Методика проб на сумісність крові під час переливання

До проведення гемотрансфузії слід встановити групу крові (ГК) реципієнта, донора та провести низку проб на індивідуальну сумісність. Розглянемо кожну із цих проб докладніше.

Визначення ГК донора та реципієнта

Спочатку медичний працівник проводить визначення ГК пацієнта за антигенами групи AB0. Найпоширенішими є два методи – визначення ГК за допомогою стандартних ізогемаглютинуючих сироваток та з використанням цоліклонів.

Методика проведення проб з використанням стандартних сироваток та планшеток

При використанні ізогемаглютинуючих сироваток застосовуються стандартні сироватки і спеціальні білі гладкі емальовані тарілки зі структурою, що змочується, розмічені по 4 групам відповідно.

Порядок дій лікаря наступний:

Лікар вказує на тарілці ПІБ пацієнта.
Капає по 1 краплі сироваток 0, А і В, причому використовується 2 серії сироваток (виходить 6 крапель).
Бере кров у реципієнта (капілярну чи венозну).
Отриману краплю крові поміщає в центр тарілки і змішує окремо з кожним зразком сироватки (причому об'єм сироватки потрібно брати вдесятеро більше, ніж об'єм краплі крові).
Перемішує кожну пару сироватка-кров окремою паличкою. Аглютинація починається через 10-30 сек.
У краплі, де спостерігається аглютинація, додає по 1 краплі фізрозчину та оцінює результати.

Четверта сироватка (АВ) використовується лише якщо аглютинували три попередні сироватки для перевірки результату. Відсутність аглютинації зі стандартною сироваткою означає відсутність відповідного аглютиніну на еритроциті. Тобто, наприклад, кров групи 0(I) не будеаглютинувати з жодної із використовуваних сироваток.

Цоліклони, що використовуються при визначенні груп крові

Також можливі постановки проб із цоліклонами (анти-А та анти-Б). Процедура визначення ЦК буде схожа на описану вище.

Відсутність аглютинації з цоліклоном також означатиме відсутність однобуквенного аглютиніну на еритроциті. Так, кров III групи даватиме аглютинацію тільки з анти-В цоліклоном.

При перевірці резус-фактора у медицині застосовується так званий прискорений метод зі стандартним універсальним реагентом.

Для цього в цетрифужну пробірку об'ємом не більше 10 мл капають 1 краплю реагенту (універсальної антирезусної сироватки четвертої групи, з 33% декстраном – полімерним вуглеводом) та капають туди 1 краплю крові пацієнта. Потім круговим рухом змішують і розносять суміш стінками пробірки, потім чекають 3 хвилини. На наступному етапі додають ємність 2-3 мл фізрозчину і перевертають ємність 2-3 рази, уникаючи збовтування. За наявності видимих пелюстків аглютинації роблять висновок у тому, що резус-фактор позитивний.

Кров донора обов'язково маркується

Група крові донора зазвичай визначається заздалегідь, і на пакеті з кров'ю має бути нанесене відповідне маркування. Так, ІІ група позначається синім, ІІІ – червоним, а ІV має жовту смужку.

Перед переливанням потрібно візуально оцінити її якість: кров, що підходить для переливання зверху жовтувата (шар плазми), а внизу - темно - червона, власне осад з еритроцитів.

Однак, якщо в пакеті видно згустки, пластівці або плівки, а так само якщо рожева плазма (ознака гемолізу), то таку кров не можна використовувати.

Контрольне встановлення групи крові донора проводять після повногорозморожування пакету. Краплю для аналізу беруть не з основного, а з невеликого додаткового відсіку пакета. Методика визначення аналогічна таким щодо у реципієнта.

Результати контрольного визначення мають збігатися з інформацією на флаконі. Після успішного контрольного визначення приступають до виконання проб на сумісність.

Проби на індивідуальну сумісність

Проби на індивідуальну сумісність проводяться за двома системами: за системою АВ0, а також за резус-фактором донора та рецепієнта.

За системою АВ0

Центрифуга, яка використовується для визначення груп крові

При проведенні проби на індивідуальну сумісність системи AB0 (також відомої як холодова проба) :

Беруть 3-5 мл свіжої крові реципієнта, центрифугують її
забирають краплю сироватки, що вийшла.
Потім крапля наноситься на білу тарілку поруч із невеликою краплею крові донора, краплі змішуються.
Через 5-10 секунд оцінюється, змінився розчин чи ні.
Якщо «злипання» червоних клітин крові не відбулося, можна переходити до проведення проби на встановлення індивідуальної сумісності по резус-фактору.

За резус-фактором

Відомо два загальноприйняті способи визначити сумісність резус-фактору.

Перший має на увазі використання центрифуги. Для цього в пробірку центрифугування поміщають 2 краплі сироватки пацієнта, 1 краплю крові з флакона, 1 краплю 33% декстрану і центрифугують 5 хвилин. Після цього до суміші додають 3-4 мл фізрозчину та оцінюють результати. За відсутності аглютинації можна перейти до проби на біологічну сумісність.

Другий метод (так звана теплова проба) полягає у наступному. У колбочку міститься 1крапля крові донора, 2 краплі теплого 10% розчину желатину та пара крапель сироватки реципієнта. Суміш інкубують протягом 10 хвилин на водяній бані, де підтримується температура +46-48 градусів, а потім вносять 5 мл фізіологічного ізотонічного розчину. Оцінка результатів проводиться аналогічно пробі з центрифугою.

Проба на біологічну сумісність

Перед процедурою переливання крові необхідно провести біологічну пробу

Проба на біологічну сумісність, по суті, це перший етап безпосередньо гемотрансфузії і проводиться виключно лікарем. Лікар, який проводить пробу, виконує такі дії:

приєднує краплинну систему і вводить перші 15-20 мл донорської крові струминно;
зупиняє трансфузію;
чекає 3-5 хвилин, спостерігаючи за пацієнтом. Насторожити повинні поява тахікардії, утруднення дихання, болю в попереку, ознобу чи спека.
якщо все протікає благополучно, пробу вважають позитивною та виконують подальшу трансфузію

Таким чином, якщо всі проби на сумісність пройшли благополучно, можна проводити переливання крові. Правильна швидкість переливання становить 50-70 крапель за хвилину.

Звичайно, існують не тільки групи, описані в системах AB0 і резус-фактора, оскільки на сьогоднішній день описано 250 груп крові. Однак, проведення описаних вище проб на сумісність дозволяє виявити несумісність і з більшості інших аглютинінів і аглютиногенів, що в результаті робить гемотрансфузіологічні заходи щодо безпечної процедури при правильній підготовці.