Імунні сироватки та імуноглобуліни, Безкоштовні курсові, реферати та дипломні роботи
10.4.2. Пасивна імунізація
Ідея лікувати інфекційні захворювання заздалегідь приготовленими препаратами антитіл, хоча й витісняється успіхами антибіотикотерапії, все ж таки зберігає свою цінність у певних ситуаціях. , життя врятувати вдається лише введенням саме таких препаратів, які виготовляються зазвичай з плазми крові гіперімунізованих коней, а іноді з сироваток перехворілих тварин. Якщо розташувати препарати антитіл за градієнтом питомої активності, то в кінці цього ряду виявиться нормальний імуноглобулін - препарат, приготований із суміші зразків крові неімунізованих донорів (реконвалесцентів), але антитіла, що містить, до збудників банальних інфекцій у кількості, цілком достатньому для того, ... щоб при запровадженні забезпечувати протягом місяця захист від інфекції.
Застосування специфічних моноклональних антитіл, теоретично привабливе, практично ще немає переваг перед традиційними методами серотерапії. В даний час воно здійснюється головним чином у діагностиці інфекційних захворювань. Але ситуація може змінитися, коли стануть доступнішими (і менш дорогими) моноклональні антитіла, отримані або культурі клітин, або методами білкової інженерії.
Багато речовин, що використовуються як ад'юванти у вакцинах, застосовуються також окремо для стимуляції загальної імунореактивності. Найкращі результати дають при цьому не традиційні імуноад'юванти, а цитокіни, серед яких найбільш широко використовується α-інтерферон (ІФα), в основному через його антивірусну активність.
Виготовлення лікувально-профілактичних імунних сироваток та імуноглобулінів виробляє біологічна промисловість. Як продуценти імуносироваток використовують коней, мулів, ослів, волів і рідше інші види тварин. Гіперімунізацію здійснюють наростаючими дозами антигенів за затвердженими виробничими схемами, що відрізняються тривалістю імунізації, інтервалами між циклами імунізації, дозами Для кожного циклу введення антигену та реакцією продуцента на останній. Після закінчення циклу імунізації, коли у сироватці крові продуцентів знаходиться максимальна кількість специфічних антитіл, у тварин беруть кров. Найчастіше це роблять на 10-14 добу після введення продуценту останньої дози антигену.
З крові виділяють сироватку загальноприйнятими методами та стерилізують її через бактеріальні фільтри або методом тиндалізації. Як консерванти використовують 0,25…0,5%-і розчини фенолу, 0,01…0,03%-і розчини тіомерсалу (мертіоляту) або інші Контроль на стерильність сироватки проводять за загальноприйнятою методикою висівами з препарату на живильні середовища (МПА) , МПБ з глюкозою, МППБ та на агар Сабуро).
Нешкідливість кожної серії сироваткових препаратів перевіряють на лабораторних тварин, яким підшкірно вводять 10 мл сироватки. Вони мають залишатися здоровими, без виражених проявів місцевої та загальної реакції.
Специфічну активність сироваткових препаратів визначають за допомогою реакції біологічної нейтралізації: чим менша доза сироватки, здатна нейтралізувати дію певної дози інфекційного агента або токсину, тим вища її активність.
На кожну перевірену серію сироватки заповнюють паспорт, у якому вказують основні показники: біофабрику, яка виготовила сироватку, назва препарату, номер серії, датувиготовлення, метод консервування, титри, терміни та способи зберігання. На етикетці вказують лікувальні та профілактичні дози залежно від виду та віку тварин. Вводять сироватку зазвичай внутрішньом'язово або внутрішньовенно.
Гіперімунні сироватки застосовують для лікувальних та профілактичних цілей, оскільки вони створюють лише тимчасовий пасивний імунітет. Імунітет настає найближчим часом після введення сироватки (2...3 год) і не перевищує 2...3 тижні.
У ветеринарії застосовують такі сироватки: полівалентна антитоксична сироватка проти паратифу телят, ягнят, овець та птахів; полівалентна антитоксична сироватка проти колібактеріозу телят, поросят, ягнят; гіперімунна сироватка проти пастерельозу великої рогатої худоби, буйволів, овець та свиней; сироватка проти пики свиней; антитоксична сироватка проти анаеробної дизентерії ягнят та інфекційної ентеротоксемії овець; сироватка проти диплококової септицемії телят, ягнят, поросят; антитоксична протиправцева сироватка.
Сироватка реконвалесцентів. Ця сироватка крові перехворілих тварин, що містить специфічні антитіла, застосовується з лікувальною та профілактичною метою.
Сироватку реконвалесцентів рекомендується отримувати та застосовувати тваринам в тому самому господарстві. Кров від тварин-донорів беруть безпосередньо у господарстві чи під час забою їх у м'ясокомбінаті.
Після закінчення циклу імунізації, коли у сироватці крові продуцентів знаходиться максимальна кількість специфічних антитіл, у тварин беруть кров. Найчастіше це роблять на 10-14 добу після введення продуценту останньої дози антигену.
З крові виділяють сироватку загальноприйнятими методами та стерилізують її через бактеріальні фільтри або методом тиндалізації. Як консерванти використовують0,25…0,5%-і розчини фенолу, 0,01…0,03%-і розчини тіомерсалу (мертіоляту) або інші , МППБ та на агар Сабуро).
Нешкідливість кожної серії сироваткових препаратів перевіряють на лабораторних тварин, яким підшкірно вводять 10 мл сироватки. Вони мають залишатися здоровими, без виражених проявів місцевої та загальної реакції.
Специфічну активність сироваткових препаратів визначають за допомогою реакції біологічної нейтралізації: чим менша доза сироватки, здатна нейтралізувати дію певної дози інфекційного агента або токсину, тим вища її активність.
На кожну перевірену серію сироватки заповнюють паспорт, у якому вказують основні показники: біофабрику, яка виготовила сироватку, назву препарату, номер серії, дату виготовлення, метод консервування, титри, терміни та способи зберігання. На етикетці вказують лікувальні та профілактичні дози залежно від виду та віку тварин. Вводять сироватку зазвичай внутрішньом'язово або внутрішньовенно.
Гіперімунні сироватки застосовують для лікувальних та профілактичних цілей, оскільки вони створюють лише тимчасовий пасивний імунітет. Імунітет настає найближчим часом після введення сироватки (2...3 год) і не перевищує 2...3 тижні.
У ветеринарії застосовують такі сироватки: полівалентна антитоксична сироватка проти паратифу телят, ягнят, овець та птахів; полівалентна антитоксична сироватка проти колі-бактеріозу телят, поросят, ягнят; гіперімунна сироватка проти пастерельозу великої рогатої худоби, буйволів, овець та свиней; сироватка проти пики свиней; антитоксична сироватка проти анаеробної дизентерії ягнят та інфекційної ентеротоксеміїовець; сироватка проти диплококової септицемії телят, ягнят, поросят; антитоксична протиправцева сироватка.
Сироватка реконвалесцентів. Ця сироватка крові перехворілих тварин, що містить специфічні антитіла, застосовується з лікувальною та профілактичною метою.
Сироватку реконвалесцентів рекомендується отримувати та застосовувати тваринам в тому самому господарстві. Кров від тварин-донорів беруть безпосередньо у господарстві чи під час забою їх у м'ясокомбінаті.
Антитоксичні сироватки. Сироватки, до складу яких входять антитіла (імуноглобуліни), здатні специфічно зв'язувати та нейтралізувати токсини мікробного, рослинного та тваринного походження. В цілому ж цим терміном називають гіперімунні сироватки, що містять ці антитіла.
Антитоксини застосовують для профілактики та лікування правця, ботулізму, злоякісного набряку. Сироватки вводять на ранніх термінах захворювання. Антитоксинотерапія неефективна, якщо клінічні ознаки хвороби вже чітко виражені, оскільки антитоксини не мають лікувальної дії і можуть лише запобігти розвитку інтоксикації. Як і в усіх імуноглобулінів, їхня дія не перевищує 2...3 тижні.
Правила використання та зберігання біопрепаратів, їх транспортування. Ефективність біологічних препаратів багато в чому залежить від дотримання правил застосування, режиму та умов їх зберігання. У роботі з біопрепаратами необхідно діяти відповідно до рекомендацій та настанов щодо їх застосування. Дотримання умови зберігання біопрепаратів гарантує стабільність імуногенних властивостей, їх високу активність та специфічність. Підвищені вимоги пред'являють до зберігання та транспортування живих атенуйованих вакцин, оскільки розгерметизація флаконів, як правило, призводить доінактивації вакцинних штамів Сухі біопрепарати мають низку істотних переваг, оскільки вони зберігають свої властивості у досить широкому діапазоні температур.
Вакцини, що містять у своєму складі речовини, що депонують, перед застосуванням необхідно інтенсивно збовтувати до отримання рівномірної суспензії.
Емульговані вакцини, що містять мінеральні олії, перед введенням необхідно підігріти у водяній бані при 36...37 ° С, а потім ретельно збовтати. Абсолютно неприпустиме заморожування рідких вакцин. Використання підлягають біопрепарати тільки з терміном придатності, що не минув, без наявності пластівців і різного роду опадів, плісняви, помутніння, видимих зовнішніх пошкоджень флаконів.
При розчиненні сухих біопрепаратів застосовують лише вказаний у настанові розчинник. Живі вакцини, що залишилися після вакцинації, підлягають знищенню кип'ятінням.
Усі флакони та ампули з біопрепаратами повинні бути опечатані та забезпечені етикетками, на яких вказують найменування препарату, біофабрику, дату випуску, термін придатності, серію, номер держконтролю, дозування. Зберігають і транспортують засоби для щеплення за умов, що не впливають на їх макроскопічний вигляд, специфічні властивості протягом терміну придатності.
У виробничих умовах біопрепарати зберігають у холодильних установках із певним мікрокліматом або на спеціальних складах (підвали). Приміщення (склади) для зберігання біопрепаратів повинні бути сухими, темними та прохолодними, з рівномірною протягом усього року температурою від 2 до 15 °С. Для зберігання кожного виду препарату має бути виділене обладнане певне місце або відділення (полиця, шафа). Забороняється спільне зберігання придатних та вибракованих препаратів. Приміщення для зберігання препаратів має бутизакрито, а ключ повинен перебувати у відповідальної особи, яка у спеціальній книзі веде суворий облік надходження та витрачання. Біопрепарати вибраковують за відсутності на флаконах етикеток, пошкодження упаковки, просочування препарату через пробку, промерзання, наявності сторонніх домішок, плісняви, плівок, грудочок, гнильного запаху, змін встановленої консистенції та кольору. Бракування препаратів проводять комісійно за участю ветеринарного лікаря. Знищення забракованих препаратів проводять шляхом автоклавування чи кип'ятіння під час складання акта.
Транспортування великих партій біопрепаратів в зимовий час проводять у вагонах, що обігріваються, або на автомашинах, що обігріваються.
Ліофілізація мікроорганізмів (біологічних препаратів). Використовують з метою тривалого зберігання мікроорганізмів та біопрепаратів.
Цей метод полягає у зневодненні біологічних об'єктів при низьких температурах під вакуумом, тобто вода видаляється із замороженого матеріалу шляхом випаровування льоду, минаючи рідку фазу. Ліофілізовані біопрепарати зберігають тривалий час свої первісні властивості та легко розчиняються у воді.
Ліофільна сушіння біопрепаратів включає в себе два етапи:
1. Рідкі біопрепарати, розлиті по ампулах або флаконах, заморожують при температурі -40-60 °С.
2. Заморожені препарати переносять у сушильну камеру та створюють глибокий вакуум.
Ампули або флакони швидко запоїють або закупорюють, попередньо створюючи вакуум, або заповнюють інертним газом. В даний час застосовується у ветеринарії велика кількість сухих вакцин та інших біопрепаратів.