Метод Міхаеліса, Фізико-хімічні методи аналізу
Метод Міхаеліса є прикладом колориметричного визначення рН. Визначення провадиться методом стандартного ряду. рН розчину визначають із одноколірними індикаторами. Забарвлення досліджуваного розчину порівнюють із забарвленням серії стандартних розчинів, наявних у готовому вигляді.
Якщо забарвлення досліджуваного розчину збігається інтенсивністю з забарвленням одного зі стандартних розчинів, то концентрація іонів водню в досліджуваному розчині така ж, як і в стандартному.
Спостереження зручніше проводити у компараторі (рис. 41). Компаратор складається з дерев'яного бруска, в якому просвердлені отвори (гнізда) таким чином, щоб просвіт можна було бачити і порівнювати колір розчинів у трьох парах пробірок, розташованих одна за одною. Визначення рН здійснюється за допомогою чотирьох індикаторів, кожен з яких діє у межах рН.
У наборі є чотири готові стандартні ряди в запаяних ампулах. Кожен ряд відповідає певному індикатору. На кожній ампулі є етикетка з назвою індикатора та величиною рН, якій відповідає розчин цієї ампули.
Щоб вибрати індикатор, треба знати приблизне значення рН випробуваного розчину. Для зразкового визначення рН є смужки так званого універсального індикаторного фільтрувального паперу, просоченого універсальним індикатором. Є кольорова шкала, де показаний колір універсального індикатора при певній величині рН. Для визначення рН наносять краплю випробуваного розчину на індикаторний папірець і порівнюють забарвлення плями на індикаторному папірціз забарвленням шкали.
Визначення є приблизним, з точністю до цілих одиниць рН.
Визначивши приблизне значення рН випробуваногорозчину вибирають індикатор, з яким проводять точне визначення рН. Наприклад, по індикаторному папірці рН розчину 3,0. Визначення слід проводити з індикатором а-дінітрофенолом, межі дії якого від рН 2,8-4,4.
Точне визначення рН (мікрометод). У пробірку перешкодять 0,6 мл випробуваного розчинуі 0,1 мл індикатора. Перемішують вміст пробірки та поміщають пробірку в середнє гніздо компаратора, потім вставляють матове біле скло. У сусідні гнізда вставляють ампули зі стандартного ряду даного індикатора. Переглядаючи розчин на тлі білого скла, встановлюють, з забарвленням якої ампули збігається забарвлення випробуваного розчину. Точність визначення рН до 0,1.
Якщо інтенсивність фарбування випробуваного розчину не дорівнює інтенсивності фарбування жодної з ампул даного стандартного ряду, це означає, що індикатор вибрано неправильно. Якщо забарвлення випробуваного розчину світліша за саму світлу ампулу, треба готувати розчин з індикатором, що діє в межах рН менших, ніж у раніше взятого індикатора. Якщо забарвлення випробуваного розчину інтенсивніше найяскравіше забарвленого в цьому ряду, треба застосовувати індикатор, що діє в більш високих межах рН. Недолік методу Міхаеліса – можливість вимірювання рН розчину лише в межах від 2,8 до 8,4.