1-кислий глікопротеїн, позитивно впливають на стан системи гемостазу [1, 2, 5, 9].
Матеріали та методи дослідження
Для реалізації поставленої мети використано кров хворих людей з ХНН – пацієнтіввідділення діалізу ДБУЗ «Челябінська обласна клінічна лікарня». Спочатку обстежено 160 хворих з термінальною стадією ХНН у віці від 22 до 72 років (середній вік 45,5 року), які отримують гемодіалізну терапію на апаратах «Штучна нирка» 4008S/BIBAG фірми «Fresenius» (Німеччина) 3 рази годин. Після рандомізації до дослідження включено 24 хворих, з них 12 жінок та 12 чоловіків. Група 1 – контроль (n = 25) представлена клінічно здоровими людьми – добровольцями, які не мають соматичної патології та порівняні за віком та статтю з основними групами. Група 2 – хворі на ХНН до процедури гемодіалізу (n = 24). Група 3 – хворі на ХНН після процедури гемодіалізу (n = 24). Кров для досліджень у хворих забиралася з артеріального коліна артеріо-венозної фістули. Для клінічної оцінки стану судинно-тромбоцитарного гемостазу у хворих на ХНН використовували манжеточну пробу Румпеля-Лееде-Кончаловського та вимірювання часу кровотечі за Дьюком. Кількість тромбоцитів у периферичній крові визначали на гематологічному аналізаторі фірми Orphee (Японія). Оцінка тромбоцитарно-лейкоцитарних взаємодій виконувалася методом проточної цитометрії на проточному цитофлюориметрі "FACS Canto-II" ("Becton Dickinson", США). Як реактиви використовували моноклональні антитіла: CD61+-FIT («Beckman Coulter», США) – для визначення Gp IIb/IIIa; CD41+-FIT ("Beckman Coulter", США) - для визначення Gp IIb; CD42b+-РЕ (Becton Dickinson Pharmingen, США) – для визначення Gp Ib. Субпопуляції лейкоцитів (лімфоцити, моноцити та гранулоцити) виділяли на основі інтенсивності експресії CD45 та характеристик світлорозсіювання клітин. Експресію на тромбоцитах CD61+; CD41+; CD42b+ оцінювали за середньопіковим значенням в умовних одиницях флюоресценції(у.о.ф.). Оцінка тромбоцитарно-лейкоцитарних кооперацій здійснювалася за відносною кількістю лімфоцитів, моноцитів, гранулоцитів, що взаємодіють із тромбоцитами. Тромбоцитарно-еритроцитарні взаємодії досліджували у суспензії еритроцитів та тромбоцитів. Коагрегати диференціювали на малі (1–3 еритроцити та 1–3 тромбоцити) та великі (більше 3 еритроцитів та/або тромбоцитів) [4]. Статистичний аналіз проведено за допомогою пакету прикладних програм Statistica for Windows 6.0.
Результати дослідження та їх обговорення
У хворих на ХНН до процедури гемодіалізу в порівнянні з групою здорових людей час кровотечі подовжується в середньому на 60%, кількість петехій у манжеточній пробі збільшується в середньому в 6 разів (табл. 1).
Клінічні тести оцінки гемостазу у хворих на ХНН (M ± m)