Протромбіновий тест (ПТ) за Квіком - Студопедія
Методика виконання ПТ-тесту була запропонована Квіком (Quick AJ. та співавт.) у 1935 р. і полягає у визначенні часу згортання цитратної плазми після додавання тромбопластину та Са 2+ .
У тесті протромбіновий час за Квіком для переведення часу згортання у % факторів протромбінового комплексу будується калібрувальний графік з використанням розведень стандартної плазми. Графік має форму логарифмічної залежності. Для обчислень вручну можна використовувати лінелізацію графіка (рис. 99) в координатах «1/% протромбіну» (тобто 100% -0,01; 75% - 0,0133; 50% - 0,02; 25% - 0 ,04; подальше розведення небажано, оскільки можливе відхилення калібрування через значне зниження концентрації фібриногену). Недоліком цього методу калібрування ПВ є те, що розведе-
ня плазми моделює лише зниження концентрації факторів, яке може спостерігатися, наприклад, при порушенні синтезу білків у печінці або розвитку коагулопатії споживання. При дефіциті вітаміну К або прийомі його антагоністів (непрямих антикоагулянтів) концентрація факторів може бути близькою до норми, але їх функціональні властивості суттєво змінені. Тому ПВ за Квіком рекомендується використовувати при постановці коагулограми для виявлення механізмів порушення зсідання крові.
Нахил кривої калібрування може залежати від того, який буфер або фізіологічний розчин були використані для розведень. Розведена плазма нестабільна, тому розчини розведеної контрольної плазми зберігати не рекомендується, необхідно використовувати стільки вихідної плазми, скільки потрібно для серії розведень і не більше.
При очевидній простоті виконання самого тесту оцінка його результатів єсерйозну проблему, яка остаточно не вирішена досі. Дві основні причини спричиняють складність проблеми. По-перше, у тесті активується ряд послідовних та взаємовпливових реакцій, і сумарна швидкість залежить від багатьох параметрів (рис. 100). По-друге, час згортання нормальної і, що дуже важливо, патологічної плазми значно варіює залежно від джерела та методу отримання тромбопластину.
Мал. 99. Лінелізація калібрувального графіка протромбіновий час за Квіком в координатах «1/% протромбіну» - час
Мал. 100. Послідовні та взаємовпливові реакції, що визначають сумарну активність протромбінового тесту (ПТ)
Забезпечення діагностики порушень гемостазу у КДЛ
Протромбіновий час, виражений через міжнародне нормалізоване ставлення (MHO)
Сучасні коагулометри програмуються на обчислення MHO. Стандартизований протромбіновий тест був розроблений Міжнародним комітетом зі стандартизації в гематології та Міжнародним комітетом з тромбозу та гемостазу та прийнятий ВООЗ у 1983 р. В його основі лежить наявність лінійної залежності між логарифмами протромбінового часу, визначеними з різними тромбопластинами. На практиці це означає, що значення ПЗ, визначені з використанням різних тромбопластинів, можуть бути наведені шляхом зведення в ступінь, що являє собою МІЧ тромбопластину, що використовується, до величини, яка була б отримана при визначенні факторів протромбінового комплексу з первинним стандартом тромбопластину. Цю величину було запропоновано називатиMHO -міжнародним нормалізованим ставленням (INR - англійська абревіатура). За рекомендацією ВООЗ визначення МІЧ (ISI – англійська абревіатура)є обов'язком виробників тромбопластину, які повинні визначати відносну чутливість кожної серії тромбопластинів, що випускаються ними, порівнюючи її з еталоном тромбопластину, чутливість якого прийнята за одиницю.
MHO розраховують за формулою:
Контроль за лікуванням непрямими антикоагулянтами
При прийомі непрямих антикоагулянтів змінюються як зовнішній, так і внутрішній шляхи активації протромбінази, проте ефект непрямих антикоагулянтів більшою мірою позначається на зовнішньому каскаді, і більше змінюється ПВ, ніж АЧТВ.
При терапії непрямими антикоагулянтами використання MHO дозволяє оцінювати ступінь гіпокоагуляції незалежно від тромбопластину, порівнювати результати, отримані різними лабораторіями. Для конт-
Роль за терапією непрямими антикоагулянтами рекомендується використовувати тромбопластини зі значеннями МІЧ нижче 2 (краще 1,0-1,2).
Обмеження використання MHO
Є досить значні обмеження використання MHO в лабораторній практиці:
• MHO не може використовуватися на початковому етапі лікування непрямими антикоагулянтами, так як існуючі відмінності між разів ними тромбопластинами вносять занадто великі флуктуації на цьому етапі, які не можуть бути компенсовані вироби ними реагентів.
• MHO не використовується для контролю і моні торингу стану зовнішнього каскаду активу ції протромбінази в загальній популяції па цієнтів, які не приймають непрямих антико агулянтів. У цьому випадку потрібно використовувати ПТ, відмінності у визначенні якого зберігаються між різними лабораторіями. Коментарі щодо різних способів
вирази ПТ-тесту представлені втабл. 21.
ПВ подовжене (ПІ знижено, ПЗ та MHO підвищено) -вроджений дефіцит факторів II, V, VII, X, хронічні захворювання печінки з порушенням функції, дефіцит вітаміну К (холес-таз, мальабсорбція, дисбактеріоз), лікування антикоагулянтами непрямої дії, гіпофібріногенемія (менше 0,5 г/л), дисфібриногенемія та порушення полімеризації фібрину, ДВС-син-дром, присутність інгібіторів згортання (гепарин, ПДФ).
ПВ укорочено (ПІ збільшено, ПЗ та MHO знижено) -стан гіперкоагуляції, масивне надходження тканинного тромбопластину в кровотік (травма, некроз), підвищена згортання під час вагітності та після пологів.
Виявлення дефіциту факторів
з використанням принципу замінних проб
Клоттинговий метод визначення активності ф.VII заснований на використанні замінних
Забезпечення діагностики порушень гемостазу у КДЛ
Способи вираження протромбінового тесту
 |
проб із плазмою, позбавленої ф.УП. Метод аналогічний до визначення активності інших факторів
у тесті АЧТВ, проте при аналізі активності ф.VII використовується тест ПВ.
Тромбіновий час (ТВ) - скринінговий тест на полімеризацію фібриногену/фібрину та на антикоагулянтну активність у плазмі. ТБ реєструється згортанням плазми при додаванні до неї низької або середньої концентрації тромбіну (бичачого або людського). ТБ визначається в основному кількістю та якістю фібриногену та присутністю антикоагулянтів у плазмі. Якщо в плазмі є гепарин, то комплекс гепарин-антитромбін швидко нейтралізує доданий тромбін і ТБ буде подовжуватися. Серед скринінгових тестів ТБ – найбільш чутливий тест на присутність гепарину. Водночас відомо, щочутливість до гепарину у ТБ залежить від рН, іонної сили тест-системи, властивостей тромбіну (походження та ступінь очищення), тобто значною мірою визначається складом набору реагентів.
Збільшення ТБ відбувається також у присутності щодо високої концентрації про-
дуктів деградації фібрину (ПДФ), що спостерігається при призначенні тромболітичної терапії, при ДВЗ-синдромі, захворюваннях печінки та при дисфібриногенеміях. Результат визначається як загальною кількістю ПДФ, а й їх складом. Непрямі антикоагулянти впливають на результати тесту.
Іноді подовження ТБ спостерігається у присутності аутоантитіл до тромбіну або парапротеїнів при мієломній хворобі, які перешкоджають полімеризації мономерів фібрину. Інгібіторами полімеризації фібрин-мономерів можуть бути IgG або IgM, які подовжують як ТБ, так і рептилазний час. Аутотелу до тромбіну пригнічують тільки ТБ і не впливають на рептілазний час.
До збільшення ТБ призводять: • зниження концентрації фібриногену менше
0,5 г/л (вроджена або набута гіпо/
Забезпечення діагностики порушень гемостазу у КДЛ
• якісні зміни молекули фібрино гену (дисфібриногенемія);
• присутність фізіологічних (гепарин) і патологічних (ГДФ, моноклональні білки ки) інгібіторів тромбіну та фібриноутворення;
• наявність парапротеїнемії, уремії, в деяких випадках вовчакових антикоагулянтів. Межі нормальних значень ТБ залежить від
умов постановки методу та повинні визначатися у кожній лабораторії самостійно. Тест не стандартизований, в різних лабораторіях можуть використовуватися.
користуватися різні концентрації тромбіну. Тест може виконуватись у модифікаціях, зокрема після нейтралізації гепаринупротамін-сульфатом. Тест практично не придатний для моніторингу за лікуванням гепарином або гірудин, оскільки результати залежать від стану системи фібриноген-фібрин, крім того, ТБ характеризується дуже малим часовим інтервалом. Результати багато в чому залежать від того, на якому ко-агулометр проводилося дослідження - механічному або оптичному, але в будь-якому виконанні характеризуються низькою відтворюваністю.
Рептілазний час (батроксобіновий час)
Батроксобін (або рептилаза) - тромбіноподобна протеаза з отрути щитомордника звичайного, яка здатна викликати перехід фібриногену в фібрин. Рептилаза відщеплює від фібриногену тільки фібринопептид А, що відрізняє її від дії тромбіну, який крім фібрино-пептиду А відщеплює від фібриногену ще й фібринопептид В (рис. 101) і активує фактори V, VIII, XIII. Рептилаза не пригнічується антитромбіном, тому цей тест можна використовувати для оцінки полімеризації мономерів фібрину в присутності гепарину. Рептілазний час часто визначають одночасно з ТБ (табл. 22).
Чи не знайшли те, що шукали? Скористайтеся пошуком:
Вимкніть adBlock! і оновіть сторінку (F5)дуже потрібно