Вплив німесуліду на рівні металопротеїназ та деградацію матриксу при остеоартриті.
РЕЗЮМЕ. При остеоартриті порушується рівновага між процесами деградації та відновлення хряща. Метою даного пошукового клінічного дослідження було вивчення ефектів нестероїдного протизапального препарату, німесуліду, на синтез матриксних металопротеїназ (ММР), які є важливими ферментами у процесі протеолізу хряща. Олігомерний матриксний протеїн хряща (СОМР), компонент позаклітинного матриксу, використовувався як індикатор підвищеної ерозії суглоба. Німесулід у дозі 100 мг двічі на добу призначався для лікування рентгенологічно доведеного хворобливого остеоартриту (ОА) колінного або кульшового суглоба протягом 3 тижнів. ММР-1, -3 і -8 та СОМР вимірювали методами імунного аналізу, а інтенсивність болю та захворювання оцінювали за шкалою WOMAC. Під час терапії німесулідом крім клінічного поліпшення та зменшення інтенсивності болю знизилися рівні ММР-3, ММР-8 та СОМР у сироватці крові, що вказує на сприятливий вплив препарату на катаболізм хряща.
КЛЮЧОВІ СЛОВА: деградація хряща, СОМР, ММР, німесулід, остеоартрит, WOMAC.
ВСТУП
Остеоартрит (ОА) характеризується деградацією суглобового хряща, і є основною причиною інвалідизації людей похилого віку, які становлять приблизно 15% від усього населення світу. 1 Застосування маркерів обміну кісткової тканини при захворюваннях кісток значно підвищило можливість субкласифікувати пацієнтів, виявляти хворих з високим ризиком розвитку таких захворювань та сприяти дослідженню лікарської терапії. Ці біомаркери можна ідентифікувати серед деяких продуктів деградації хряща, таких як позаклітиннийматрикс або колагенові компоненти. Деградацію хряща при ОА можна оцінити за ферментами, залученими до цього процесу, і речовин, що спочатку присутні в хрящі, і що надходять у кров і відбивають процес деградації. Сироваткові рівні олігомерного матриксного протеїну хряща (СОМР), компонента позаклітинного матриксу, суттєво вищі у пацієнтів з ОА, ніж у контрольній групі 2 . Також рівні СОМР добре корелюють з наявністю синовіту при ОА 3 і можуть бути індикатором прогресування ОА 4 . Тому ми вимірювали сироваткові рівні СОМР, і далі аналізували потенціал СОМР як діагностичний або прогностичний маркер для встановлення початку ОА або його прогресування.
При ОА деградація суглобового хряща погіршує функцію суглоба, як наслідок, якість життя. Протеолітична деградація позаклітинного матриксу відіграє у ерозії хряща. З протеїназ, що розщеплюють хрящ, матриксні металопротеїнази (ММР) становлять особливий інтерес. Їх активність може регулюватися шляхом прямої активації, модулювання вироблення проензимів або зміни рівнів ендогенних інгібіторів 5,6 . Фактично, у пацієнтів із ОА сироваткові рівні ММР анормально високі.
Ефекти нестероїдних протизапальних препаратів (НПЗЗ) на метаболізм хрящової тканини є спірними. Деякі НПЗЗ можуть прискорювати руйнування хряща, тоді як інші можуть чинити хондропротективну дію 9 . Німесулід інгібує синтез матриксу 10, але in vitro німесулід знижує синтез ММР 11,12. Тому ми вважаємо, що корисно вивчити in vivo ефекти німесуліду на хрящ, які оцінювали за сироватковими рівнями СОМР і трьох металопротеїназ у ході пошукового клінічного дослідження за участю пацієнтів з ОА.
Основним механізмомПротизапальну та аналгетичну дію німесуліду є інгібування синтезу простагландинів 13 . Однак, крім переважного придушення ЦОГ-2, особливий інтерес представляє пригнічення ММР 11,12,14 . Очевидно, цей НПЗЗ може пригнічувати катаболізм хрящової тканини з допомогою механізмів, які пов'язані з простагландинами.
МЕТОДИ
Досліджувану групу включали 20 дорослих пацієнтів у віці 41-72 років (середнє значення віку: 55.3 ± 8.1) з рентгенологічно доведеним (Kellgren та Lawrence ≥ 2 стадії) ОА колінного та/або тазостегнового суглоба та гострим болем (ВАШ > ). Після надання поінформованої згоди цих пацієнтів було включено у відкрите пошукове дослідження. До контрольної групи для порівняння даних біохімічного аналізу крові було включено 22 здорові добровольці без болю. Вибрана досліджувана популяція чітко відображала загальну популяцію хворих з гонартритом та коксартритом у рівному співвідношенні ОА колінного та кульшового суглобів. Середня тривалість ОА склала 7.2 ± 5.6 років, і ОА Kellgren та Lawrence ступеня 2 у 42.1% хворих, ступеня 3 у 52.6% пацієнтів, та ступеня 4 у 5.3% хворих.
Критеріями невключення в дослідження були: наявність алергії на НПЗЗ, наявність в анамнезі виразки шлунка та/або дванадцятипалої кишки, вагітність, лактація, клінічно значущі захворювання серцево-судинної системи, нирок, печінки, дихання, шлунково-кишкового тракту, застосування протизапальної протягом 3 днів на початок дослідження.
Досліджувана група (n=20) пацієнтів отримувала німесулід у дозі 100 мг (таблетки Аулін, СіЕсСі-Фармацевтікелз Хенделз ГмбХ, Австрія) вранці та ввечері протягом 3 тижнів дослідження. Контрольна група не отримувала жодного лікування, таслужила лише референсом для даних біохімічного аналізу крові.
Симптоми та фізичну недієздатність оцінювали за індексом WOMAC (індекс остеоартриту Університетів МакМайстра та Західного Онтаріо), перекладеному німецькою мовою 15 . Глобальний показник WOMAC визначали шляхом підсумовування сукупних (підсумкових) показників болю, скутості та фізичної активності. Біль при русі та у спокої оцінювали за горизонтальною, візуальною аналоговою шкалою (ВАШ; показник 0-10 см). Вимірювання проводили на початку дослідження (до прийому німесуліду на день 0) та наприкінці тижнів 1, 2 та 3. Під час кожного візиту реєстрували побічні ефекти.
Лабораторні аналізи
Кров для лабораторних аналізів забирали до першого прийому німесуліду (на початку дослідження) та наприкінці 3-х тижневої терапії. Визначали стандартні лабораторні параметри (еритроцити, лейкоцити, тромбоцити, С-реактивний білок, азот сечовини крові, креатинін, урати, тригліцериди, холестерин, білірубін, АСТ, АЛТ, ГГТ та лужна фосфатаза). У сироватці крові вимірювали рівень олігомерного матриксного протеїну хряща (Wielisa-kit, Wieslab, Швеція) та металопротеїназ-1, -3 та -8 (Biotrak ELISA System, Амершам біотех, Великобританія).
Статистичний аналіз
Використовувалися параметричні та непараметричні методи (SPSS10.0.7: критерій t Стьюдента, Кореляція Пірсона [параметричний], тау-б критерій Кендала [непараметричний], У критерій Вілкоксона-Манна-Уітні, критерій Фредманна та регресійний аналіз.
РЕЗУЛЬТАТИ
Дані клінічного дослідження Терапія німесулідом покращувала всі вимірювані клінічні параметри болю та Індекс Артриту. Зменшення болю при активних рухах, виміряне за ВАШ, було значним (Малюнок 1; Таблиця 1).Також відзначено значне зниження значень індивідуальних компонентів Індексу Остеоартрозу WOMAC (Таблиця 1) та глобального показника, отриманого при оцінці відповідей на запитання (Малюнок 2). Загальна оцінка ефективності терапії, проведена лікарями та пацієнтами за 5-бальною шкалою, показала хороший профіль німесуліду (Таблиця 2). Лікарі визнали, що 80% пацієнтів отримали сприятливий вплив від німесуліду, а 65% хворих відзначили помітне покращення ОА (Таблиця 2).
Малюнок 1: Період збереження болю при ОА на фоні застосування німесуліду 100 мг двічі на добу (Візуальна Аналогова Шкала, ВАШ)
Малюнок 2: Зміни глобального індексу WOMAC (24 пункти) під час терапії німесуліду (середнє значення ± стандартне відхилення).
Таблиця 1: Оцінка симптомів та фізичної недієздатності за показником WOMAC, середні значення ± стандартне відхилення. Статистична значимість оцінювалася методом дисперсійного аналізу (ANOVA)
| Терапія німесулід | Підшкала WOMAC | ||
| Біль (5 пунктів) | Тугорухливість суглоба (2 пункти) | Фізична активність (17 пунктів) | |
| Початок дослідження | 25.2±7.3 | 9.4±4.4 | 88.5 ±26.9 |
| Через 1 тиждень | 15.9±8.1 | 5.5±3.8 | 56.8 ± 25.3 |
| Через 2 тижні | 10.5±6.2 | 4.8±4.3 | 40.3±27.1 |
| Через 3 тижня | 8.5±8.5 | 3.9±4.4 | 30.9±29.6 |
| Значення Р (ANOVA) | 0.001 | 0.016 | 0.029 |
Таблиця 2: Глобальна ефективність німесуліду за оцінкою лікарів та пацієнтів
| Параметр | Одиниці виміру | Початок дослідження | День 21 | Значимість (Р) |
| СОМР | мкг/мл | 1.61±0.40 | 1.45±0.40 | 16,17. Наші результати показують, що німесулід може впливати на первинні прояви метаболізму позаклітинного матриксу (шляхом зниження ММР-8) та вторинні прояви, що призводять до деградації N-телопептиду колагену типу II за рахунок зменшення рівня ММР-3. Наші результати дослідження in vivo узгоджуються з попередніми даними досліджень in vitro, що свідчать про зниження синтезу стромелізину 12 . Німесулід також пригнічував активність колагеназ in vitro 11 та активність колагензу в синовіальній рідині пацієнтів з ОА. |
Необхідно відзначити, що ферментна атака металопротеїназ та процес деградації хряща починаються до появи клінічних симптомів, таких як гострий біль. Тому, складно встановити статистичну кореляцію між клінічними симптомами та рівнями ферментів, що деградують хрящ, та/або структурних матриксних макромолекул.
Зниження рівнів металопротеїназ супроводжувалося зменшенням рівня СОМР у сироватці крові, що говорить про те, що процес ферментного інгібування супроводжується зменшенням розпаду хряща. Також з цієї причини виявлено слабку кореляцію між рівнями ММР та клінічними симптомами.
Збільшення рівня СОМР у сироватці крові може бути індикатором рентгенографічно підтвердженого прогресування ОА 4,18. Сироваткові рівні СОМР значно підвищувалися зі збільшенням Kellgren та Lawrence ступеня тяжкості ОА та кількості залучених колінних та кульшових суглобів 2 . Так як на початковій стадії ОА пацієнти та лікарі часто не помічають розвитку захворювання, сироватковий рівень СОМРможе бути цінним показником для раннього встановлення ОА 19 . Підвищені рівні СОМР добре корелюють з присутністю синовіту у пацієнтів з ОА 3 і запальні процеси можуть також підвищувати рівні ММР 20 , а також СОМР, за рахунок підвищеної деградації матриксу. Зниження сироваткових рівнів СОМР у пацієнтів, які отримували німесулід, у нашому дослідженні, ймовірно, відображає зміни в обміні матриксу. Оскільки СОМР є маркером прогресування хвороби на ранній стадії остеоартриту колінного суглоба 4 , наші результати підтримують важливість його вимірювання при оцінці руйнування суглоба при ОА, та оцінці ефективності НПЗЗ та їх впливу на хрящ.
Оцінка біохімічних маркерів дозволила ідентифікувати різні аспекти тканинного обміну в кістковій, хрящовій та синовіальній тканинах 21 . У цьому контексті ОА колінного суглоба супроводжується:
Таким чином, німесулід знижує підвищений обмін хрящової тканини при ОА. Це цікавить при оцінці впливу препарату на підвищений обмін синовіальної тканини при ОА.
У низці досліджень була встановлена клінічна ефективність німесуліду в лікуванні різних болючих, запальних захворювань, у тому числі остеоартриту 14, 22-25. Ми також виявили помітне та прогресуюче зменшення болю при прийомі німесуліду, та значне покращеннястану, що вимірюється за шкалою WOMAC.
Профіль безпеки німесуліду при тривалому прийомі пацієнтами з ОА - хороший 26 і ми також спостерігали хорошу переносимість цього препарату. Два небажані явища, ймовірно, але не безумовно, пов'язані з терапією німесулідом, були не серйозними, і практично не було впливу препарату на різні параметри клінічного та біохімічного аналізу крові.
На закінчення, крім переважного інгібування ЦОГ-2, німесулід надає сприятливі ефекти, знижуючи сироваткові рівні двох металопротеїназ, які здатні безпосередньо 27,28 розщеплювати колаген типу II (за рахунок ММР-1) та наступні фрагменти N-телопептиду (за рахунок ММР-3). .