Порівняльний аналіз відкритих та закритих автоматичних систем для проведення скринінгових
Ж.К. Буркітбаєв, Т.М. Савчук
Науково-виробничий центр трансфузіології, м. Астана
Трансфузіологія №1, 2013
Резюме
У ході дослідження встановлено, позитивні та негативні фактори лабораторних автоматичних систем, що використовуються, і показано перевагу закритих лабораторних автоматичних систем. Це дослідження стало підставою для впровадження систем закритого типу для скринінгу донорів крові на гемотрансмісивні інфекції в Науково-виробничому центрі трансфузіології міста Астани.
Ключові слова:відкриті лабораторні автоматичні системи, закриті лабораторні автоматичні системи
Запровадження
Загальноприйнятою світовою практикою вважається тестування донорської крові на наявність гемотрансмісивних інфекцій паралельно двома взаємодоповнювальними методами – імунологічним та молекулярно-біологічним. Обидва ці методи на сьогоднішній день досить удосконалені в плані автоматизації. У практиці застосовують як напівавтоматизовані системи, коли частина роботи виконується людиною і лише окремі етапи – з використанням приладів, так і автоматизовані системи, що виконують більшу частину маніпуляцій з досліджуваним матеріалом і реагентами в автоматичному режимі. Водночас, автоматизовані системи також можна піддати подальшій класифікації за рівнем автоматизації та виключення впливу «людського фактора» на результат, розділивши на системи «відкритого» та «закритого» типу. Так, згідно з Рекомендаціями ВООЗ «Скринінг донорської крові на гемотрансмісивні інфекції» (2010 рік), відкриті системи дозволяютьпроводити дослідження з допомогою реагентів від будь-якого виробника, у своїй прилад і самі аналізи пов'язані між собою. Відкрита система вимагає більш відточених практичних та технічних навичок. Закриті системи повністю автоматизовані та використовують лише специфічні, предметно-орієнтовані тести з усім набором необхідних реагентів та контролів, що випускаються виробником обладнання самостійно або у співпраці. Автоматизовані системи асоціюються з високим рівнем стабільності та відтворюваності при постановці реакції та сприяють зменшенню помилок оператора [1, 2]. З метою стандартизації виконуваних досліджень та покращення якості достовірності одержуваних результатів у Науково-виробничому центрі трансфузіології необхідне обґрунтування запровадження повної автоматизації всіх лабораторних етапів.
Результати та обговорення
Наявність в арсеналі Науково-виробничого центру трансфузіології (НВЦТ) кількох аналізаторів різного типу для скринінгу донорської крові на наявність маркерів трансфузійних інфекцій дозволила провести власний порівняльний аналіз роботи з використанням систем відкритого та закритого типу. Ι. Імунологічний скринінг. На аналізаторах відкритого типу можна використовувати діагностичні реагенти від будь-якого виробника, це робить лабораторію незалежною у виборі найбільш відповідних тест-систем як за якістю, так і за ціною. Однак, не всі виробники тестів надають достатній обсяг реагентів у наборі, що, очевидно, обумовлено розрахунком на роботу з використанням напівавтоматичних систем. Особливо це помітно під час роботи з реагентами українського виробництва (ЗАТ «Вектор-Бест», НВО «Діагностичні системи»). При цьому, якщо набір реагентів ділиться на кілька постановок, топовною мірою його не вийде, оскільки частина реагентів закінчиться раніше. Виробники аналізаторів закритого типу випускають реагенти та контролі, які повністю адаптовані до приладу, що використовується. При використанні таких приладів досить високий рівень контролю якості досліджень, що виконуються. Є внутрішній контроль за станом реагентів та проведенням досліджень. Усі реагенти мають бар-коди, якими прилад їх розпізнає і відстежує терміни придатності, їх стабільність тощо. У закритих системах втручання оператора у дослідження зведено до мінімуму. Більш детальне порівняння цих двох типів автоматичних лабораторних систем представлено в табл. 1. З наведеного порівняння видно, що закриті системи виграють за низкою позицій: економічної рентабельності, продуктивності та зручності у застосуванні. Крім того, при роботі на цьому обладнанні ми відзначили високу відтворюваність тестів та зменшення кількості хибно-позитивних результатів. Так, при переході на використання систем закритого типу в НВЦТ рівень підтвердження первинно-позитивних результатів зріс у середньому із 70 до 88%.
2. Молекулярно-біологічний скринінг. За аналогією з імунологічним скринінгом, ПЛР аналіз можна виконувати як у напівавтоматичному режимі, коли автоматизовано останні дві стадії процесу, так і в автоматичному режимі, коли всі процеси, включаючи пулювання проб, виконуються автоматами. Необхідно відразу відзначити, що для масового скринінгу (наприклад, донорської крові) напівавтомати не підходять через велику кількість маніпуляцій, що потребують значних витрат часу. Автоматичні системи для ПЛР можуть бути відкритого і закритого типу. При роботі на системах відкритого типу реагенти та прилад спочатку мають бутипристосовані один під одного, що не може не вплинути на негативний вплив на процес дослідження і його якість. Крім того, під час використання автоматичних систем відкритого типу частина робіт виконується людиною (підготовка реагентів, перенесення ампліфікаційної суміші тощо). Не у всіх відкритих автоматичних системах для ПЛР, на відміну від закритих, можна відстежувати зразки за індивідуальними номерами (штрих-кодами). У закритих системах така можливість надана, тобто, починаючи з моменту завантаження зразків до приладу до закінчення дослідження, зберігається ідентифікація проб. При використанні відкритих систем вся відповідальність щодо відстеження зразків, а також за якістю приготування реагентів лягає на лаборанта, що створює передумови виникнення помилок на аналітичному етапі. З нашого досвіду можемо сказати, що приблизно в 70% випадках через технічні похибки результат не може бути врахований і потрібне нове дослідження. Працюючи на автоматах закритого типу таке трапляється дуже рідко – в 0,3% випадків. Загалом банки крові у всьому світі використовують повністю автоматизоване обладнання. Вплив суб'єктивних чинників, пов'язаних із технічним персоналом (приготування реагентів, піпетування зразків, час інкубації та ін.), виключається, що суттєво відбивається на результатах аналізів.
Висновок
У ході дослідження встановлено позитивні та негативні сторони використовуваних лабораторних автоматичних систем. Показано перевагу закритих автоматичних лабораторних систем. Виключення впливу людського фактора на результати досліджень, наявність системи готових до використання реагентів на «бор-ту» приладу, вбудованої системи контролю якості є важливими умовами забезпечення безпекитестування та перевагою систем закритого типу. Дане дослідження стало першим мотиваційним чинником для пошуку додаткових підстав впровадження діагностичних систем закритого типу у практику скринінгу донорської крові на гемотрансмісивні інфекції у службі крові Казахстану.