Посмертна діагностика гельмінтозів
Посмертна діагностика гельмінтозів здійснюється при розтині трупів та дослідженні туш сільськогосподарських тварин та виявленні гельмінтів та характерних патологоанатомічних змін в органах та тканинах. Деякі гельмінтози (аскаридоз, фасціолез, днктіокаулез, метастронгільоз та ін.), збудниками яких є великі гельмінти, можуть бути діагностовані при патологоанатомічному розтині.
Однак багато гельмінтозів, викликані дрібними паразитичними хробаками, можна ччно діагностувати тільки шляхом гельмінтологічних розтинів. Розрізняють кілька модифікацій гельмінтологічних розтинів тварин: 1) метод повних гельмінтологічних розтинів тварин за К. І. Скрябіном — передбачає обстеження всіх без винятку органів і тканин господаря з метою виявлення та збирання всіх паразитичних черв'яків у імагінальній стадії; 2) метод повних гельмінтологічних розтинів окремих органів за К. І. Скрябіном - дозволяє встановити ступінь інвазованості окремих органів певними видами паразитичних черв'яків (при диктіокаулезі ретельно досліджують трахею і бронхи, при простогонімозі - яйцевід і фабрицієву сумку птахів); 3) метод неповних гельмінтологічних розтинів — звичайний іатологоанатомічний метод розтину, при якому виявляють тільки найбільших гельмінтів (аскарид, монієзій і т. д.); 4) метод парціальних гельмінтологічних розтинів (за Шульцем і Шахназаровою) — передбачає дослідження (макроскопічне або за допомогою лупи) лише частини вмісту органів разом із гельмінтами (матриксами).
Дослідження органів та тканин компресорним методом застосовують рідше попереднього методу. Він полягає в наростаючому роздавлюванні дрібного органу, або його окремої частини, або зіскрібку зі слизової оболонки кишечника міжкомпресорним або іншим склом до прозорості. Приготовлений таким чином препарат проглядають під лупою або під малим збільшенням мікроскопа. Виявлених гельмінтів обережно витягують після роз'єднання скляних пластинок. Використовують при гельмінтологічних розтинах курчат, каченят, гусенят, молюсків та інших дрібних тварин. Іноді при розтині тварин ці методи доцільно комбінувати.
Органи травлення обережно ізолюють і кладуть в окремі кювети стравохід, шлунок (окремо передшлунки у жуйних), тонкі кишки, товсті кишки, печінку та підшлункову залозу.
Після поділу органів приступають до їх розтину.
Стравохід розрізають ножицями по всій довжині, оглядають наявність пухлин і гельмінтів. Потім предметним склом або прямим скальпелем роблять зіскрібок зі слизової оболонки і досліджують його між двома стеклами «сухим способом».
Шлунок розкривають великою кривизною; вміст його поміщають у циліндр. Спорожнений шлунок змивають водою в цей же посудину, доливають водою, розмішують дерев'яною палицею і залишають у спокої на 10-15 хвилин. Зі слизової шлунка беруть зіскрібок і досліджують компресорним методом. Після відстоювання верхній шар рідини обережно зливають (щоб не викинути паразитів), а посудину з осадом знову наповнюють водою, розмішують і знову відстоюють. Періодичне промивання осаду циліндрі повторюють до просвітлення рідини. Після чергового зливання рідини (останнього) осад переглядають макроскопічно та під лупою.
У птахів два шлунки: залізистий і м'язовий. Розкритий залозистий шлунок обполіскують у кюветі (для послідовного промивання надалі). Розправлений шлунок розглядають проти джерела світла. У залозах можна виявити округлих самок тетрамер червоногокольори. На межі м'язового та залізистого шлунків нерідко знаходять вузли, що містять у собі нематод (ехінурій). З боку серозної оболонки залозистого шлунка качок іноді виявляють потовщення 1 величиною до волоського горіха, в яких знаходяться нематоди (гістріхи), у яких головний та хвостовий кінці висунуті в просвіт шлунка. М'язовий шлунок розрізають ножицями вздовж однієї з його боків, розгортають його, обполіскують у кюветі. Вміст шлунка досліджують шляхом послідовного промивання. Потім відокремлюють кутикулу від слизової оболонки, де часто виявляють у водоплавних птахів стрептокар та амідостом. Іноді внутрішню оболонку кутикули досліджують під лупою.
Тонкі та товсті кишки розкривають окремо у кюветах з водою. Спочатку тонкі кишки звільняють від брижі (розправляють) та жиру. Потім розрізають на стороні, протилежній прикріпленню брижі. Вміст кишечника поміщають в один циліндр, а глибокий зіскрібок зі всієї слизової оболонки - в інший циліндр і після промивання (до просвітлення) осад досліджують макроскопічно та під лупою. Так само розкривають і товсті кишки. У птахів слід розкривати окремо 12-палу кишку від тонких кишок та пряму кишку від сліпих кишок з метою виявлення цестод та трематод деяких видів, що пристосувалися до паразитування у цих органах.
Печінку кладуть в емальовану кювету білого кольору, відокремлюють жовчний міхур, який поміщають в окремий невеликий посуд, де розрізають і заливають водою і кілька разів промивають. Печінка у посудині з водою спочатку розрізають ножицями по ходу жовчних ходів, потім розривають руками на дрібні шматочки, доливають у посудину води. Подальше дослідження подрібненого вмісту проводять методом послідовного промивання. Після цього осад переглядають.
Підшлункову залозу досліджують методом послідовного промивання після попереднього подрібнення руками.
Органи дихання. Гортань, трахею, бронхи розрізають та оглядають; роблять зіскрібки зі слизовою оболонкою, досліджують компресорним способом. Паренхіму легень заливають водою, подрібнюють на дрібні частини та досліджують методом послідовного промивання. Для уражених ділянок (що осіли на дно) також застосовують компресорний метод.
Статеві органи досліджують методом зіскрібка, послідовного промивання та компресорно.
Сечові органи. У нирках макроскопічно оглядають ниркову балію (після попереднього розрізу), а паренхіму досліджують компресорним способом під лупою. Сечовий міхур та сечоводи розкривають, оглядають; зі слизової оболонки роблять глибокий зіскрібок. Сечу досліджують методом послідовного промивання.
Очі розкривають, переглядають внутрішні сфери, повіки, кон'юнктивальний мішок та досліджують методом послідовного промивання.
Мозок (головний і спинний) розрізають на скибочки і досліджують компресорним методом під лупою.
Серце та великі кровоносні судини розкривають у фізіологічному розчині та досліджують методом послідовного промивання, контролюючи осад на чорному та білому тлі, з подальшим проведенням через лупу.
Вміст черевної та грудної порожнин можна досліджувати також методом послідовного промивання.
Збір, консервування, етикетування та пересилання гельмінтів
Виявлених паразитичних черв'яків в органі або його вмісті витягують препарувальною голкою, пензликом (великих паразитів-пінцетом) і переносять в окремі пробірки з рідиною, що консервує; нематод відразу поміщають у рідину Барбагалло (3%-ний розчин формаліну на фізіологічному розчині), атрематод, цестод і скребнів спочатку поміщають у воду, де вони гинуть, потім пресують і переносять у пробірки з 70° спиртом. Цистицерків, ценурів, ехінококів консервують у рідині Барбагалло. Всередину кожної пробірки кладуть паперову етикетку, де простим олівцем або тушшю відзначають вигляд і стать тварини (від якої зібрані гельмінти), номер розтину (як це записано в журналі розтину), орган, де виявлено гельмінти, які паразити (Trematoda, Cesto-idea, Nematoda або Acanthocephala) та їх число; на звороті етикетки відзначають місце, де зроблено розтин, дату .розкриття та прізвище розкриває.
Результати повних та неповних гельмінтологічних розкриттів реєструють у спеціальному журналі.
Зібраний, законсервований та заетикетований гельмінтологічний матеріал необхідно захистити від висихання. Для цього пробірки з гельмінтами поміщають у банку з притертою пробкою або пластмасовою кришкою, що нагвинчується. На дно банки настилають вату, потім встановлюють вертикально два-три яруси пробірок та заливають рідиною, яка знаходиться у пробірках. Незаповнений пробірками простір щільно тампонують ватою. При транспортуванні (з умисним) банку зовні обкладають пакувальним матеріалом (ватою, стружками).
При збиранні невеликої кількості гельмінтів їх можна поміщати в невеликі флакони (з-під пеніциліну), а також у баночки з кришкою, що нагвинчується, які перед закупоркою заливають консервуючою рідиною.
Іноді зібраний матеріал надсилають у добре упакованому вигляді поштовою посилкою.
Зібрані під час гельмінтологічних розтинів гельмінти визначають до вигляду після їх попереднього просвітлення та забарвлення. Просвітлюють нематод, акантоцефал, а також сколекси (головки) цестод у молочній кислоті, 50% гліцериніабо суміші рівних частин молочної кислоти і гліцерину, для чого готують тимчасові препарати. Складніше визначати трематод і цестод через необхідність їх забарвлення та приготування їх постійних препаратів. Для фарбування цих гельмінтів запропоновано значну кількість фарб та методів. У практичних умовах частіше використовують галуновий кармін.