Визначення ефективності ІФА тест-системи для визначення рівня антитіл до вірусу ГВК-1
Кузнєцов Д.П., Перепечаєв К.А., Уласов В.І., Кузнєцова С.В. Всеукраїнський науково-дослідний та технологічний інститут біологічної промисловості, м.Щелково, Московської області
Джерело : матеріали XVI Московського міжнародного конгресу з хвороб дрібних свійських тварин
Метод визначення антигенів та антитіл за допомогою імуноферментного аналізу (ІФА) при оптимальному співвідношенні собівартість-чутливість є дієвим інструментом у ветеринарній лабораторній практиці. ІФА дозволяє визначати рівень антитіл як у сироватці крові, так і у внутрішньоочній, спинномозковій рідинах і навіть у молоці, що необхідно при проведенні будь-яких наукових та науково-практичних досліджень. За допомогою ІФА можна проводити контроль ефективності вакцин та імунних сироваток, визначати напруженість імунітету, що дозволяє оцінити ступінь захисту тварин від зараження та захворювання. Метод також надзвичайно зручний для виявлення вірусного антигену в змивах та зіскрібках зі слизової оболонки очей, ротової та носової порожнин.
Для підтвердження ефективності тест-системи вивчали кілька важливих критеріїв, таких як відтворюваність, чутливість та специфічність.
У тесті на відтворюваність використовувалися 5 планшетів для ІФА, сенсибілізованих вірусом ГВК-1. Високоактивна, середньо- та низькоактивні позитивні сироватки перевірялися на 30 з 96 лунок кожного з 5 планшетів. Дані були зібрані по 15 планшетам і проаналізовані. Коефіцієнт варіації та показник ступеня адсорбції зразка до середнього значення ступеня адсорбції позитивної та негативної контрольних сироваток були визначені для оцінки внутрішньо- та міжпланшетної відтворюваності. Серед лунок (Таблиця 1) величина варіації становила від 3 до 6%.Для визначення специфічних антитіл на планшетах варіація становила близько 4%. Варіація між окремими планшетами була менше 4% для будь-якої сироватки і трохи відрізнялася між окремими лунками.