Сендай-інфекція та прагрип собак
Парагрип свиней і мишей, що викликається вірусом Сендай, є контагіозною вірусною інфекцією свиней і мишей (особливо в розплідниках), що проявляється ураженням респіраторного тракту.
Вперше хворобу, спричинену вірусом Сендай, діагностували у м. Сендай (Японія) у 1952 р. Повідомлялося про виділення вірусу від людей, свиней, мишей та щурів у Японії, СРСР, Китаї. В Україні вірус Сендай вперше виділила О. Г. Генгросс у 1956 р. у Владивостоці під час спалаху грипоподібного захворювання людей. Є повідомлення про наявність інфекції серед людей та гризунів в Америці та Великій Британії. Вірус Сендай виділено у Болгарії від свиней, де спостерігалася респіраторна хвороба серед поросят віком від 2 до 15 днів. Вірус ідентифікований як парагрипозний 1-го типу та позначений SD-2. Він виявився ідентичним штаму Сендай-960/56, виділеному у Владивостоці.
Найчастіше хворіють підсосні поросята, у яких хвороба протікає гостро та характеризується ураженням респіраторного тракту, пневмоніями. У дорослих тварин спостерігають легкі короткочасні симптоми ураження дихальних шляхів та незначне підвищення температури.
Морфологія та хімічний склад. Вірус Сендай відрізняється від вірусів грипу значним поліморфізмом і більшою величиною віріонів (155-215 нм). Він містить 7 основних поліпептидів: 1 - важкий Р (мол. м. 75000 Д) має нейрамінідазну активність; 2 - глікопротеїн - HANA (мол. м. 67000 Д) має ГА-активністю; 3 - глікопротеїн F (мол. м. 65000Д); 4 - поліпептид NP (мол. м. 60000 Д) - структурний білок нуклеокапсиду; 5 - поліпептид М (мол. м. 35000 Д) - основний внутрішній білок, що має спорідненість як до нуклеокапсиду, так і до оболонки віріону, є аналогом мембранного білка вірусу грипу. Глікопротеїн F виявляють у віріонах,що продукуються різними тканинними культурами, немає його у віріонів, вирощених у КЕ. Глікопротеїн F - попередник глікопротеїну F1 (мол. м. 51000 Д) та F2 (мол. м. 15000 Д), відповідальних за лізис інфікованих клітин. Глікопротеїни HANA та F розташовані у віріоні поверхнево; інші три: - Р (мол. м. 75000 Д), NP (мол. м. 60000 Д) та М (мол. м. 35000 Д) локалізовані всередині віріона. Вірус Сендай - оболонковий вірус, що містить два поверхневі глікопротеїни ГА-нейрамінідазу (HN) і білок злиття (Fo), відповідальний за прикріплення та проникнення вірусної частки в клітинах господаря. За останніми даними, оболонка вірусу Сендай містить два глікопротеїни: білок злиття (БС) та ГА-нейрамінідазу (ГН). Інактивація БС викликає втрату активності злиття та збільшення нейрамінідазної активності. У вірусу Сендай міститься 28% ліпідів, що вище, ніж у вірусу НБ (24%). ЗРНП (S-АГ) цього вірусу, виділеного з інфікованих клітин, вдалося ізолювати і РНК 3-х класів: 18S, 24S та 33S. 18S РНК є транскриптом повного геному. Матрицями для вірусних білків є 18S РНК, які комплементарні віріонної 50S РНК.
Найбільш чутлива інфекційна та гемолітична активність вірусу. При обробці трипсином інфекційність значно знижується, а під впливом ефіру, формаліну та підігріву повністю втрачається. Стійкість ГА японського та владивостокського варіантів до дії трипсину різна. ГА штамів владивостокського варіанта резистентні до цього ферменту навіть за концентрації його 2,5 мг/мл, тоді як ГА обох варіантів повністю руйнується під впливом трипсину концентрації 1 — 1,5 мг/мл. Болгарська шт. SD-2 чутливіший до дії трипсину, ніж шт. Сендай-960/56. Обидва вони однаково чутливі до дії ефіру та резистентні до дії ефірудії 5-йод-2-дезоксіурідіна.
Інфекційність ліофілізованого вірусу руйнується за 80 °С. Гемолітичні властивості, що зростали вдвічі при заморожуванні-висушуванні, збільшуються в 5 разів при прогріванні до 100 °С, але руйнуються повністю при 130 °С. ГА зберігається під час прогрівання до 130 °С, але руйнується при 150 °С. Найбільш стабільна нейрамінідаза, її активність знижується лише за 130 °С і руйнується при 160 °С.
У складі капсиду вірусу Сендай, культивованого на ХАО КЕ, знайдено чотири АГ господаря: видоспецифічний, гетерогенний АГ Форсмана, групові АГ А та Н. При культивуванні на клітинах СОЦ виявлено три АГ: виукраінспецифічний та групові В2 та Н. АГ з його ГА-фракцією (V-АГ). У S-АГ їх немає.
Антигенна варіабельність і спорідненість. Чітка АГ-відмінність між варіантами вірусу Сендай виявлено в РДП, у перехресних РТГА з нативними та виснаженими сироватками. У РСК у різних штамів обох варіантів встановлено ідентичність загального внутрішнього S-АГ. Парагрипозний вірус Сендай має пряму антигенну спорідненість з парагрипозним вірусом людини типу 1-НА2. Ця спорідненість найбільш виразно проявляється в РСК і менш чітко в РТГА або РН. Крім того, встановлено наявність різного АГ-зв'язку між вірусом Сендай та збудниками епідимічного паротиту та НБ.
Вірус Сендай може аглютинувати еритроцити: людини (0 групи), курки, морської свинки, хом'яка, білої миші, барана, щура, голуба, мавпи, корови, свині, кролика при 22 і 37,5 ° С і не аглютинує еритроцити. У вірусу Сендай виявлено шипики двох різних типів. Шипики першого типу не мають ні ГА-, ні нейрамінідазної активності (HANA - шипики). Вони містяться глікопротеїди VP4 (мол. м. 51000 Д) і SCP (мол. м. 15000 Д). Шипики2-го типу мають ГА - і нейрамінідазну активність (HANA + - шипики). Вони містять глікопротеїн VP2 (мол. м. 67000 Д). Виявилося, що шипики необхідні для забезпечення гемолізуючої та симпластоутворюючої активності вірусу, процесу злиття оболонок та для інфекційності віріонів.
До літичної дії вірусу Сендай найбільш чутливі еритроцити миші та морської свинки, менш чутливі – еритроцити кролика. Встановлено різну гемолітичну активність у штамів владивостокського та японського варіантів за рівнем аглютинації еритроцитів барана в умовах кімнатної температури (22 °С).
Локалізація вірусу, вірусоносійство та вірусовиділення. Детально не вивчено. Вірус виділяли зі слизових оболонок носової порожнини, з трахеї та легень.Експериментальна інфекція. Експериментальних умовах заражали підсосних поросят, мишей, білих щурів, хом'яків, морських свинок, у яких відзначали грипоподібну інфекцію з ураженням органів дихання. При інтраназальному введенні білим мишам він спричиняє локальну або зливну геморагічну пневмонію з десквамацією епітелію бронхів, а нерідко зі смертельними наслідками. При цьому вірус не тільки розмножується в легенях, а й виявляється в крові, м'язі серця, печінки та мозку. При інфікуванні морських свинок вірусом Сендай відзначено його розмноження, проте парагрипозні віруси людини в організмі цих тварин не розмножуються. У поросят, експериментально інфікованих у віці 2 днів, виявлено сезонну десквамативну пневмонію з осередками перибронхеального та інтралобулярного некрозу.
У бронхіальних клітинах виявлено трипсиноподібну протеазу, яка активує F глікопротеїн вірусу Сендай. Виділено мутант вірусу, що активується протеазою TR, у якого F був стійкий до трипсину, але активувався хі-мотрипсину in vitro. При інфікуванні мишей хімотрипсин-активованим TR зростання вірусу обмежено одним циклом, і вірус не викликав пневмонії. Виявили заміну Fry-116 на 11е-116 F білку мутанта в порівнянні з диким типом. Таким чином, показана можливість застосування TR-мутанта як сильнодіючої вакцини. На курах-несучках вивчено реакцію на імунізацію частково очищеним ВС, який був розмножений у курячих ембріонах. Величини титрів специфічних антитіл до НД коливалися в межах 13-15 log2 протягом 4 місяців після імунізації, концентрація IgG варіювала від 2,7 до 3,5 мг/мл яєчного жовтка. Виділення IgG з яєчного жовтка здійснювали за допомогою «дорозведеного» методу і порівнювали з іншими методами (ПЕГ-6000, хлороформ) по виходу IgG, вмісту загального білка, концентрації IgG, специфічної активності IgG. У зразках IgG виділено за допомогою хлороформу концентрація загального білка та IgG, отриманий із застосуванням ПЕГ-6000 та хлороформу, мав специфічну активність у 1,3 рази вище, ніж у зразках, виділених «водорозведеним» методом. У зразках IgG були відсутні антитіла до білків курячого ембріона.
Культивування. Всі штами вірусу Сендай розмножуються в 10-12-денних КЕ при зараженні як в алантоїсну, так і в амніотичну порожнину. Вірус накопичується до 107-109 ЕІДбо/мл, маючи високий ГА-титр. Ембріони не гинуть протягом 48-96 год. Інокуляція вірусу, адаптованого до білих мишей та КЕ, у жовтковий мішок викликає загибель КЕ протягом 48 годин після зараження.
Джерела та шляхи поширення інфекції. Джерелом інфекції - хворі та перехворілі тварини. Інфекція передається при контакті хворих тварин зі здоровими повітряно-краплинним шляхом. Основним господарем вірусу, мабуть, є мишоподібні гризуни. Циркуляція його у білихмишей віваріїв та розплідників вперше встановлена в Японії, потім Китаї та СРСР. Вірус також був виявлений у морських свинок, білих щурів, хом'яків та у домашніх свиней. В одних тварин інфекція протікала як легкої респіраторної хвороби, в інших — як безсимптомного носительства. Присутність AT до вірусу Сендай у крові телят, собак, морських свинок та хом'ячків, хоча у невеликому відсотку (6,4—6,8 %), свідчить про поширення вірусу серед тварин.
Даних про тривалість та напруженість постінфекційного імунітету немає. Немає також даних про специфічну профілактику.
Віукраїн містить екстраембріональна рідина володіє ГА-активністю в титрі до 1:128. Підшкірне та внутрішньом'язове введення вірусу не викликає захворювання. При введенні вірусу сечові шляхи розвивається цистит.
Для специфічної профілактики запропоновано живу вакцину зі шт. Д-008, що пройшов 20 пасажів у культурі клітин, що перевиваються, нирки собаки.