Розрахунок дня вакцинації птиці за формулою Девентер яку тест-систему використовувати, Головний фермерський
Нові підходи до контролю інфекційних захворювань спрямовані на покращення якості роботи ветеринарної служби. Найяскравіший приклад – контроль хвороби Гамборо, який уже протягом п'яти останніх років в Україні здійснюється «не наосліп». Сьогодні ветеринарний лікар будь-якого птахівничого господарства для визначення дня вакцинації проти хвороби Гамборо використовує математичний розрахунок за результатами серологічного дослідження, що значно покращило епізоотичну ситуацію в країні.
День на день В основі розрахунку термінів вакцинації лежать закономірності елімінації материнських антитіл - рівномірне зниження титру антитіл до нульової позначки. Зниження рівня антитіл вдвічі здійснюється за певний період. Цей період називається періодом напіврозпаду (ПП). Ця величина визначена в лабораторних умовах. Вона залежить від рівня метаболізму та інтенсивності зростання птиці. Для несучок період напіврозпаду становить п'ять днів, батьків несушки – п'ять-п'ять із половиною днів, для бройлерів – три – три з половиною дні, батьків бройлерів – чотири з половиною дні.
Таким чином, рівень материнських антитіл знижується вдвічі (або на один log2) за період напіврозпаду. Знаючи цю закономірність, ми можемо за допомогою математичної формули розрахувати день, коли титр досягне рівня, який не перешкоджатиме ефективній дії вакцини. Цей рівень материнських антитіл називається цільовим титром (ЦТ). Цей показник - постійна величина, що визначається виробником вакцин. Цільовий титр залежить від імуногенності - "сили" вакцини. Наприклад, цільовий титр для середніх вакцин – 125, а середніх плюс – 500 тощо.
Щоброзрахувати день вакцинації, лікарю необхідно визначити вихідний титр материнських антитіл (ІТ.) у перші дні життя та знати вік (В) птиці в момент взяття крові. Чотири вищеперелічені величини: вихідний титр материнських антитіл, період напіврозпаду, цільовий титр материнських антитіл, вік птиці – величини, необхідні для введення у формулу Девентер, яка з 1990 р. стала найбільш точною математичною формулою для розрахунку дня вакцинації при одноразовій та дворазовій схемою: (Log 2 ІТ - Log 2 ЦТ) х ПП + В, ІТ - вихідний титр материнських антитіл; ЦТ – цільовий титр материнських антитіл; ПП - період напіврозпаду; В - вік птиці в момент взяття крові.
Ближче до справи Як на практиці здійснюють розрахунок термінів вакцинації? Перш ніж впритул підійти до цього питання, слід зазначити деякі рекомендації від розробника формули, які суттєво впливають на якість кінцевого результату (1).
Відомо, що для розрахунку дня вакцинації слід відбирати сироватки від репрезентабельної кількості курчат (не менше 18) із різних місць пташника методом «конверта». Курчата мають бути першокласної якості. Від слабких чи зневоднених особин відбирати сироватки годі було, оскільки вони є типовими представниками стада. Вік курчат у момент відбору крові може варіювати від одного до десяти днів. Ці терміни можна прив'язувати до схеми вакцинації батьківського стада. Якщо батьківське стадо не вакциновано інактивованою вакциною або ви не маєте інформації про схему вакцинації батьків, відбір крові слід провести з першого до четвертого дня життя. У разі використання інактивованої вакцини для птиці батьківського стада відбір сироватки крові у курчат може бути на четвертий - сьомий день.
Результатирозрахунку дня вакцинації залежить від тест-системи, де визначається вихідний титр материнських антитіл. Ця тест-система була обрана розробником з доступних комерційних тест-систем з низки об'єктивних причин. За допомогою тест-системи IDEXX було визначено постійні величини, що використовуються у формулі (період напіврозпаду, цільовий титр материнських антитіл). Достовірність цих параметрів була підтверджена реакції нейтралізації. Оскільки формула Девентер адаптована лише для IDEXX тест-системи, то використання інших тест-систем не рекомендовано без попередніх наукових досліджень та порівняння отриманих результатів із «золотим стандартом» (1).
Практичне застосування Тактику розрахунку дня вакцинації можна розглянути на прикладі. Визначення термінів входження з вакциною проводили для чотириденних курчат кросу Хай Лайн (комерційне стадо). З огляду на епізоотичну ситуацію в господарстві було прийнято рішення проводити вакцинацію середньою плюс вакциною.
1-й етап.Визначення константних величин, які будуть використані у формулі Девентер. Інформація про досліджений стад та про використовувану вакцину дає нам три показники, які можна вводити у формулу: • ПП= 5.0 (період напіврозпаду для комерційної несушки); • ЦТ=500 (цільовий титр материнських антитіл для середньої плюс вакцини); • В= 4 (вік птиці під час взяття крові)
2-й етап.Визначення вихідного титру материнських антитіл (ІТ). Вихідний титр можна визначити, досліджуючи сироватки крові курчат в імуноферментному аналізі. У нашому випадку лікар господарства направив сироватки крові від одного стада до двох різних лабораторій, де було проведено дослідження з використанням двох доступних тест-систем IDEXX і BioСhek.
Результати цихдосліджень у вигляді гістограм були наступні (Результати досліджень для інтерпретації були направлені до Центру сучасної діагностики, де зберігаються їх оригінали. У статті відтворені гістограми на підставі реальних даних).
3-й етап.Оцінка гістограми. Зовнішній вигляд і структура гістограми необхідні визначення щонайменше двох параметрів: кратності вакцинації та відсотка охоплення птиці вакцинацією.
Кратність вакцинацій залежить від однорідності рівня антитіл (%CV). Якщо %CV нижче 35%, рівень вважається однорідним, і це дає підставу щодо однієї вакцинації. Якщо %CV вище 40% – рекомендують проводити дві, а іноді й три вакцинації.
Після встановлення кратності застосування вакцини визначають, який відсоток стада повинен бути охоплений першою вакцинацією та за необхідності – другою. Генеральний підхід щодо відсотка охоплення птиці вакцинацією наступний: одноразову вакцинацію проводять, коли 70-80% стада досягає цільового титру (ЦТ). При дворазовій схемі вакцинації перше входження з вакциною здійснюють, коли 10-30% стада мають цільовий титр, друге - коли 75-100% досягають його.
У прикладі результати, отримані різних тест-системах, були діаметрально протилежними. Результати з використанням IDEXX тест-системи вказували на проведення одноразової вакцинації (%СV=9,1). Результати, отримані на BioСhek, свідчили необхідність проведення двох вакцинацій (%СV=47). Такі результати провокують появу справедливого питання: Яка гістограма відбиває реальну ситуацію у стаді? Яким результатам вірити?
4-й етап.Визначення термінів вакцинації для різних груп птиці з досліджуваного стада. Для кращої наочності всі титри,отримані в ході дослідження слід розташувати в порядку зростання від мінімального до максимального. Потім кожен вихідний титр виразити у вигляді його логарифму з основою 2 (log2 ІТ) (1). Маючи всі необхідні дані, тепер можна розрахувати день входження з вакциною для кожної групи (сироватки крові), використовуючи вказану вище формулу.
У запропонованому прикладі виявилося, що відрізнявся як зовнішній вигляд гістограм. Вихідний титр (ключовий параметр формули Девентер) у різних тест-системах був різним: при використанні тест-системи фірми BioСhek він перевищував у два – чотири рази аналогічний показник, отриманий на тест-системі IDEXX (табл. 1).
Табл. 1. Розрахункові терміни вакцинації курчат одного стада, засновані на дослідженнях із застосуванням різних тест-систем
Оскільки у різних тест-системах було отримано різні вихідні титри, а формула розрахунку термінів вакцинації – одна, те й розрахунковий день вакцинації принципово відрізнявся.
За результатами, отриманими з використанням IDEXX тест-системи, 75% стада досягнуть цільового титру до 23 дня життя. Розрахунковий термін вакцинації – 23 день життя. За результатами BioСhek 20% стада досягне цільового титру до 26-го дня життя, 90% стада досягне цільового титру до 33-го дня. Розрахункові терміни вакцинації: перша вакцинація на 26-й день, друга вакцинація на 33-й день.
Усі постійні величини формули Девентер (період напіврозпаду, цільовий титр) отримані під час дослідження на тест-системі IDEXX. Логічно, як і змінний показник формули, вихідний титр, слід визначати у тій самій тест-системі.
IDEXX і BioСhek не є аналогами і механічне перенесення параметрів, що підходять тільки для IDEXX, може призвести до непоправних наслідків. Господарстворизикує, вводячи у формулу свідомо завищені чи занижені дані. Те, що титри в реакції на BioСhek тест-системі вищі, ніж на IDEXX, неодноразово публікувалося (2) та підтверджувалося у міжнародних кругових випробуваннях. Підвищені титри прирікають затягування термінів проведення вакцинації. Так, за результатами IDEXX до 23-го дня життя птах практично всього стада готовий до вакцинації, тоді як за результатами BioСhek до 26-го дня тільки 20-30% птиці готові «прийняти» вакцину і тільки до 31-33-го дня. стадо матиме цільовий титр. Немає гарантії, що за пізніх термінів входження з вакциною польовий вірус не інфікує стадо.
Регулярні невчасні вакцинації можуть призводити до постійного контакту стада з польовим вірусом. Не виключено, що наслідком постійної циркуляції збудника стане посилення його вірулентності. Якщо ви, розраховуючи день вакцинації, не можете вирішити проблему Гамборо, з'ясуйте в лабораторії, яка обслуговує вас, яку тест-систему вона використовує.
Розрахунок дня вакцинації – це винахід, покликаний полегшити життя ветлікаря, оптимізуючи терміни входження з вакциною надійним об'єктивним способом. Але надійним він є лише у тому вигляді, в якому його запропонував розробник.І. О. Собко, директор Центру сучасної діагностики м. Київ (Україна)