Забарвлення ГОФП-методом (Лі) - Практика гістолога
Обробка теоретичного матеріалу з даного забарвлення проводилася разом із судово-медичним експертом Ю.В. Григор'євої.
Сутність даного методу полягає в фарбуванні основним фуксином саркоплазми ішемізованих кардіоміоцитів в червоно - коричневий колір, на відміну від інтактних жовто-коричневого або блідо-зеленого кольорів. При невеликому проміжку часу від початку кисневого голодування міокард будуть дрібними, що потім зливаються один з одним, з часом і наростанням ішемії міокарда - середньої величини, великими і великими осередками фуксинофільної дегенерації міокарда.
У посібнику «Гістологічна та мікроскопічна техніка» [2] вказується на можливість виявлення ГОФП-методом фуксинофільної дегенерації міокарда (морфологічний прояв найбільш ранніх змін у серцевому м'язі). Сутність цих змін полягає в тому, що в уражених кардіоміоцитах з'являється фуксинофільний субстрат (спочатку поблизу ядра, потім по всій цитоплазмі і поширюється на більшу частину м'язового волокна). а коли м'язові волокна починають дезінтегруватися і розсмоктуватися, фуксинофільний субстрат повністю зникає. Авторами зазначено, що ГОФП — методомпідфарбовуються кардіоміоцити, що мають контрактурні ушкодження та перебувають у перескороченому стані.
Метою роботи ряду експертів гістологічного відділення Самарського ОБСМЕ (Т.Н.Разматова, Е.І.Філіппенкова, Ю.В.Григор'єва, С.В.Кім, Є.А.Єгорова, 2004-2006рр.) стали узагальнення результатів застосування забарвлення зрізів міокарда ГОФП — методом та оцінка його діагностичних можливостей у судово-медичнійпрактике В основу узагальнення покладено експертну практику застосування даного методу. Усього у період 1993-2006г.г. цей метод застосовувався більш ніж у 13.000 випадків гістологічних досліджень з метою виявлення вогнищ гострої ішемічної та метаболічної «пошкодження» кардіоміоцитів.
Секційний матеріал фіксувався в кислому 10%-ному розчині формаліну. Шматочки міокарда заливали до парафіну. Отримані зрізи товщиною 5-10 мкм фарбували гематоксиліном - еозином та ГОФП-методом.
РОЗЧИН А: алюмо-амонійних галунів 6г, гематоксиліну 0,5г, жовтого окису ртуті 0,25г, дистильованої води 70мл. Розчин кип'ятити 10 хв, охолодити, додати 30 мл гліцерину і 4 мл крижаної оцтової кислоти.
РОЗЧИН: 0,1% розчин основного фуксину в дистильованій воді.
РОЗЧИН С: 0,1% розчин пікринової кислоти в абсолютному ацетоні.
Усі маніпуляції проводяться за кімнатної температури. Розчин С та всі промивні рідини змінюються після кожних 5-6 зрізів.