РОЛЬ ЦИТОЛОГІЧНОГО ДОСЛІДЖЕННЯ СИНОВІАЛЬНОЇ РІДИНИ В ДІАГНОСТИЦІ ДЕГЕНЕРАТИВНО-ДИСТРОФІЧНИХ

В'ячеслав Хметевський 2 роки тому Переглядів:

1 Курський науково-практичний вісник "Людина та її здоров'я", 2005, 1 УДК РОЛЬ ЦИТОЛОГІЧНОГО ДОСЛІДЖЕННЯ СИНОВІАЛЬНОЇ РІДИНИ В ДІАГНОСТИЦІ ДЕГЕНЕРАТИВНО-ДИСТРОФІЧНИХ СИВ. Нетяга А.А. Кафедра травматології, ортопедії та екстремальної хірургії; кафедра оперативної хірургії та топографічної анатомії Курського державного медичного університету В експерименті на прикладі ушкодження суглобового хряща показано роль цитологічного дослідження синовіальної рідини у діагностиці дегенеративно-дистрофічних змін суглобів. Як діагностичний критерій запропоновано клітинний індекс, що визначає характер перебігу патологічного процесу в суглобі після травм суглобового хряща. На підставі клітинного індексу встановлено статистично достовірну залежність ступеня дегенеративно-дистрофічних змін суглоба у віддаленому періоді після травми від вираженості запальних змін у ньому на ранніх термінах. Зроблено висновок про прогностичну значущість запропонованого індексу та про можливість його використання в експериментальній та клінічній практиці. Ключові слова: синовіальна рідина, цитологічне дослідження, дегенеративно-дистрофічні зміни суглобів. У experimental study на моделях різьблення articular cartilage роль cytologic examination of synovial fluid in diagnose of degenerate - dystrophic changes of joints is shown. Секторний index є diagnostic test, що визначає характер pathological process в joint after damage of articular cartilage isfered. On the ground of a cellular indexстатистично вірне dependence of degree of degenerate - dystrophic changes of joint in remote period after trauma from expressiveness of inflammatory changes in joint on early terms fixed. Висновок про прогресивну важливість і ймовірність структурного індексу використання в experimental and clinic practice is made. Key words: synovial fluid, cytologic examination, degenerate - dystrophic changes of joints. Синовіальна оболонка, суглобовий хрящ та синові, взаємопов'язані між собою та функціонуючі спільно, позначені В.М. Павловою як синовіальне середовище суглоба [3]. Процеси, що протікають у будь-якому з цих компонентів, неминуче спричиняють зміни складу синовіальної рідини. За даними літератури, для діагностики «запальних» та «незапальних» захворювань суглобів повною мірою може бути використаний цитологічний метод [1, 5]. Так, одним із найбільш чутливих критеріїв у диференціальній діагностиці є цитоз. При «механічній» патології суглобів цитоз невеликий (менше 1000 клітин/мм3), а при запальних захворюваннях він значно вищий (понад 1000 або 2000 клітин/мм3) [5]. Крім загальної кількості клітинних елементів, важливе значення у діагностиці патології суглобів має якісний склад синовіальної рідини. Відомо, що збільшення вмісту поліморфноядерних нейтрофілів, лімфоцитів, еозинофілів та моноцитів вказує на запальний характер змін суглобів [2, 5], а переважання тканинних клітинних елементів говорить про деструкцію хряща та про розвиток фібробластичних процесів у суглобі [6]. Враховуючи, що розвиток дегенеративнодистрофічних змін суглобів йде через запалення, через артрит та синовіт [4], а характер перебігу захворювання залежить від співвідношення тих чи іншихклітинних елементів синовіальної рідини, ми зробили спробу розробити методику, що дозволяє об'єктивно оцінювати характер перебігу патологічного процесу в суглобах і прогнозувати подальший розвиток їх дегенеративно-дистрофічних змін. МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ Експерименти були проведені на 129 щурах-самцях лінії Вістар. Тварин розділили на 2 групи: дослідну (109 живіт- 45

2 Клінічна медицина) та групу порівняння (20 тварин). У дослідній групі моделювалося пошкодження колінного суглоба. Групу порівняння становили інтактні тварини. Моделювання пошкодження суглобів здійснювалося механічним методом нашої модифікації. Під ефірним наркозом в асептичних умовах розсікалася шкіра, власна зв'язка надколінка та капсула колінного суглоба. У порожнину суглоба вводилася голка Дюфо, обточена під кутом 90, орієнтована на хрящ внутрішнього виростка стегнової кістки. Рухами, що загвинчують, перфорувався суглобовий хрящ до упору в субхондральну кістку, потім голка видалялася. Отримання фрагмента суглобового хряща контролювалося мандреном. Шви на рану накладалися через усі шари та оброблялися 5% спиртовим розчином йоду. Дегенеративно-дистрофічні зміни у суглобах вивчалися з виведення експериментальних тварин з досвіду протягом перших 4 тижнів після операції моделювання. Враховуючи, що зміна клітинного складу синовіальної рідини при патологічному процесі є важливим показником стану суглоба, а динаміка цих змін може інформувати про закономірності перебігу захворювання [3], нами було здійснено цитологічне дослідження синовії. Синовіальну рідину для цитологічного дослідження одержували пункцією суглоба. З одержаної рідини готували мазки, які фіксувалиметанолом і фарбували за Романовським-Гімзом. У разі відсутності необхідної кількості синовіальної рідини в суглобі готували мазки відбитки з поверхні суглобового хряща та синовіальної оболонки. Вивчення отриманих препаратів термінах 1, 3, 5, 7, 15, 21, 28 добу від початку експерименту проводили з використанням світлової імерсійної мікроскопії. Звертали увагу на якісний та кількісний склад синовіальної рідини, підраховували відсоткове співвідношення основних клітинних елементів. На підставі підрахунку синовіоцитограм і виходячи з ролі окремих клітинних елементів у розвитку дегенеративнодисторофічних змін у суглобі, нами 46 був запропонований клітинний індекс, що представляє собою відношення клітин тканинного походження (синовіоцитів типу А і Б, а також їх атипових і форм, що розпадаються), що є маркерами змін [6] до клітин крові (нейтрофілів, лімфоцитів та моноцитів), що визначають запальний характер патологічного процесу в суглобі [7, 8, 9]. Крім цитологічного дослідження, про виразність дегенеративно-дистрофічних змін судили на підставі гістологічного вивчення суглобів через 28 діб, 2 та 6 місяців після моделювання. Зрізи, що проходять через обидві суглобові поверхні товщиною 5 10 мкм, фарбувалися гематоксилін-еозином і пікрофуксином Ван Гізон. При мікроскопії звертали увагу на стан суглобового хряща, синовіальної оболонки та субхондральної кістки. Для статистичної обробки матеріалу використано методи однофакторного дисперсійного та кореляційного аналізів. Обчислювалися середні величини кількісних показників, середні помилки середніх величин, коефіцієнт кореляції. Достовірність відмінностей середніх величин оцінювалася з допомогою критерію Стьюдента. Для обчисленьвикористовувалися електронні таблиці додатка Microsoft Excel. дезорганізацією структури та дегенерацією хондроцитів (рис. 1а), запальними змінами синовіальної оболонки та реактивною перебудовою субхондральної кістки. Отримані в експерименті зміни суглобів мали незворотний характер, що підтверджувало проведене гістологічне дослідження термінами 2 та 6 місяців з моменту травми. У препаратах відзначалася груба деформація

3 Курський науково-практичний вісник "Людина та її здоров'я", 2005, 1 суглобових поверхонь з атрофією та кальцинозом хрящової тканини, картина вираженого хронічного продуктивного синовіту з явищами клітинного паннуса (рис. 1б) та часткова фіброзна облітерація порожнини суглоба. Рисунок 1. Морфологічні зміни суглобів тварин дослідної групи: а 28 добу після травм суглобової поверхні, ув. х200, окр. гематоксилін-еозин; б 2 місяці після травми суглобової поверхні, пов. х80, окр. гематоксилін-еозин. Цитологічне дослідження показало, що у синовіальній рідині у першу добу після травми суглоба у контрольній групі більшість клітин становили нейтрофіли (рис. 2а). До 7 діб у мазках переважали лімфоцити (рис. 2б). У подальшому до 15 діб відносна кількість нейтрофілів і лімфоцитів знижувалась за рахунок збільшення тканинних клітинних елементів макрофагоподібних синовіоцитів типу А з різко вакуолізованою цитоплазмою, що перебувають у реактивному стані, та фібробластоподібних синовіоцитів типу Б(Рис. 2в). На цих термінах привертала увагу поява в синовіальній рідині плазмоцитів. Далі до 28 діб у мазках, як і раніше, переважали клітини тканинного походження, причому більшість з них перебувала в стані розпаду. Синовиоцити типу Б деяких випадках розташовувалися як скупчень (рис. 2г). Нами було встановлено, що співвідношення Рисунок 2. Морфологічні зміни синовіальної рідини тварин дослідної групи: а 1 добу після травм суглобової поверхні, ув. х900, окр. по Романівському-Гімза; б 7 добу після травми суглобової поверхні, пов. х900, окр. по Романівському-Гімза; у 15 добу після травми суглобової поверхні, пов. х900, окр. по Романівському-Гімза; м 28 добу після травми суглобової поверхні, пов. х900, окр. по Романівському-Гімза. 47

---