З13_Основи генної інжененрії_Гончаренко5 - Стор 2
1. Айала Ф., Кайгер Дж. Сучасна генетика: Пров. з англ.: У 3 т. - М.: Світ, 1988, іл.
2. Кочергін Б.М., Кочергіна Н.А. Завдання з молекулярної біології та генетики. Мн.: Народна освіта, 1982. - 80 с.
3. Соколовська Б.Х. Сто завдань з генетики та молекулярної біології. - Новосибірськ: Наука, 1971.
4. Жімульов І.Ф. Загальна та молекулярна генетика: Навч. допомога. - Новосибірськ: Новосиб.Сіб. унів.
5. Картель Н.А. Біоінженерія: методи та можливості. Мн.: Урожай, 1989. - 143 с., іл.
6. Методи молекулярної генетики та генної інженерії / Мазін А.В. та ін - Новосибірськ: Наука. 1990. - 248 с.
7. Гончаренко Г.Г. Основи генетичної інженерії. Гомель: ГДУ, 2003. - 118с.
8. Вотсон Дж., Туз Дж., Курц Д. Рекомбінантні ДНК. Короткий курс: Пер. з англ. - М.: Світ, 1986. - 288 с., іл.
9. Льюїн Б. Гени: - Пер. з англ. - М.: Світ, 1987. - 544 с., Іл.
10. Modern genetic analysis. Griffiths та ін. - Freeman and company. Нью-Йорк. 1999. - 675 p.
11. Principles of genetics. Snustad P., Simmons M. / Second edition - John Wiley & Sons. Нью-Йорк. 1999. - 876 p.
12. An introduction to genetic analysis. Griffiths та ін. - Freeman and company. Нью-Йорк. 2000. - 730 p.
Ферменти рестрикції та отримання гібридної ДНК
МЕТА : Ознайомитися з ферментами рестрикції та способами отримання гібридної ДНК від різних організмів, освоїти методи гібридизації ДНК та на прикладі вирішення типових завдань закріпити засвоєний матеріал
2.1. Теоретична частина
Для того, щоб штучним шляхом наділити організм новими спадковими властивостями, потрібно ввести в нього хоча б один чужорідний ген. Причому необхідно приготувати (сконструювати) фрагментчужорідної ДНК містить цей корисний ген.
Здійснюється ця процедура за допомогою двох операцій "розрізання" та "зшивання". Роль кравецьких інструментів грають ферменти рестриктази та лігази.
Рестриктази (своєрідні молекулярні ножиці), діючи на дволанцюжкову ДНК, "дізнаються" у ній певну послідовність нуклеотидів. Причому, кожна рестриктаза дізнається лише свою послідовність ДНК, прикріплюється до неї та розрізає її у місці прикріплення. Рестриктазам байдуже, чию ДНК розрізати – людини чи рослини, бактерії чи вірусу, аби у ній були ділянки, що розпізнаються. Це означає, що дві абсолютно несхожі між собою послідовності ДНК (припустимо з клітин слона і жаби) при обробці однією і тією ж рестриктазою легко можна пошити (зліпити) один з одним.
Зазвичай рестриктази розпізнають у молекулах ДНК дуже короткі, але суворо специфічні кожному ферменту ділянки довжиною 4 – 6 пар нуклеотидів і розрізають обидва ланцюга ДНК посередині цих ділянок чи з деяким усуненням. У першому випадку утворюються уривки з рівними (тупими) кінцями (рис. 2.1.), а в другому - сторони ланцюжків ДНК, що розрізаються, заходять одна за іншу. Такі одноланцюгові кінці називаються "липкими", оскільки вони можуть ніби злипатися між собою через комплементарність.
Яскравим прикладом рестриктази другого типу є EcoRI, яка дізнається фрагмент ДНК із шести нуклеотидів ГААТТЦ, і ріже цю послідовність ДНК асиметрично, «ступінкою» між нуклеотидами Г та А (рис. 2.2.). В результаті місце розрізу в одному ланцюгу зміщене по відношенню до іншого на 4 пари основ. При такому розрізі утворюється два виступаючі кінці. Ці кінці притягуються один до одного, бажаючи відновити свої старі зв'язки і скріпитися, як і належить, водневими містками.