Вірус TРT – прихована загроза для будь-якого птахівничого господарства
Маркос Бентуе, Доктор ветеринарних наук Керівник відділу технічної підтримки птахівництва компанії «Лабораторіос Хіпра С.А.» - (Іспанія)
ВСТУП Протягом 40 років інтенсивного виробництва свійської птиці ми можемо пишатися досягненням безперервного підвищення продуктивності, яке є недосяжним для інших галузей м'ясної індустрії. Розвиток систем утримання, удосконалення генетичного потенціалу та прогрес науки про годівлю – головні причини цього екстраординарного розвитку.
Однак є деякі умови, які мають відповідати новим вимогам інтенсивного птахівництва. Часто системи вентиляції не забезпечують потреби птиці в кисні. Вища потреба у кисні швидкозростаючих бройлерів який завжди може бути забезпечена роботою дихальної системи.
Це фізіологічне обмеження робить респіраторні захворювання найпоширенішими проблемами на птахофабриках. Часта поява респіраторних синдромів та захворювань зі складною етіологією підтверджує, що мінімальний стрес або порушення технології утримання повинні розглядатися як потенційна причина захворювань та, отже, економічних втрат.
При аналізі ситуацій, що призводить до патології дихальної системи, потрібно розглядати ряд основних факторів: присутність повністю або частково патогенних респіраторних вірусів, висока концентрація секундарної мікрофлори, зазвичай бактерій, будь-який вид порушення технології вмісту та імунодепресивний фактор.
Колібаетеріоз, хронічний респіраторний синдром, синдром опухлої голови та полісерозит нез'ясованої етіології є одними з найчастіших проблем, поширених на птахофабриках у цей час.
При вивченні синдрому опухлої голови було доведено,що вірус ринотрахеїту індичок (TRT) є первинним збудником даної патології. Його реплікація в присутності вторинних агентів і на тлі несприятливих умов утримання призводить до розвитку клінічних ознак, тому що вірус TRT має тропність до верхніх дихальних шляхів. Це є ключем до розуміння патогенезу вірусу ринотрахеїту. Секундарна мікрофлора, Escherichia coli, Pasteurella, Ornithobacterium rhinotracheale (ГРТ), М. gallisepticum та інші патогени часто виділяють у бройлерів, інфікованих вірусом ТРТ у польових умовах.
БУДОВА ВІРУСА Вірус TRT – пневмовірус відноситься до сімейства Paramyxoviridae, але у нього відсутня нейрамінідаза і він не має гемагглютинуючої активності. Цим можна пояснити низьку смертність, що викликає вірус TRT проти іншими членами сімейства. Геном цього вірусу має деякі особливості, які пояснюють властивості його патогенності. Одноланцюжкова РНК, що містить 9 фрагментів, кодує послідовність амінокислот для різних структурних та функціональних білків. Сьогодні ми маємо глибші знання про вірусний геном завдяки його повному сиквенированию. Найважливіші поліпептиди - глікопротеїн G, відповідальний за прикріплення вірусу до клітини, та білок типу F, який забезпечує злиття вірусу з оболонкою клітини та проникнення в неї, а також проникнення вірусу із заражених клітин у сусідні здорові. Цей факт збільшує передачу вірусу серед сусідніх клітин. Білок М утворює внутрішній шар оболонки -матрикс вірусу. Білок N, тісно пов'язаний з нуклеопротеїновим комплексом, L та P білки беруть участь в утворенні вірусної транскриптази. Білки N, L та P протеїни щільно пов'язані з РНК і формують нуклеокапсид вірусу. Імунологічно, найважливіші білки, це G і F, на якихтепер концентрують основну увагу під час досліджень.
Діаграма структури поліпептидів вірусу TRT
Існують три антигенні типи, які в даний час ідентифікують: A, B і С. Префікс A або B залежить від країни, і C (Колорадський штам) поширений тільки в Сполучених Штатах.
Нещодавно виявлене поширення вірусу серед інших видів птахів відкриває нові дебати з епізоотології інфекції TRT. Після досліджень було доведено, що деякі популяції фазанів, цесарок, гусей, горобців, голубів та інших диких птахів були позитивними у ПЛР або мали специфічні антитіла до вірусу TRT.
ЩО МАЄ ЗНАЧЕННЯ? Вірус TRT не викликає такої летальності як вірус ньюкаслської хвороби або вірус грипу, але все одно має суттєву економічну та патологічну важливість у сучасному птахівництві. Його реплікація в клітинах верхніх дихальних шляхів, головним чином носових ходах, трахеї, кон'юнктиві і носових синусах ушкоджує забезпечені віями клітини і порушує ефективність цього механічного захисного бар'єру, відкриваючи ворота вторинним інфекціям. Найчастіші клінічні ознаки – носові та очні закінчення, чхання та респіраторний синдром. Серед симптомів найпоширенішим можна назвати так званий синдром опухлої голови. Також було доведено, що реплікація вірусу в легеневій тканині може викликати пневмонію. Спалах вірусу може підвищувати захворюваність до 100%. Смертність може досягти 30% залежно від вторинних інфекцій. Насамперед, найголовніша особливість – здатність паралізувати діяльність вій епітеліальної тканини (фотографія 1), перешкоджаючи важливої функції очищення цих органів. Цей очевидний факт різко збільшує сприйнятливість до патогенних мікроорганізмів (фото 1) принесприятливі умови утримання птиці.
Фото 1.TРT вірус (помаранчеве забарвлення), що реплікується в епітелії носових проходів (стрептавідин - біотин - імунопероксидазна методика) (IP).
Мал. 1. З 250 бактеріальних ізолятів, виділених при різних респіраторних патологіях, в середньому 70,37% птахів було позитивно до вірусу TRT. Тест проводився методом ІФА з використанням набору CIVTEST AVI TRT, (зворотний ELISA метод). Ці дані вказують на те, що вірус TRT може посилювати дію бактерій, полегшуючи їх проникнення та розмноження. Зокрема, у випадку з мікоплазмою, що викликає клінічну картину, ця залежність була найбільш виражена - 95,24 % птахів, у яких була виділена мікоплазма, були позитивними до вірусу TRT.
НЕБЕЗПЕЧНІ НАСЛІДКИ Як уже згадувалося, основними клінічними ознаками є запалення трахеї та носових ходів, очної кон'юнктиви та носових синусів, задишка, чхання, опухлі пазухи та інші неспецифічні респіраторні симптоми. У господарствах бройлерів, що мають батьківське поголів'я, інфекція викликає серйозне зниження виробничих показників до 30 %, а також зміна забарвлення шкаралупи яйця до коричневого кольору через реплікацію вірусу в яйцеводі. Симптоми ураження нервової системи можуть спостерігатися у 1% поголів'я. Побічно викликають легшу колонізацію дихальних шляхів бактеріями такі чинники як пил, аміак, не відрегульована вологість чи погана вентиляція. Серйозність економічних наслідків безпосередньо залежить від епізоотичної ситуації в регіоні та рівня вторинної мікрофлори у господарстві.
ДІАГНОСТИЧНІ МЕТОДИ Точний діагноз не можна поставити тільки на підставі клінічних ознак, тому має проводитисядиференційна діагностика лабораторними методами Ізоляція вірусу є складною, оскільки його часто неможливо виділити від птахів, які мають клінічні ознаки. Бажано брати зразки від птахів на ранніх стадіях інфекції та без клінічних ознак. Класичні методи виділення вірусу на курячих ембріонах не дають ефекту, тому що вірус культивується краще на первинних культурах органів індичок та курей, ідеально на культурі трахеї. Параліч вій відзначається через 4 - 8 днів після зараження зразків. Для діагностики вірусу використовують серологічні реакції: нейтралізації, імунофлюоресценції, ІФА. Методи молекулярної біології, такі як ПЛР, відкривають нові можливості для діагностики вірусу.
Що стосується будь-якого захворювання, то стратегія профілактики повинна бути розроблена з урахуванням багатьох факторів: не тільки первинних і вторинних патогенів, а й умов утримання. Ефективного лікування TRT інфекції не існує. Для контролю вторинної інфекції має застосовуватися обробка антибіотиками, а також необхідно забезпечити оптимальні умови вентиляції для птахів. Вакцинація проти вірусу TRT - найефективніший спосіб профілактики і має проводитися в неблагополучних господарствах. Використання живих атенуйованих та інактивованих вакцин є найкращою схемою вакцинації для захисту материнського поголів'я бройлерів та несушки. Вони найбільш сприйнятливі до ринотрахеїту індиків під час піку яйцекладки, хоча випадки захворювання трапляються у будь-якому віці, таким чином, вакцинація ефективно захищає від прояву клінічних ознак та зниження виробничих показників. Живі вакцини необхідно застосовувати, звертаючи увагу на техніку вакцинації, оскільки, щоб отримати результат, має бути щеплено 100% поголів'я.птахів. Правильний метод застосування дозволить вакцинному вірусу швидко колонізувати дихальні шляхи і рівномірно розподілитися по поголів'ю птахів, створюючи хороший клітинний імунітет і блокувати тим самим проникнення польового вірусу. Місцева дія вакцинного вірусу дуже важлива для досягнення швидкого та ефективного захисту. Найкращі результати досягаються при окуло-назальному застосуванні або застосуванні вакцини методом спрею. При випоюванні з водою спостерігається менша однорідність вакцинації, і значно нижчий місцевий захист. Інактивовані вакцини стимулюють B-лімфоцити, які продукують специфічний Ig G білок проти вірусних антигенів TRT. Гуморальний захист також відіграє найважливішу роль для отримання тривалого імунітету та забезпечення нейтралізації вірусу. Коли жива вакцина передує інактивованій вакцині, імунна відповідь досягає вищого рівня, ніж при застосуванні лише інактивованих вакцин. При проведенні вакцинації за тиждень до вакцинації та тиждень після щеплення живим вірусом TRT не слід застосовувати живі вакцини з тропізмом до дихальних шляхів. Виділення інтерферону та конкуренція вірусів можуть сильно знизити дію вакцинного вірусу та погіршити якість імунізації птахів. Щеплення бройлерів у неблагополучних регіонах дає добрі результати. Ми повинні контролювати летальні та імунодепресивні віруси (НБ, ІБК, ІББ, БМ, ІАЦ), які можуть знижувати ефективність вакцинації TRT. Найпоширеніша схема вакцинації бройлерів - це одноразова вакцинація живою вакциною, але у деяких областях бройлерів щеплюють двічі залежно від епізоотичної ситуації з ТRТ.
ТЕНДЕНЦІ РОЗВИТКУ Більшість досліджень зосереджена на аналізі змін послідовностей амінокислот деяких ключових генів та їх зв'язкуз патогенністю та імуногенністю вірусу TRT. Як вважають, ген глікопротеїну G регулює відносини «вірус - клітина мета» і, особливо, процес прикріплення вірусу до клітини. Для діагностики були нещодавно розроблені методи ПЛР, за геном F та матричними генами. В даний час більшість зусиль щодо дослідження вірусу TRT зосереджено на діагностиці, вивченні його патогенезу та епідеміології на молекулярному рівні.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ Незважаючи на те, що вперше вірус TRT був виділений багато років тому, у багатьох країнах він ще офіційно не зареєстрований. Важливість цього захворювання полягає в тому, що вірус має специфічний тропізм до війчастого епітелію дихальних і репродуктивних органів. Разом з вірусом TRT, бактерії та інша патогенна мікрофлора можуть легше проникати в дихальні шляхи та репродуктивні органи птахів, викликаючи зниження виробничих показників, порушення нормальної роботи дихальної системи та неспецифічні клінічні ознаки. Разом з дотриманням правил біозахисту, хорошими умовами утримання та контролем гігієни, повинна застосовуватися надійна схема вакцинації, що комбінує живу та інактивовану вакцину. Повинна бути використана правильна техніка вакцинації, щоб гарантувати успіх імунізації, оскільки місцевий імунітет відіграє істотну роль механізмі захисту. Інформація про особливості вірусу TRT дозволяє розробляти ефективні заходи боротьби. Але в той же час необхідні подальші дослідження в діагностиці, патогенності та імунітету для ефективної боротьби з цією непростою інфекцією.