Спосіб опова імунодіагностики доклінічної стадії злоякісних пухлин
Використання: в біології та медицині, а також для дослідження біологічних матеріалів людини та тварин імунологічними методами. Лімфоцити обстежуваного інкубують дворазово з інтервалом 4 - 18 тижнів з аутологічними гранулоцитами в пропорціях 0,1: 10 - 10: 0,1 і при наступній дворазовій реєстрації зниження кількості контактно взаємодіючих клітин на 53% і більше від показника здорових осіб. Спосіб має високу чутливість і специфічність. Підвищується ефективність та економічність методу імунодоклінічної стадії раку. 1 табл.
Винахід відноситься до біології та медицини, точніше до дослідження біологічних матеріалів людини та тварин імунологічними методами.
Відомий спосіб формування групи ризику із захворюванням раку стравоходу (Довгалюк А.З, Столяров В.І., Семилуцька І.Б. - авт. свід. N 1805392, 1993). Недоліками цього способу є: вузький діагностичний діапазон (тільки рак стравоходу), низька чутливість тесту (32% при раку стравоходу проти 12,3% у здорових осіб), дорожнеча тесту (необхідна наявність антисироваток).
Мета винаходу: підвищення ефективності та економічності способу доклінічної діагностики раку.
Поставлена мета досягається так: З крові загальноприйнятим способом (Д.В.Стефані, Ю.Е.Вельтищев, Клінічна імунологія дитячого віку. М.: Медицина, 1977, с.257) отримують лімфоцити і гранулоцити. Ці клітини в пропорції між собою від 0,1 до 10 або від 10 до 0,1 інкубують в середовищі 199 протягом від 1-2 хв до 3-х год. Ст М. , Довідник методівімунології. Кишинів Штинця, 1992. С.С. 114,129) і фарбують за Романовським-Гімзом.
Під мікроскопом реєструють відсоток лімфоцитів, що приєднали до поверхні гранулоцити. При зниженні цього показника більш ніж на 53% від такого практично здорових осіб, обстеження повторюють з інтервалом від 4 до 18 тижнів. У разі отримання аналогічного результату при повторному обстеженні роблять висновок про доклінічній стадії раку.
Приклад 1. У пацієнта А кількість лімфоцитів, що взаємодіють з аутогранулоцитами, знижена (порівняно зі здоровими особами) при першому обстеженні на 63%, при повторному - на 67%. Ретельне інструментальне та гістологічне обстеження показало наявність раку шлунка in situ.
Приклад 2. У пацієнта Б число лімфоцитів, що взаємодіють з аутогранулоцитами, порівняно зі здоровими особами, знижено при першому обстеженні на 59%, при повторному - на 24. Інструментальне та гістологічне обстеження показало наявність ерозії шийки матки. Результат – у пацієнта Б відсутня доклінічна стадія раку.
За допомогою запропонованого способу було обстежено 55 хворих на рак різних стадій захворювання. У 16 пацієнтів діагностовано рак молочної залози, у 15 – рак матки, у 13 – рак різних відділів шлунково-кишкового тракту (шлунка або кишечника). У 11 обстежуваних пацієнтів було встановлено діагноз: рак in situ (нульова, доклінічна стадія раку) шлунка, шийки матки.
Примітка: n - кількість обстежуваних групи.
Отже, зниження взаємодії лімфоцитів з аутогранулоцитами (пропонованим способом) на доклінічній стадії раку в 6,9 разів перевищує таке у здорових осіб, що свідчить про високу специфічність методу. Дворазове обстеження (з інтервалом 4-18 тижнів) знизило числопозитивних результатів у здорових осіб до 5, а відсоток позитивних результатів – до 5,8%.
Перевищення відсотка позитивних результатів пропонованим способом перевищило при цьому відсоток позитивних результатів у здорових осіб в 15,5 разів. Метод, що використовується як прототип, давав позитивний результат при раку в 32% і у здорових осіб - в 12,37; перевищення відсотка позитивних результатів при раку порівняно з контрольною групою складено всього 2,5 рази.
Таким чином, пропонований спосіб має високу чутливість і специфічність і може бути використаний для доклінічної діагностики раку різних локалізацій.
Спосіб імунодіагностики доклінічної стадії раку, що включає дослідження лімфоцитів, який відрізняється тим, що лімфоцити інкубують дворазово (з інтервалом 4 - 18 тижнів) з аутологічним гранулоцитами (у пропорціях 0,1 : 10 - 10 : 0,1) контактно взаємодіючих клітин на 53% і більше показника здорових осіб ставлять діагноз раку.