Виділення - білок - Велика Енциклопедія Нафти та Газа
Виділення – білок
Виділення білків складається з низки етапів. [1]
Виділення білків із водних розчинів може бути здійснено підвищенням концентрації солей; цей процес називається висолення. [3]
Виділення білків з клітин рослин дуже складно і зазвичай полягає перш за все в екстрагуванні їх матеріалу, що вивчається відповідними розчинниками. Як побачимо далі, окремі групи білків розчиняються в різних розчинниках, і для їх екстракції з рослин як розчинники використовують воду, розчини солей, спирту, кислот і лугів. Екстраговані білки можуть бути обложені з розчинів різними реактивами. Як осадники білків використовуються органічні розчинники - спирт, ацетон; концентровані розчини мінеральних солей, найчастіше розчини сульфату амонію; кислоти - трихлороцтова, фос-форновольфрамова, пікринова; дубильні речовини, наприклад, танін; солі важких металів – ртуті, міді, свинцю. Після осадження білки відмивають та висушують. [4]
Виділення білка з розчину після додавання різних солей зветься висолювання. Процес висолення білка в багатьох випадках не пов'язаний із втратою білком здатності знову розчинятися у воді після видалення водовіднімного засобу. Так, обложений сірчанокислим амонієм або сірчанокислим натрієм білок сироватки крові після видалення основної маси солі (наприклад, діалізом) легко знову розчиняється у воді з утворенням розчину, у всіх відношеннях тотожного вихідному. [6]
Виділення білків із водних розчинів може бути здійснено підвищенням концентрації солей; цей процес називається висолення. [8]
Виділення білків проводиться з різними цілями. [9]
Виділення білка при низьких температурах має ще й ту перевагу, що в цих умовах затримується зростання мікроорганізмів, а також уповільнюється дія ферментів, що гідролізують, які можуть бути присутніми в реакційній суміші. [10]
Для виділення білків та пептидів, що містять вільні SH-групи, доцільно використовувати високу спорідненість меркапто-з'єднань до іонів важких металів, головним чином ртуті. У табл. 11.1 наведено ряд прикладів виділення як білків, так і пептидів, заснованого на утворенні згаданого комплексу. [11]
Після виділення білків пробу крові нагрівають із лужним розчином сульфату двовалентної міді. Оксид міді, що виділився, після розчинення її в азотній кислоті визначають Комплексометричним титруванням по мурек-сиду. [12]
Для виділення білка з рослинних або тваринних тканин сирий матеріал тонко подрібнюють і екстрагують відповідним розчинником, зазвичай на холоді. Виділення білків у тому стані, в якому вони знаходяться в природних продуктах, дуже складно. Зазвичай будова білка при його витягу більшою чи меншою мірою порушується. Очищення білків часто буває взагалі неможливе, а в кращому випадку вимагає дуже досконалої техніки. [13]
Процес виділення білків із водяних розчинів при додаванні до них концентрованих розчинів електролітів називається висолюванням. Висолення на протилежність коагуляції низькомолекулярних речовин не підпорядковується правилу Шульце - Гарді. При висоленні високомолекулярного з'єднання з водних розчинів основне значення має не валентність іонів, що висолюють, а ступінь їх взаємодії з полярними молекулами води: чим енергійніше віднімають іони електроліту молекули води від макромолекул високомолекулярного з'єднання, тим більше їх висолюючу дію. [14]
При виділенні білків із насіння останні тонко розмелюють і у разі потреби знежирюють ацетоном, після чого висушують у вакуум-ексикаторі. [15]