Сироватка проти отрути змії ефа
М. І. Максіанович (1940), А. С. Садиков (1961) для отримання гіперімунної сироватки проти отрути змії ефи (Echiscarinatus - рід отруйних змій із сімейства гадюк) як антиген використовували формалінізовану отруту. Авторам вдалося отримати кінську нативну сироватку антиефа, проте вона мала надзвичайно низьку активність, що не перевищувала 1,5-2,0 DCL/мл при титруванні на кроликах.
Р. Л. Джавакова із співавт. (1971), А. А. Абідов із співавт. (1972) порівняли 2 схеми імунізації на двох групах коней. Одна група коней (контрольна) імунізувалася 1%-ним анаядом ефи з 5-денними інтервалами за схемою 3-6-12-20-30-40-50 мл, що відповідало 30-60-120-200-300-400-500 мг отрути. Усього витрачено 1,61 г отрути. Як депонент використовувалася ланоліново-масляна емульсія з кожною дозою антигену (6-10-15-30-35-40-50 мл ад'юванту).
Друга група (дослідна) імунізувалася нативною отрутою 0,1-0,2-0,4-0,7 мг з інтервалами в 2-3 дні, потім через 5 днів 1-2-4-7-10-20-30- 40-60-100 мг отрути. Усього близько 300 мг. Наступні цикли складалися з 10 ін'єкцій та починалися з 1 мг отрути. Депонент у вигляді ланоліновомасляної емульсії застосовувався двічі в кожному циклі (в 1-му - з 9-ю та 11-ю ін'єкціями, у наступних - з 5-ю та 6-ю ін'єкціями). Кров забиралася на 6 день після імунізації.
Автори показали, що при імунізації анаядом титри антитіл були низькі: після 6-го циклу менше 5 АЕ/мл, у концентрованій - 8-10 АЕ/мл, у той час як при імунізації отрутою - 70-120 АЕ/мл і 250- 370 АЕ відповідно.
Сироватка проти отрути ефи була очищена та сконцентрована методом Діаферм (Р. Л. Джавакова зі співавт., 1971). У готовому препараті навантаження на 0,1 г білка в середньому дорівнювало 180 DSL.
Полівалентна протиодна сироватка (антигюрза, антиефа, антикобра)
У зв'язку зі специфічністю імуноглобулінів гіперімунних протизміїних сироваток для ефективності серотерапії необхідно знати вид змії, яка вчинила укус. Однак у зв'язку з великою різноманітністю їх в окремих районах визначити вид змії не завжди є можливим. У цих випадках використання полівалентної протиотрутної сироватки здатне викликати потрібний лікувальний ефект. Приготування такої сироватки було здійснено А. А. Абідовим із співавт. (1972).
У наступних циклах імунізації (починаючи з 6-го) число ін'єкцій було скорочено до 6. Антиген вводився і в дозах від 10 до 100 мг усіх трьох отрут. Титри сироватки були: антигюрза - 15 АЕ/мл, антиефа - 20 АЕ/мл і антикобра - 5 АЕ/мл. При переведенні під полівалентну імунізацію продуцентів імуноглобуліну антикобра і містять у сироватці після 3-го циклу моновалентної імунізації від 1,5 до 5 АЕ/мл дозволяє також отримати полівалентну сироватку, що містить антитіла в титрі 1,5 АЕ/мл - антигюрза, мл - антиефа і 8 АЕ/мл - антикобра.
Сироватка очищалася та концентрувалася методом Діаферм-3. У концентрованому вигляді вона містила антитіла проти всіх 3 видів у кількості 60-90 АЕ/мл - антигюрза, 60-80 АЕ/мл - антиефа і 10-15 АЕ/мл - антикобра.
Для виявлення сили протиотрутних сироваток М. І. Максіанович (1949) титрував їх на кроликах шляхом внутрішньовенного введення суміші сироватки з безумовно смертельною дозою (DCL) отрути.
А. С. Садиков (1953, 1955) запропонував титрувати сироватки антиефа на білих мишах, а М. С. Сулейманян (1955) аналогічно сироватки антигюрзу. Принцип методу полягав у внутрішньовенному введенні тваринам витриманої при 37 30 хвилин суміші сироватки з однієї DCL отрути в обсязі 0,5 млфізіологічний розчин.
В даний час активність протизміїних сироваток перевіряється на білих мишах вагою 16-18 г за допомогою реакції нейтралізації. Для цього 0,2 мл різних розведень сироватки з'єднується з 0,3 мл дослідної дози отрути, прититрованої до 1 АЕ національного стандарту, і після 45-хвилинної експозиції при 37° вводиться внутрішньовенно білим мишам. Максимальне розведення сироватки, яке в суміші з дослідною дозою отрути оберігає від загибелі 50% білих мишей, містить 1 АЕ 0,2 мл розведення або 5 АЕ 1 мл. Титр випробуваної сироватки одержують, помножуючи 5 АЕ на розведення сироватки.
Як ми вже вказували, протизміїна сироватка випускається в очищеному та концентрованому методом Діаферм-3 вигляді. У Франції запропоновано очищення методом спиртового осадження.
Для лікування укушених протизміїна сироватка вводиться якомога раніше в залежності від ступеня інтоксикації: при легкому ступені отруєння - 500-1000 АЕ, при середній тяжкості - 1500 АЕ, при тяжких випадках - 2000-2500 АЕ, при цьому при легкій та середній тяжкості вводиться підшкірно, при тяжкій внутрішньовенно (М. Щ Султанов, 1971).