Способи консервації органів та тканин для приготування музейних макропрепаратів
Способи консервації органів та тканин для приготування музейних макропрепаратів..doc
Збереження органів та тканин після розтину трупів тварин передбачає різні цілі. Органи та тканини, що мають патологічні зміни, зберігають для уточнення патологоанатомічного діагнозу, а також при провадженні судово-ветеринарної експертизи як речовий доказ. З органів та тканин, взятих при розтині трупів, готують патологоанатомічні препарати для навчальних та наукових цілей.
Приміщення або кімната, де зберігаються консервовані органи та тканини після розтину, називається патологоанатомічним музеєм. Такі музеї є при великих патологоанатомічних кафедрах та науково-дослідних установах. Для збереження цілого трупа, його окремих частин чи органів запропоновано велику кількість методів. Застосування того чи іншого з них методів залежить від мети передбачуваного консервування, технічних можливостей та наявних матеріалів, обладнання, хімікатів.
Короткочасне збереження трупного матеріалу, частин трупа чи трупа загалом можна досягти шляхом заморожування. Тривалість зберігання залежить від температури, ступеня проморожування та розмірів трупа. Потрібно врахувати, що за недостатньо низької температури глибоке проморожування трупа неможливе і внутрішні органи трупа піддаються аутолітичним процесам.
У теплу пору року можна вдатися до збереження трупа методом бальзамування. Для цього в природні порожнини організму (грудну, черевну, черепну) вводять 10% водний розчин формаліну, до якого для попередження швидкого висихання можна додати 10 - 30% гліцерину. До цього методу збереження трупа вдаються для збереження трупа до проведення розтину та інших діагностичних та науковихдосліджень.
Збереження органів прокуратури та тканин, взятих від трупа, виготовлення їх навчальних і виставкових препаратів, і навіть препаратів судово ветеринарного і наукового характеру, виконується частіше методом консервування. Матеріал для приготування препаратів слід брати якнайшвидше після загибелі або забою тварини, оскільки чим довше лежить труп, тим гірше зберігається картина патологічного процесу (особливо швидко змінюється колір тканин), тим важче відновити природний колір тканин.
За способом виготовлення патологоанатомічні препарати можуть бути сухі та вологі. Сухі препарати виготовляють висушуванням підготовлених органів (муміфікація). При вологому способі консервування проводиться шляхом збереження препаратів у рідинах, що фіксують. Однак при будь-якому способі виготовлення препаратів слід прагнути зберегти природне забарвлення органів і тканин.
Виготовлення сухих препаратів
Сухі препарати краще виготовляти з органів або частин тіла, що мають шкірний покрив, тверді тканини, кістки, і мало м'яких тканин (голова, кінцівки та ін.), щоб уникнути великої деформації органу. Для цього орган фіксують через проміжки часу, достатні для повного просочування тканин (чим більше величина фіксованого органу, тим довше відбувається фіксація) послідовно в 3, 5, 7, 10 %-них розчинах формаліну, поступово додаючи в фіксуючий розчин концентрований формалін, 10 %-ний формалін можна замінити будь-якою фіксуючою рідиною №1 для приготування мокрих макропрепаратів. Термін фіксації – до повного ущільнення органу. Після фіксації орган встановлюють на підставку і висушують у приміщенні, що провітрюється, до повного висихання.
Таким чином, можна виготовити препарат із цілого трупа тварини (муміфікація).Для цього витягають внутрішні органи з черевної, грудної, ротової порожнин, витягують трахею і стравохід через невеликий розріз на черевній стінці білої лінії. З очних ям витягають очі, і через дно очниці, просвердливши отвір, витягають головний мозок. Потім тварині надають природне становище, в якому воно буде надалі. У цьому положенні проводять тривалу фіксацію в 10%-му формаліні або фіксуючої рідини №1. Після ущільнення препарат висушують на підставці. При зберіганні у музеї препарат потрібно оберігати від молі.
Тонкостінні органи (частіше порожнинні: кишечник, шлунок, стравохід та ін) також зберігати в сухому вигляді (метод Г. В. Шора). Спочатку ці органи обробляють так само, як і за вологого способу зберігання. Фіксують, відновлюють колір, переносять у рідину, що консервує (розчин III) і зберігають не більше двох тижнів. Потім підсушують на повітрі у зваженому стані (надлишки вологи видаляють гігроскопічною ватою або бавовняною матерією). На поверхню сухого препарату наносять тонким шаром агар розплавлений і дають охолонути. З органічного або звичайного скла роблять камеру за розміром органу, краї її ретельно зашпаровують Менделєєвської замазкою. Щоб не конденсувалася волога, поміщають у куток камери на ватці палену магнезію.
Патологоанатомічні препарати з органів і тканин роблять у вигляді пластинок (пластинчастий метод Талалаєва) і укладають у желатину або агар-агар. Використовуючи цей метод, особливо хороші препарати, одержують зі шкіри, сальника, судин. З консервуючої рідини беруть орган і вирізають пластинку товщиною 1-1,5 см. Підсушують на повітрі. Зі скла (органічного або звичайного) готують коробочки висотою до 2 см з таким розрахунком, щоб у них поміщалася вирізана пластинка з органа. В цюкоробочку (форму) наливають розплавлений желатин або агар-агар, відразу кладуть платівку з органу і щільно притискають до скла дна коробочки. Охолоджуючи, агар-агар або желатин стискуються, тому в камеру в міру їх остигання доливають ці реактиви. Повне ущільнення середовища відбувається через 24-36 год, що залежить від температури та вологості навколишнього середовища. Для виготовлення коробочок найкраще користуватися фотографічними платівками (вони мають стандартні розміри різної величини і виготовлені з високоякісного скла). З них вирізають і бічні пластики. Краї та кришки склеюють менделєєвською замазкою або технічним клеєм.
Приготування желатину. У 500 мл дистильованої води поміщають 180 г желатину, дають йому набухати протягом 2-3 днів, потім нагрівають до розплавлення. До розчину послідовно додають 800 мл гліцерину, 350 мл насиченого при нагріванні розчину оцтовокислого калію або натрію та розплавлений хімічно чистий карболової кислоти з розрахунку 1:500. Кип'ятять у водяній бані і фільтрують через марлю, прошаровану гігроскопічною ватою.
Приготування агар-агар. До 500 мл дистильованої води додають 15 г дрібно нарізаного агар-агару, дають набухати 2-3 дні та нагрівають до повного розчинення. До розчину додають 90 г 50% водного розчину оцтовокислого калію або натрію, 200 мл гліцерину і розплавленої хімічно чистої карболової кислоти з розрахунку 1:500, фільтрують так само, як і желатин.
В анатомічному музеї Московської академії ветеринарної медицини та біотехнології ім. К.А. Скрябіна широко застосовується спосіб сублімаційного сушіння проморожених органів у зимовий період. Для цього орган фіксують також як і за інших методів збереження препаратів. Препарат встановлюють на підставку, заморожують на морозі та поміщають утемне приміщення, що провітрюється з негативною температурою (наприклад, горище). У такому вигляді препарату дають висохнути протягом зимового періоду. Завдяки цьому методу можна готувати препарати з м'яких тканин без зайвої деформації та зменшення об'єму.
Виготовлення вологих препаратів
У практичних умовах найбільш поширеними є вологі методи збереження органів та окремих тканин (частин) трупа тварини в консервуючих рідинах, як надійніші для збереження природного забарвлення.
Виготовлення вологих патологоанатомічних препаратів складається з низки етапів:
- відбір матеріалу та підготовка його до фіксації;
- фіксація; відновлення кольору;
- Консервування (просочування гліцеринової сумішшю);
Для фіксації, відновлення кольору та консервування патологоанатомічного матеріалу запропоновано кілька прописів розчинів. З них найбільше практичне значення мають рідини Кайзерлінга, Мельникова-Розведёнкова та Піка.