Автоматизація цитологічних досліджень

Автоматизація цитологічних дослідженьможе бути поділена на 2 етапи 1) - первинний відбір препаратів з наявністю патологічних змін у клітинах та виключенням «порожніх» н нормальних препаратів, 2) - діагностика, що наближається за своїм рівнем до гістологічної.

Перший етапмає пряме відношення до проведення масових профілактичних оглядів. Так як при цьому до 97% препаратів, що надходять на дослідження, виявляються нормальними, залучення великої кількості кваліфікованих фахівців-цитологів недоцільно. На 1-му етапі фактично проводиться сортування одержаних при профілактичних оглядах цитологічних препаратів на 2 групи «нормальні» та «патологічні» (з підозрою на наявність злоякісного зростання).

Проблема автоматичного сортування цитологічних препаратів на нормальні та препарати з підозрою на злоякісне зростання не вирішена і перебуває в стадії розробки.

Основні труднощі для автоматичного аналізу цитологічних препаратів створюють наявність скупчень клітин і нашарування їх один на одного, нерівномірне їх розташування на фарбування, наявність сторонніх включень (лейкоцити, бактерії, слизь, кристали фарби і т. д.), складчастість цитоплазми, загини країв клітин тощо. буд. Проблеми тут пов'язані з відсутністю загальноприйнятих параметрів, розроблених кожної локалізації, і частково — з необхідністю мати ЕОМ з великою пам'яттю.

досліджень

У зв'язку з цим велике значення мають роботи цитологів-морфологів з відбору ознак, що характеризують злоякісні та доброякісні пухлини різних локалізацій. Тут також виникають великі труднощі, тому що добре відомо, що злоякісні клітини не мають якихось специфічних особливостей, а отже,немає жодних абсолютних критеріїв злоякісності.

Здійснюються небезуспішні спробизастосування в клінічній цитології для диференціальної діагностики морфометричних методів. Аналіз гістограм, що відображає розподіл клітин залежно від їх площі, показав, що вони мають свої особливості при різних захворюваннях ширина основи гістограми, висота піків, розташування останніх у певних областях гістограми, відсоткове співвідношення клітин, що розрізняються по площі.

Проведені каріометричні дослідження показали, що цей метод цінний не тільки в диференціальній діагностиці доброякісних і злоякісних новоутворень, але і певною мірою в диференціальній діагностиці різних форм останніх.

Особливе місце середдослідженьподібного роду займає кількісне визначення нуклеїнових кислот та головним чином дезоксирибонуклеїнової кислоти. У цьому напрямку до теперішнього часу вже накопичений достатній матеріал, з якого випливає, що пухлинним клітинам на відміну від нормальних соматичних клітин властива широка варіабельність вмісту ДНК і збільшення середньої кількості ДНК на ядро ​​є характерною ознакою злоякісних пухлин. Ці показники, отже, можна використовувати у диференціальної діагностиці доброякісних і злоякісних поразок.

Дослідження вмісту ДНК у клітинахпроводяться різними методами абсорбційної цитоспектрофотометрії, методом цитофлюориметрії, за допомогою радіоавтографії з використанням Н-тимідину. Однак слід зауважити, що перелічені методи досить трудомісткі, у зв'язку з чим неможливо дослідження великої кількості клітинних елементів у кожному конкретному випадку. Проводитьсятакож вивчення вмісту ДНК у ядрах клітин різних новоутворень методом імпульсної цито-фотометрин.

Бурхливий розвиток хіміотерапіїпухлин як одного з найважливіших напрямів сучасної онкології, синтез та виділення з природних джерел величезної кількості цитостатичних засобів вимагають точних, об'єктивних і водночас швидких методів дослідження, які дозволяли б чітко оцінити ступінь активності та механізм дії цих речовин із метою відбору для практичного застосування. Цитостатичні препарати, що відносяться до різних класів сполук, ушкоджують пухлинні клітини на певних стадіях їх життєвого циклу, спричиняючи глибокі порушення обміну ДНК.

Застосовувані до останнього часу радіоавтографічні методи вивчення синтезу ДНК трудомісткі і мають обмежену інформативність. Значно великі можливості вивчення активності до механізму дії протипухлинних препаратів відкриваються під час використання методу імпульсної цитофотометрии. Він дає можливість швидко н статистично точно отримати кількісну характеристику вмісту ДНК у великій кількості клітинних елементів на всіх стадіях життєвого циклу та виявити анеуплоїдні клони клітин. Висока чутливість методу н відносна простота дозволяють у короткий термін провести аналіз великої кількості спостережень.

Це робить його незамінним при експериментальному передклінічному вивченні нових потенційно активних протипухлинних речовин.