Спосіб визначення активності моноаміноксидази
0 П І С А Н І Е 4О5О72
ДО АВТОРСЬКИМ СВІДЧЕННЯМ
Залежне від авт. свідоцтва №
М. Кл. 6 OIn 33/16
Заявлено 15.11.1972 (№ 1744101/31-16) із приєднанням заявки №
Опубліковано 22.Х.1973. Бюлетень №44
Ради Міністрів СРСР у справах винаходів та відкриттів
УДК 612.015.1(088.8) Автор винаходу
А. І. Балаклієвський
Білоукраїнський науково-дослідний санітарно-гігієнічний інститут
СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ АКТИВНОСТІ
0 + інь + Н202 сов М4 мАо н,о;- о, який в кислому середовищі піддають взаємо- 10 відповідний гідрофобпий гідразоп (будівлі з надлишком 2,4-динитрофенилгидра- рого кольору) зина, при цьому утворюється і кристалізується
Nl02 тель (ацетон, етанол, н.-бу анод та інші) .
При цьому утворюється хромофор малиново-рожевого кольору. Інтенсивність фарбування хромофора вимірюють на фотоелектроколориметрі
Після центрифугування гідразоп випадає в осад.
Осад гідразону в лужному середовищі екстрагують в полярний органічний розчин.
Відомий спосіб визначення активності моноаміноксидази (з використанням субстрату бензиламіну), заснований на спектрофотометрическом визначенні при Х
250 нм кількості циклічного хромофора, що утворюється при взаємодії препарату реакції бензальдегіду з циклогексаном.
Недоліком такого способу є нестабільність одержуваних результатів, а також щодо це висока чутливість.
З метою підвищення; чутливості та специфічності способу хімічну обробку бензальдегіду проводять 2,4-динітрофенілгндразином у кислому середовищі.
приклад. З бензиламіну в забуференому середовищі інкубації в присутності мопоаміноксидази (МАО)отримують бензальдегід
Упорядник С. Щеньова
Редактор Н. Спірідонова Техред Л. Богданова Коректор Л. Орлова
Замовлення 175!/12 Вид, Хо 1307 Тираж 743 Передплатне
ЦНДІПД Державного комітету Ради Міністрів СРСР у справах винаходів та відкриттів
Москва, Ж-35, Рауська наб., д. 4/5
Друкарня, пр. Сапунова, 2 (ФЕК) або спектрофотометр при 3, = 460 ммк; вона і є мірою активності іоноаміноксидази в біологічному матеріалі.
Пропонований спосіб має високу чутливість1о: молярний коефіцієнт екстинції хромофора вЂ" 2,4-динітрофенілгідразону бензальдегіду дорівнює 23700 М)(см (при 1=460 ммк), що набагато перевищує коефіцієнт екстинції як самого бензальдегіду (13000 М вЂ" =-242 ммк), і інших хромофорів, які у відомих спектрофотометрических методах визначення МАО.
Спосіб визначення активності моноаміноксидази, що полягає в тому, що в пробу додають бензиламін, з подальшим перетворенням бензальдегіду в хромофор і спектрофотометруванням, відмінний тим, що, з метою підвищення чутливості і специфічності способу, обробку 4-динітрофенілгідразин в кислому середовищі.