HCV, РНК реал-тайм ПЛР

Дослідження для виявлення збудника гепатиту C (HCV), у ході якого за допомогою методу полімеразної ланцюгової реакції в реальному часі (РТ-ПЛР) визначається наявність генетичного матеріалу (РНК) вірусу в крові.

Вірус гепатиту С (ВГС), якісне визначення РНК.

Синонімианглійські

Hepatitis З Virus, RNA, Blood, HCV RNA, Real-Time PCR, Qualitative.

Полімеразна ланцюгова реакція зі зворотною транскрипцією в режимі реального часу.

Виявляє генотипи HCV: 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6.

Специфіка визначення: 100%.

Чутливість визначення: 50 МО/мл.

Лінійний діапазон концентрацій РНК вірусу гепатиту С, що визначаються тест-системою: 150-1*10^8 МО/мл.

Який биоматериал можна використовуватиме дослідження?

Як правильно підготуватись до дослідження?

  • Не курити протягом 30 хвилин до дослідження.

Загальна інформація про дослідження

Вірус гепатиту С (HCV) – РНК-вірус із сімейства Flaviviridae, який вражає печінку. Він здатний розмножуватися в клітинах крові (нейтрофілах, моноцитах і макрофагах, В-лімфоцитах) і викликати кріоглобулінемію, хворобу Шегрена та В-клітинні лімфопроліферативні захворювання. HCV завдяки високій мутаційній активності може уникати впливу захисних механізмів імунної системи. Існує 6 генотипів та безліч субтипів вірусу, які мають різні значення для прогнозу розвитку захворювання та ефективності противірусної терапії.

Основний шлях передачі інфекції через кров (препарати для переливання елементів крові та плазми, донорські органи, нестерильні шприци, голки, інструменти для татуювання, пірсингу). Ймовірно, зараження при статевому контактіта дитини від матері під час пологів, але це трапляється нечасто.

Гострий вірусний гепатит, як правило, характеризується безсимптомним перебігом і залишається невиявленим здебільшого. Тільки у 15% інфікованих захворювання протікає гостро – із нудотою, ломотою в тілі, відсутністю апетиту та втратою ваги (рідко супроводжується жовтяницею). У 60-85% інфікованих розвивається хронічна інфекція, що у 15 разів перевищує частоту хронізації при гепатиті В. Хронічний вірусний гепатит С протікає з підвищенням печінкових ферментів та мізерним проявом симптомів. У 20-30% хворих захворювання призводить до цирозу печінки, збільшуючи ризик розвитку печінкової недостатності та гепатоцелюлярної карциноми.

Виявлення РНК HCV свідчить про розмноження вірусу в організмі та допомагає діагностувати захворювання. Генетичний матеріал вірусу можна виявити методом ПЛР через 10-12 днів після інфікування - у цей період специфічні антитіла, які утворюються через кілька місяців після зараження, відсутні і біохімічні показники функції печінки знаходяться в межах референсних значень. РНК вірусу гепатиту С з високою специфічністю та чутливістю визначають якісно чи кількісно. Завдяки якісному методу підтверджується факт інфікування чи загибелі вірусу. Це особливо важливо в ранній діагностиці вірусного гепатиту у людей, які зазнали ризику зараження, а також при контролі за противірусною терапією. При лікуванні альфа-інтерфероном відсутність РНК вірусу через 24 тижні після завершення терапії є критерієм її ефективності.

Навіщо використовується дослідження?

  • Для раннього виявлення вірусного гепатиту.
  • Для диференціальної діагностики гепатитів.
  • Для контролю за ефективністюпротивірусного лікування.
  • Для моніторингу перебігу вірусного гепатиту С.
  • Для перевірки донорської крові.

Коли призначається дослідження?

  • За сумнівних результатів серологічного дослідження.
  • Під час обстеження людей із групи ризику із зараження вірусним гепатитом С.
  • Якщо дитина народилася від інфікованої матері.
  • При симптомах гепатиту та підвищених біохімічних показниках функції печінки.
  • До лікування та в кінці терапії, потім через 6 та 24 місяці спостереження.

Що означає результати?

Референсні значення: не виявлено.

Причини позитивного результату

Причини негативного результату

  • Відсутність вірусу гепатиту С у крові досліджуваного.

Що може впливати на результат?

Причини помилково-негативного результату:

  • мінімальне вірусне навантаження крові (50 МО/мл);
  • наявність у зразку інгібіторів – хімічних та білкових субстанцій, що впливають на різні компоненти ПЛР;
  • присутність у крові гепарину;
  • високий рівень кріоглобулінів у крові.

  • Сама собою наявність РНК вірусу гепатиту С за відсутності змін інших лабораторних показників не дозволяє діагностувати інфекцію зі стовідсотковою впевненістю. При цьому необхідно повторне виявлення РНК вірусу методом ПЛР та комплексна оцінка всіх досліджень. При хронічному гепатиті С концентрація вірусного РНК змінюється хвилеподібно – позитивні та негативні результати можуть змінюватись, що вимагає проведення біопсії печінки для уточнення діагнозу та тактики лікування.
  • Прямої залежності між активністю розмноження вірусу та зміною біохімічних показників функції печінки немає.

Хтопризначає дослідження?

Література

  • Возіанова Ж.І. Інфекційні та паразитарні хвороби: У 3х т. - К.: Здоров'я, 2000 - Т.1.: 600-690.
  • Кішкун А.А. Імунологічні та серологічні дослідження у клінічній практиці. - М.: ТОВ МІА, 2006 - 471-476 с.
  • Harrison's Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, та інші. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences в hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, і cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus repplication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. 2011 Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.