Препарат, що володіє бактерицидною та антиметастатичною активністю

Власники патенту UA 2445108:

Винахід відноситься до галузі медицини, зокрема до галузі фармакології та патофізіології, і може бути використане як засіб, що володіє протизапальною та імуностимулюючою дією.

Відомо використання відварів березових бруньок і листя як протизапальний засіб при простудних захворюваннях, а також при лікуванні туберкульозу (В.П.Махлаюк. Лікарські рослини в народній медицині. - Саратов: Приволзьке книжкове вид-во, 1993 р. - С.58) .

Однак даний відвар має слабку бактерицидну дію.

Відома композиція інгредієнтів, що має біологічну активність (варіанти), що містить культуральну рідину чайного гриба та настою чаги (патент Україна №2280394, опубл. 16.12.04.).

Однак даний препарат має слабку антиметастатичну активність і призначений для прийому в якості харчової добавки при виробництві різноманітних напоїв.

Завданням винаходу є розробка препарату, що володіє підвищеною бактерицидною та антиметастатичною активністю.

Зазначене завдання вирішується тим, що препарат, що володіє бактерицидною та антиметастатичною активністю на основі водного екстракту рослинної сировини, містить водний екстракт (витяжку) чаги та березової кори, взятих у ваговому співвідношенні 1:4.

Винахід пояснюють опис препарату та результати лабораторних досліджень його бактерицидних та антиметастичних властивостей.

Препарат одержують за відомою технологією, використовуючи будь-які типи установок для отримання водних екстрактів (витяжок) із рослинної сировини. Як останні використовують чагу і березову кору, взяті у ваговому співвідношенні 1:4. Отриманий екстракт (препарат) є рідиноюсвітло-коричневого кольору, який може бути використаний як прямо – при зовнішньому, так і у вигляді водних та спиртових розчинів необхідної концентрації – при внутрішньому застосуванні.

Визначення бактерицидної активності препарату проводилося методом вертикальної дифузії на щільному поживному середовищі «НОВА» (Г.Г.Мордовський, 1972) з використанням лабораторного штаму МБТ Н37Rv.

У ході дослідження навішування культури лабораторного штаму H37Rv помістили в стерильну фарфорову ступку, розтерли до гомогенної маси, поступово додаючи стерильний фізіологічний розчин. Отриману суспензію культури стандартизували за бактеріальним стандартом каламутності, що відповідає 1 млрд. мікробних тіл (10 одиниць ДКІ). У пробірки з живильним середовищем засіяли по 0,1 мл суспензії МБТ, після чого їх помістили в горизонтальному положенні термостат на 24 години при температурі 37°С.

Були приготовлені водні розчини досліджуваного препарату концентрації: 100; 50; 25; 12,5; 6,25%.

У кожну пробірку, засіяну штамом H37Rv, вносили досліджуваний препарат відповідної концентрації і поміщали термостат при температурі 37°С.

Дію препарату кожної концентрації на МБТ вивчали на трьох паралельних лавах. Для порівняння як контроль використовували ізоніазид в аналогічних концентраціях. Реєстрацію отриманих результатів проводили через 10 днів з огляду на величину зон затримки зростання МБТ (мм). Результати представлені у таблиці.

Таблиця 1
Результати дослідження бактерицидних властивостей препарату
Препарати	Концентрація препарату, %
100	50	25	12,5	6,25
Досліджуваний препарат (Водний екстракт чаги та березової кори)	58	50	40	35	27
55	50	40	30	25
52	46	43	30	27
55±2	48,7±1,8	41±1,3	31,7±2,2	26,3±0,9
Концентрація ізоніазиду, мкг/мл
Ізоніазид
25,0	12,5	6,25	3,12	1,5
>70	60	60	45	40
>70	58	60	40	40
>70	55	45	40	37
>70	57,7±1,8	55±6,7	45±3,3	39±1,3

З наведених у таблиці 1 даних випливає, що за своїми бактерицидними властивостями запропонований препарат (водний екстракт (витяжка) чаги та березової кори), у тому числі в 50% концентрації, відповідає бактерицидним властивостям ізоніазиду в концентрації 25,0 мкг/мл.

Для визначення антиметастатичної активності препарату досліди проведені на мишах з підшкірно трансплантованими пухлинами, що входять до складу панелі пухлинних штамів для скринінгу МБР протипухлинної активності: аденокарциноми молочної залози Са755, лімфолейкозу Р388 та меланоми В1. Пухлинні штами вводили в обсязі: Р388 - по 1 млн. кл/миша, Са755 і В16 - по 40 мг пухлинної тканини на мишу в 0,3-4 мл живильного середовища 199.

У досвіді з Са755 з 6 груп по 8 мишей 5 груп отримували лікування запропонованим препаратом і одній групі – контрольна – вводили фізіологічний розчин. Препарат використовували у 100% та 20% концентрації після розведення стерильним фізіологічним розчином шляхом введення в черевну порожнину у разовій дозі 0,1-0,5-1,0 мл на мишу. Введення препарату розпочали через 72 години після трансплантації.пухлинного штаму та здійснювали щодня протягом 5-ти днів. Сумарна доза препарату склала відповідно 0,5-2,5-5,0 мл/миша.

У досліді з Р388 було 2 групи по 10 мишей: одній групі вводили препарат 20% концентрації, отриманої в результаті розведення фізіологічним розчином, а інший - контрольної - фізіологічний розчин. Введення препарату проводили в черевну порожнину в разовій дозі 0,5 мл/мишу та здійснювали щодня протягом 5 днів, розпочавши через 72 години після трансплантації пухлинного штаму. Сумарна доза становила 2,5 мл/миша.

У досліді з В16 із 3 груп мишей дві групи отримували препарат 20% концентрації та однієї - контрольної - вводили фізіологічний розчин. Введення препарату здійснювали у черевну порожнину щодня також протягом 5 днів, починаючи через 72 години після трансплантації пухлинного штаму. Разові дози становили 0,25 та 0,5 мл на мишу, сумарні дози відповідно 1,25 та 2,5 мл/миша.

Після закінчення досвіду пухлини вимірювали, визначали середні обсяги та розрахували стандартний показник ефективності – гальмування росту пухлини (ТРО), який виражали у відсотках до показників контрольної групи. При оцінці виходили, що показник ефективності при первинному дослідженні (скринінг) - ТРО≥50%. Достовірність результату оцінювали за стандартним методом Стьюдента з розрахунком довірчого інтервалу в групах, що порівнюються. Відмінність вважалася достовірною при p≤0,05.

При аналізі результатів дослідів встановлено наступне.

---