Спосіб отримання плацентарного лікувального препарату
Власники патенту UA 2400241:
Винахід відноситься до ветеринарії. Спосіб отримання плацентарного лікувального препарату на основі плаценти корів характеризується тим, що в період нутровування стельних корів на скотобійні витягують вагітну матку здорових корів у першу половину тільності (4-5 міс.), збирають нероз'єднані карункули та котиледони з дитячої та материнської плаценти. кривими стерильними ножицями з тканини дитячої плаценти, виконуючи це через поздовжній розріз серозно-м'язово-слизового шару вагітного рогу матки, шляхом проколу голкою хоріально амніотичної оболонки вакуумуванням збирають амніотичну рідину з амніотичного міхура і подрібнюють ють раніше зібрану з цієї матки амніотичну рідину з розрахунку 10:1 гомогенної маси, повільно перемішують і відстоюють, а потім центрифугують при 10 тис. об/хв протягом 10 хвилин, здійснюють консервацію, надосадову частину зливають у флакони і закупорюють. Винахід забезпечує підвищення ефективності препарату 2 табл.
Винахід відноситься до ветеринарії, зокрема способу отримання лікувального тканинного препарату з плаценти сільгосптварин.
Відомий спосіб приготування препарату з плаценти, коли слід, взятий від корови після охолодження і витримки в холодильнику, поміщають у спеціальний посуд з радіопрозорого матеріалу і для відділення рідкої складової від тканин плаценти обробляють мікрохвильовим випромінюванням частотою 2450±50 МГц, що застосовується в побутових НВЧ , при нагріванні сировини не вище 60°С, а рідину, що виділилася в процесі НВЧ-обробки сировини, відокремлюють від тканин плаценти самопливом у кількості від 30 до 60% від вихідної маси сировини, змішуютьз розчином, що розбавляє, і використовують для приготування біостимулятора (1).
Недоліком цього способу є те, що природні лікувальні клітинного виробництва речовини у вигляді нанобіологічних ферментативних і бактерицидних моделей під дією мікрохвильового випромінювання та штучного електричного магнітного поля з частотою 2450±50 МГц при температурі +60°С змінюють біохімічну цитомединовую структуру - Це знижує лікувальний ефект та моноклональність антитіл, бактерицидність, перетворюючи отриманий препарат на препарат з незвіданими мутагенними властивостями. Тому для використання при лікуванні корів та телят може виникнути можливість у перспективі появи мутагенної молочної та м'ясної продукції.
Відомий також спосіб отримання препарату ПДЕ (денатурована плацента емульгована), при виготовленні якого використовуються тканини дитячої плаценти: тканина амніота, хоріона (2).
Найбільш близьким до цього винаходу за техніко-біологічною сутністю досягається результату при використанні є спосіб отримання лікарських речовин з плаценти, що включає подрібнення сировини, проведення слабкого кислотного гідролізу, виділення продукту центрифугуванням, нейтралізацію надосадової рідини, виділення та очищення препарату, сублімаційне висушування (3).
Недоліком цього винаходу є те, що вилучення біостимулюючих, лікувальних речовин природного походження під дією будь-якого ступеня кислотного гідролізу, а також сублімаційної обробки призводить до вилучення зменшеної кількості властивостей лікувального фактора.
Завданням пропонованого винаходу є розробка способу одержання тканинного препарату такими способами, які дозволили б витягти природою створені препарати,що мають лікувальну властивість, з тканин плаценти корів у першій половині тільності, що мають бактерицидні, бактеріостатичні ферменти для використання в подальшому при лікуванні корів з післяпологовими захворюваннями матки.
Мета винаходу - підвищення лікувально-стимулюючої ефективності препарату, що виготовляється з котиледонів та карункулів плаценти, взятої від корів.
Поставлена мета досягається тим, що котиледони з карункулами, взяті з плаценти тільної корови у першу половину тільності (4-5 міс.), багаті на природні наноманіпуляторні цитомединові лікарські речовини т.к. в цей період розвитку плода-теля в амніотичній рідині (продукт котиледонів і карункулів) є максимальна кількість бактерицидних і бактеріостатичних ферментів: лізоцим, комплімент, пропердин та ін., що згубно діють на мікроорганізми з однієї (грампозитивні) та двома (грамнегативні, віруси, грибки) …) мембранами.
Послідовність виконання запропонованого способу полягає в наступному:
- витягають у скотобійні вагітну матку з черевної порожнини корови в період нутрівки та для знезараження зрошують її розчином марганцево-кислого калію 1:1000;
- на стерильному з металевою стільницею столі роблять поздовжній розріз - препаровку скальпелем серозно-м'язово-слизового шарів великого рогу матки (основне плодовмістилище);
- відсмоктують вакуумуванням, проколюючи амніохоріальну оболонку, через стерильну голку в скляні ємності вміст амніону та алантоїсу з амніотичного та алантоїсного бульбашок, залишаючи плід, не руйнуючи єдність дитячої та материнської плаценти (не роз'єднуючи);
- диференціюють придатність котиледонів та карункулів за цілісністю, крупністю відзрощених, патологічних;
- збирають нероз'єднані котиледони з карункулами, відрізуючи їх кривими ножицями стерильними від тканин дитячої і материнської плацент, поміщаючи їх у скляні стерильні ємності з притертими пробками;
- подрібнюють зрізані котиледони з карункулами різанням, а потім у механічному гомогенізаторі протягом 20 хвилин при 6 тис. об/хв;
- додають раніше зібрану з цієї ж матки відстояв, профільтровану, відцентрифуговану амніотичну рідину з розрахунку 10:1 гомогенної маси, і все це повільно перемішують протягом 10 хвилин;
- відстоюють 60 хвилин;
- центрифугують при 10 тис. об/хв протягом 10 хвилин;
- для консервації у фільтрат додають із розрахунку 2 г на 100 мл борної кислоти;
- надосадову частину зливають у флакони місткістю 10, 50, 100, 250 см 3 , закупорюють гумовими пробками, закочують алюмінієвими ковпачками.
Препарат є рідиною білуватого з жовтуватим відтінком кольору, що відповідає вимогам, пред'явленим до лікувальних препаратів.
Практичне випробування запропонованого препарату
Багато лікувальних речовин є в живій тканинній клітині. Під час вагітності між плодовою плацентою за допомогою котиледонів та карункулів є зв'язок плодоносної матері з плодом. У котиледонах і карункулах є бар'єрні тканини, які завжди і не всі поживні, ферментативні, гормональні речовини пропускають через клітинні мембрани. В амніотичній рідині, в септах ворсинок і крипт є велика кількість профілактичних та наностанних ферментів, особливо до першої половини вагітності. Винайдені природою речовини в плаценті за допомогою запропонованого нами способу дозволяють виділити як активні біологічні лікувальніречовини з наявністю наноклональних та імунних антитіл у вигляді нанорегуляторних біологічних моделей персоналізованого спрямування та стовбурових клітин.
Препарат у вигляді рідкого біостимулятора по А.Ф.Колчин і 30% мазі запропонованого препарату використовували при лікуванні корів з післяродовим ендометритом, а також при лікуванні морських свинок з різаними та опіковими пораненнями сідничних м'язів.
Результати лікування тварин пропонованими препаратами з карункулово-котиледонової плацентарної тканини та біостимуляторної рідини з плаценти (за Колчіною А.Ф.) відображені в табл. 1, 2.
| Таблиця 1 | ||||
| Результати лікування морських свинок з пораненнями та опіками | ||||
| Препарат | Тварин лікували (голів) | З них видужало | Термін лікування | |
| число | % | |||
| Котилідоново-карункуловий | Різані рани 8 | 7 | 87,5 | 5 |
| Опікові рани 5 | 4 | 80 | 9 | |
| Плацентарна рідина А.Ф.Колчин | Різані рани 9 | 7 | 77,7 | 9 |
| Опікові рани 7 | 5 | 71,4 | 11 |
З табл. 1 видно, що опікові рани під дією карункуло-котиледонового препарату створюють затягування, купірування та загоєння у 80% хворих на 5 днів раніше, ніж при лікуванні опікових ран плацентарною рідиною А.Ф.Колчіної (марлеві аплікації та зрошення), тобто. лікування опікових ран пропонованим препаратом у вигляді 30% мазі після щоденного змащування було ефективнішим на 8,6%, ніж у контрольній групі тварин. А після лікування різаних ран запропонованим препаратом ефективність була вищою, ніж у контролі на 9,8%.
Хворим коровам з післяродовим цервіцитом через день у канал шийки матки вводили 100 мл,20% карункулово-котиледонову мазь або 100 мл рідкого карункулово-котиледонового препарату. Результати лікування корів відбито у табл. 2. Контрольній групі корів у шийку матки вводили фуразолідонові палички.
| Таблиця 2 | ||||
| Ефективність лікувального препарату при лікуванні корів із запаленням шийки матки | ||||
| Препарат | Корів всього | З них видужало | Терміни одужання (дні) | |
| число | % | |||
| Мазь 20% через 24 години карункулово-котиледоновий препарат | 9 | 8 | 88,8 | 8 |
| Фуразолідонові палички (контроль) | 10 | 8 | 80 | 12 |
З табл. 2 видно, що лікувальний позитивний ефект проявив себе наступним чином: рідка фракція карункулово-котиледоновая і лікувальна 20% мазь виявилася ефективнішою на 8%, ніж у контрольній групі хворих корів.
1. Колчина А.Ф. "Спосіб отримання біостимулятора з плаценти корів", патент (РФ) RU 2138273 С1.
2. Бєляєв В.І., Нежданов А.Г., Лободін К.А., Семініхін І.П., Тюренков І.Т. «Біологічна активність препаратів із плаценти», Ветеринарна практика, №7, 2006, стор.58-61. Журнал 3.
3. Патент США №4054648, МПК 6 А61К 35/50. 1977.
Спосіб отримання плацентарного лікувального препарату на основі плаценти корів, що характеризується тим, що в період нутровування стельних корів на скотобійні витягують вагітну матку здорових корів у першу половину тільності (4-5 міс), збирають не роз'єднані карункули та котиледони з дитячої та материнської котиледони кривими стерильними ножицями з тканини дитячої плаценти, виконуючи це через поздовжній розріз серозно-м'язово-слизового шару вагітного рога матки, шляхом проколу голкою хоріально-амніотичної оболонкивакуумуванням збирають амніотичну рідину з амніотичного міхура, і подрібнюють зрізані котиледони з карункулами різанням, а потім в механічному гомогенізаторі додають раніше зібрану з цієї ж матки амніотичну рідину з розрахунку 10:1 гомогенної маси, повільно перемішують і відстаюють. об/хв протягом 10 хв, здійснюють консервацію, надосадову частину зливають у флакони і закупорюють.