Хіміко-токсикологічний аналіз похідних фенілалкіламіну методом хроматомас-спектрометрії
Хіміко-токсикологічний аналіз похідних фенілалкіламіну методом хроматомас-спектрометрії / Крупіна Н.А., Краснова Р.Р., Ніколаєва Е.Г., Солошенко О.П. //Мат. VI Всерос. з'їзду судових медиків - М.-Тюмень, 2005.
бібліографічний опис:Хіміко-токсикологічний аналіз похідних фенілалкіламіну методом хроматомас-спектрометрії / Крупіна Н.А., Краснова Р.Р., Ніколаєва Е.Г., Солошенко А.П. //Мат. VI Всерос. з'їзду судових медиків - М.-Тюмень, 2005.
код для вставки на форум:
Серед лікарських стимуляторів ЦНС найбільш поширені похідні фенілалкіламіну, основними представниками яких є амфетамін, метамфетамін (первітин, гвинт), метилендіоксиамфетамін(MDA, ева), метилендіоксиметамфетамін (MDMA, екстазі, адам).
Число випадків зловживання похідними фенілалкіламіну неухильно зростає, що робить необхідним вивчення методів виявлення їх у біологічному матеріалі. Останнім часом все частіше на дослідження надходить сеча живих осіб з метою виявлення похідних амфетаміну.
У цій роботі описано дослідження сечі живих осіб на наявність основних представників із групи фенілалкіламінів при напрямку об'єктів з наркологічних диспансерів з метою їх дослідження на: психостимулятори; метамфетамін; наркотики; наркотичні та сильнодіючі речовини. Вік обстежуваних коливався від 24 до 31 року. Обставини справи, у яких об'єкти прямували на дослідження, були наступними: затримані міліцією; затримані із наркотиками; управління транспортом у стані наркотичного сп'яніння; встановлення діагнозу.
Як попередній метод аналізу на похідні фенілалкиламіну ми використовували флюоресцентно-поляризаційний імуноаналіз.Результат приймали за позитивний, якщо концентрація основного представника з цієї групи – амфетаміну в сечі перевищувала 1000 нг/мл (величина порогової концентрації для попереднього методу аналізу).
Метод виявлення амфетамінів у сечі заснований на рідинно-рідинній екстракції з подальшим проведенням дериватизації з використанням дериватизирующих агентів: трифтороцтового ангідриду (ТФУА) або пентафторпропіонового ангідриду (ПФПА). Похідні фенілалкіламінів з ТФУА або ПФПА ідентифікують методом хроматомас-спектрометрії.
Пробопідготовка.До 2 мл сечі додають 2 мл розчину гідроксиду натрію (1М), 5 мл дистильованої води, 20 мл дихлорметану і екстрагують на струшувачі протягом 30 хв. Суміш центрифугують протягом 5 хв. і верхній шар відкидають. Органічний шар профільтровують через безводний сульфат натрію, до екстракту додають 50 мкл метанольного розчину соляної кислоти, випарюють насухо при кімнатній температурі та досліджують методом хроматомас-спектрометрії.
Дослідження проводили на хроматомас-спектрометрі з газовим хроматографом Agilent 6890 та мас-селективним детектором Agilent Technologies 5973. Колонка хроматографа кварцова, капілярна (30 м х 0.25 мм) на метилфенілсіліконі. Початкова температура колонки-70 0 С. Час витримки за початкової температури - 1 хвилина. Підйом температури від 70 до 280 про З-20 про З/хв. Швидкість газу носія (гелій) – 1,0 мл/хв. Температури інжектора, джерела та квадруполя -280 0 С, 230 0 С та 150 0 С відповідно. Об'єм проби-1 мкл.
Методика дослідження включає введення в газовий хроматограф стандартних розчинів амфетаміну та метамфетаміну у вигляді їх похідних з ТФА (трифтороцтовий ангідрид), або ПФПА (пентафторпропіоновий ангідрид), наступневведення контрольного зразка без визначених речовин, а потім введення досліджуваної проби.
Сухий залишок досліджуваного зразка кількісно переносять за допомогою 0,5 мл суміші розчинників метанол-хлороформ у співвідношенні 1:1 у флакон місткістю 1мл, випаровують насухо під струмом теплого повітря. У флакон із сухим залишком за допомогою шприца вносять 30 мкл реактиву ТФА (трифтороцтовий ангідрид) або ПФПА (пентафторпропіоновий ангідрид), флакон герметично закривають, ретельно струшують, нагрівають у термостаті 5 хвилин при 50 ° С, доводять до кімнатної. У флакон із сухим залишком вносять 30 мкл етилацетату і 1 мкл отриманого розчину вводять у випарник хроматографа.
Ідентифікацію спостережуваних на хроматограмі піків проводять в режимі сканування індивідуальних іонів по мас-спектрам електронного удару, іонним мас-хроматограмам і бібліотекам мас-спектрів: NIST.02.L і PMW_TOX3.L Мас-спектри дериватизованих похідних фенілалкиламіну представлені в таблиці
Мас-спектри дериватизованих похідних фенілалкіламіну
Назва Інтенсивність mz
Амфетамін 140, 118, 91, 69, 65 231,190, 118, 91, 69, 65
Метамфетамін 204, 160, 118, 91, 69245, 154, 118, 110, 91
Ефедрін 338, 294, 204, 160, 119 338, 244, 154, 110, 69
МДА 179, 136, 77, 51, 44 140, 132, 117, 105, 91, 77
МДМА 339, 204, 152, 135, 119 289, 162, 154, 135, 110
Псевдоефедрин 438, 338, 294, 204 357, 338, 244, 154, 110
З усіх досліджень сечі від живих осіб, проведених нами на наркотичні речовини у 2003 – 2004 рр. 25% склали дослідження на похідні фенілалкіламіну. З них 21% – з позитивним результатом. Кількість позитивних досліджень на похідні амфетаміну в 2004 р. зрослапорівняно з 2003 р. у 2.6 рази. При цьому в 48% випадків як у 2003 р. так і в 2004 р. були виявлені похідні фенілалкіламіну в різних поєднаннях. У 31% випадків у 2003 р. та у 33% випадків у 2004 р. при дослідженні сечі на наркотичні речовини було встановлено спільну присутність похідних фенілалкіламіну з алкалоїдами опійної групи (морфін, кодеїн, 6-моноацетилморфін); у 12% випадків як у 2003 р. так і у 2004 р. з канабіноїдами та з лікарськими речовинами (димедрол, амітриптилін, карбамазепін, трамадол, фенобарбітал); у ряді випадків з кокаїном, метадоном та деякими іншими речовинами. При цьому пробопідготовка проводилася окремо: 2 мл сечі досліджували на похідні фенілалкіламіну, 5 мл досліджували на алкалоїди опійної групи, лікарські речовини, кокаїн, метадон та 10 мл досліджували на наявність у сечі основного метаболіту тетрагідроканнабінолу – 11-нор-9-карбокситетрагідру. Хроматомас - спектрометричне дослідження проводили після дериватизації кожної проби: з трифтороцтовим ангідридом або пентофторпропіоновим ангідридом для дослідження на похідні фенілалкіламіну та з біс-триметилсилілацетамідом або пентофторпропіоновим ангідридом та пентофторпропанолом ноїди.
Результати дослідження сечі живих осіб на наявність похідних фенілалкіламіну в Бюро судово-медичної експертизи Міністерства охорони здоров'я Московської області за 2003-2004 рр. представлені в таблиці 2.