У наших дослідженнях найбільш ефективним хімічним мутагеном виявилася нітрозометилсечовини
У наших дослідженнях найбільш ефективним хімічним мутагеном виявилася нітрозометилсечовини (НММ) у концентрації 0,8 мМоль. Спочатку насіння замочували у воді протягом 8 годин, а потім протягом 3 годин утримували в розчині нітрозометилсечовини.
У дослідах Г.А. Дебелого та А.В. Зекунова (1977) також встановлено високу мутагенну ефективність ННМ у порівнянні з гамма-променями та ЕІ. Найбільша частота та широкий спектр (8 типів) мутації отримані в концентрації НММ 0,015% у сорту Н-846. На сорті Немчіновський синій виділилися за мутагенною ефективністю дві концентрації – 0,015 (12,5% мутантів, 11 типів мутацій) та 0,014 (10,1% мутантів та 12 типів мутацій). Три концентрації ЕІ (0,01; 0,02; 0,034), що вивчалися на двох сортах, виявилися близькими по мутагенній ефективності.
Між контрастними сортами люпину спостерігалися специфічні відмінності. Так, у алкалоїдного сорту Немчіновський синій був значно ширший спектр мутацій, для нього були характерні рецесивні мутації по фарбуванню квітки та насіння, рідше зустрічалися мутації за розміром бобів та насіння. У малоалкалоїдного сорту Н-846 найбільш широкий спектр мутацій спостерігався за ознаками, що визначають габітус та структуру стебла (карлики, компактні, штамбові та ін.). У рівній мірі виділені в обох сортів мутанти з бобами, стійкими до розтріскування та кращою виконаністю. Пізньостиглі мутанти виділені в обох сортів, а скоростиглі - лише у сорту Немчинівський синій. В обох сортів виявлені мутації зі зміненим ритмом росту (мутанти швидкорослі та повільнорослі порівняно з вихідним сортом). У алкалоїдного сорту виділено малоалкалоїдні мутанти. В обох сортів на природному та штучних інфекційних фонах відзначені мутанти, стійкі до фузаріозу.
За J.Hackbarth (1957b), мутанти поділяються навісім груп: 1) листового апарату - ця група включає хлорофільні мутанти, мутанти із зміною інтенсивності забарвлення, антоціанової пігментації та розміру листя; 2) квітки - із зміненим забарвленням квітки; 3) насіння - із зміненою формою, розміром та забарвленням насіння; 4) боба - зі зміненим розміром боба (великобобові, дрібнобобові), виконаністю, з різним ступенем стійкості до розтріскування; 5) фізіологічні - пізньостиглі та скоростиглі, зі зміненим ритмом зростання; 6) біохімічні – зі зміною за вмістом білка та алкалоїдів; 7) стійкості - до хвороб та інших стресових факторів; 8) всієї рослини - мутанти високорослі, карлики, та зі зміненим габітусом (компактні, без гілок, штамбові).
При використанні фізичних факторів (рентгенівського та гамма-випромінювання в дозах від 150 до 250 Гр) враховують потужність дози та біологічні особливості ознак, за якими бажано знайти мутантну форму (Коновалов та ін., 1990). Змінені спадково форми можна відбирати протягом низки поколінь, починаючи з М2.
Природні тетраплоїди іноді зустрічаються також серед дикорослих люпинів із західної півкулі - Lupinus perennis L. (Майсурян, Атабекова, 1974).
Оцінка селекційного матеріалуна інфекційних фонах та шляхом штучного зараження
Люпин схильний до численних захворювань, серед яких найпоширеніші і шкідливі - фузаріоз і антракноз. Хвороби викликають збудники, що належать до різних видів пологів Fusarium Lk. і Colletotrichum gloesporioides Penz. Їх співвідношення та склад неоднакові в різних ґрунтово-кліматичних зонах. Сорти люпину, стійкі до фузаріозу та антракнозу в одних регіонах, часто виявляються сприйнятливими в інших. Оцінка селекційних зразків люпину на стійкість дофузаріоз проводиться на інфекційних фонах.
Методика створення інфекційних фонів до ґрунтових патогенів (фузаріози) заснована на накопиченні інфекції у ґрунті (Гешеле, 1964; Корнійчук, 1985). Для випробування люпину прийнятні найпоширеніші методи - дво-трирічна монокультура сильносприйнятливого сорту, внесення у ґрунт подрібнених частин уражених рослин, а також метод штучного внесення у ґрунт розмножених на живильному середовищі патогенів (Корнійчук, 1985). Як поживний субстрат можуть служити зерна хлібних злаків, особливо вівса та проса. Можна використовувати і зерна інших культур та їх суміші. Рідше застосовують внесення у ґрунт чистої культури патогену, приготованої на рідкому живильному середовищі (Овчиннікова, Андрюхіна, 1984).
Залежно від конкретних завдань можливі різні підходи до вивчення стійкості люпину до фузаріозу. Наприклад, світова колекція люпинів ВІР, куди входять понад 50 видів як середземноморського, і американського походження, в 1971-1989 гг. отримала первинну оцінку щодо стійкості на комплексному інфекційному фоні Новозибківської філії ВІУА (Кисельов та ін., 1988). Цей фон створювали, вносячи в ґрунт подрібнену масу хворих на фузаріоз рослин, зібраних у різних зонах люпиносія, а також чисту культуру різних видів і штамів збудника. На такому тлі можливе початкове випробування всіх видів люпину.
Однак для більш поглибленого вивчення фузаріозостійкості зразків кожного виду люпину доцільно створення спеціального фону зі специфічним для цього виду формами збудника. Так, в Українському НДІ землеробства розроблено методику створення інфекційного фону для оцінки люпину жовтого до фузаріозного в'янення на основі виділених в умовах України високовірулентних штамів (82, 66, 89, 90,213) Fusarium oxysporum Schlecht. (Корнійчук, 1985). У НУО "Підмосков'я" та НУО зернобобових та круп'яних культур з метою створення такого фону для люпину вузьколистого та білого виділяють ізоляти з хворих на фузаріоз рослин, визначають їх видовий склад та патогенність. Для закладки фону використовують найбільш вірулентні з них (Дебілий та ін, 1983; Ларіонова, Овчиннікова, 1987).