Протективні властивості нової грипозної інактивованої віросомальної вакцини (стор.
| З-за великого обсягу цей матеріал розміщено на кількох сторінках: 1 2 3 |
Антигени збудників у змивах з носоглотки визначали за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР), визначаючи РНК або ДНК вірусів. Етіологію захворювань - імунофлюоресцентним методом (ІФ),визначаючи антигени збудників респіраторних інфекцій в епітеліальних клітинах слизової носа з використанням стандартних препаратів імуноглобулінів флюоресціюючих сухих (ІГФС) для ранньої діагностики відомих збудників грипу діагностичних препаратів при НДІ грипу).
Виділення вірусів у клітинних культурах та курячих ембріонах з їх ідентифікацією проводили в лабораторії еволюційної мінливості вірусів грипу, керованої б.н. , відповідно до методичних рекомендацій ( та ін, 2006).
Серологічні методи дослідження виконувались у лабораторії біотехнології діагностичних препаратів НДІ грипу (керівник д. м.н., професор).
Застосовувалися реакція гальмування гемаглютинації (РТГА), імуноферментний аналіз (ІФА) з використанням набору антигенів вірусів грипу А та В, парагрипу, адено-, РС-, коронавірусів, мікоплазми пневмонії. У РТГА використовували діагностикуми вірусів грипу в епідсезони: р. р. - А/Нова Каледонія/20/99 (H1N1), А/Вісконсін/67/2005 (H3N2), В/Малайзія/2506/2004; мм. ‑ A/Соломонові острови/3/2006 (H1N1), A/Вісконсін/67/2005 (H3N2), B/Малайзія/2506/2004, B/Флорида/04/06; мм. - A/Брісбен/59/2007 (H1N1), A/Брісбен /10/2007 (H3N2), B/Флорида/4/2006, B/Брісбен/60/08; м. ‑ А/Каліфорнія/07/09 (H1N1)pdm, А/Вісконсін/15/09 (H3N2),В/Брісбен/33/08, В/Санкт-Петербург/40/09. Імуногенність грипозних вакцин оцінювали за критеріями, наведеними в таблицях 3, 4.
Критерії імуногенності (дорослі від 18 до 55 років)
Вакцинний штам вірусу грипу
Величина титру антитіл до вакцинації
Вакцина повинна викликати приріст гомологічних антитіл у крові у 4 та більше разів після одноразового введення вакцини
Таблиця 4 - Критерії імуногенності вакцин проти грипу людини за міжнародними вимогами (СРМР ЕМЕА, СРМР/ЕWР/1045/01)
Фактор сероконверсії (кратність приросту) (підвищення середніх геометричних титрів антитіл на 21 день порівняно з вихідним рівнем), виражений у кратності збільшення
Рівень сероконверсії (відношення кількості добровольців, у яких титр антитіл підвищився більш ніж у 4 рази порівняно з вихідним рівнем, і у яких на 21 день титр не менше 1:40)
Рівень серопротекції (відсоток осіб, які мають титр антитіл більше 1:40 на 21 день після вакцинації)
Дослідження та оцінка проявів епідемічного процесу на територіях, що вивчаються, проводилися за даними щотижневого моніторингу з аналізом інтенсивності та структури епідемічного процесу в понеділковій динаміці.
Статистична обробка: під час аналізу отриманих результатів визначали середні величини, стандартне відхилення, довірчі інтервали. Оцінку статистичної достовірності відмінностей проводили за допомогою комп'ютерної програми GraphPad Prism (версія 5,0) з використанням тесту t-розподілу Стьюдента для вибірок з нормальним розподілом, або непараметричних критеріїв Манна-Уітні, Вілкоксона. Відмінності вважалися достовірними за р 0,05). Встановлено безпеку вакцин, що застосовуються. Оцінка показників клінічного табіохімічного аналізів крові, клінічного аналізу сечі виявила, що у спостерігаються у всіх групах до проведення вакцинації, і, що найбільш важливо, при повторних дослідженнях на 7-й та 21-й дні не відзначено значних змін, ці показники залишилися в межах нормальних значень. Таким чином, не було виявлено побічної дії від застосування вакцин у стандартних регламентованих гематологічних та біохімічних тестах.
Імуногенну активність вакцин оцінювали при аналізі парних сироваток крові в РТГА, взятих до та через 21 день після імунізації. Виявлено такі показники імуногенності вакцин у щеплених вакциною Ультрікс 35 мкг: чотириразові сероконверсії до вірусу грипу А(Н1N1) становили 94,0%, кратність приросту антитіл 18,1, рівень серопротекції 94,0%. До вірусу А(Н3N2) - 86,0% чотириразових конверсій, кратність приросту 8,6 та рівень серопротекції 90,0%; до вірусу типу В – чотириразові сероконверсії 90,0%, кратність приросту – 10,4 та рівень серопротекції 78,0% відповідно. У добровольців, щеплених вакциною Ультрікс 45 мкг, рівень сероконверсій до вірусів А(Н1N1), А(Н3N2) і В істотно не відрізнявся від аналогічного показника у щеплених вакциною Ультрікс 35 мкг і склав відповідно 94,0%, 86,0% і 90 0% (рисунок 3).
Рисунок 3. Рівень сероконверсії вакцин Ультрікс 35 мкг, 45 мкг та Ваксигрип у добровольців 18-60 років (%)
Фактор сіркоконверсії становив відповідно 19,4, 9,4 та 6,9. Рівень серопротекції після вакцинації препаратом Ультрікс 45 мкг до цих вірусів дорівнював 86,0%, 90,0% та 78,0% відповідно. Рівень сероконверсій у щеплених препаратом Ваксигрип до вірусів А(Н1N1), А(Н3N2) та В – 98,0%, 94,0% та 88,0%, рівень серопротекції – 100,0, 94,0% та 86, 0%, фактор сіркоконверсії – 26,7, 9,7 та 14,7відповідно (таблиця 5).
Таблиця 5 ‑ Імуногенна активність грипозних вакцин Ультрікс 45 мкг та 35 мкг, вакцини порівняння Ваксигрип
Рівень сероконверсії Абс./% (95% ДІ))
Фактор сероконверсії (1-2 сив.) (95% ДІ)