ЗМІНА МОРФОЛОГІЧНОГО СТАНУ ТОНКОГО КИШЕЧНИКА ЩУР В УМОВАХ ХРОНІЧНОЇ ІНТОКСИКАЦІЇ
Серед токсичних елементів, що забруднюють навколишнє середовище, все більшу увагу привертають важкі метали, і в першу чергу свинець, за даними ВООЗ, віднесений до групи токсичних металів I класу небезпеки. Свинець є шкідливим виробничим та несприятливим екологічним фактором, відрізняється високою токсичністю, здатністю вражати життєво важливі органи та системи, серед яких чільне місце займає шлунково-кишковий тракт (ЖКТ) [5; 7].
Метою цього дослідження було вивчення впливу ацетату свинцю на структурно-клітинні зміни стінки тонкого відділу кишечника білих щурів.
Матеріали та методи дослідження
У роботі використовували статевозрілих білих безпородних щурів-самок масою 200-250 р. Експеримент зроблено на 50 тварин. Відповідно до поставлених завдань тварини розбивалися на дві групи. Контрольну групу склали 20 самок, які у загальному режимі віварію. Дослідну групу склали 30 самок, які отримували протягом 14 днів перорально ацетат свинцю в дозі 45 мг/кг/добу.
Тварини забивалися шляхом декапітації під наркозом ефіру з хлороформом з дотриманням принципів гуманності, викладених у директивах Європейського співтовариства (86/609/ЄЕС) та Гельсінської декларації та відповідно до вимог правил проведення робіт з використанням експериментальних тварин.
Для гістологічних досліджень зразки тканин (худої кишки) фіксували в 10%-ному нейтральному формаліні і після відповідного проведення заливали в парафін. Готували гістологічні зрізи товщиною 10-15 мкм, фарбували їх гематоксилін-еозином і досліджували за допомогою мікроскопа MT 4000 SeriesBiologicalMicroscope з програмним забезпеченням для аналізу зображень BioVisionVersion 4.0.
При морфометрії визначали:висоту, площу епітеліоцитів та їх ядер; кількість келихоподібних клітин на ворсину, їх висоту, площа келихоподібних клітин та їх ядер. Вимірювання проводили зі збільшенням 40х10. Роздільна здатність отриманих зображень – 1280 x 1024 пікселів.
Статистична обробка цифрових даних проводилася за допомогою програм FStat та Excel. Перевірка статистичних гіпотез здійснювалася за t-критерієм Стьюдента. Оцінюючи статистичних гіпотез приймалися такі рівні значимості: p≤0,05. Математична обробка результатів морфометричних досліджень проводилася з використанням методу кореляційного аналізу.
Результати дослідження та їх обговорення
В результаті гістологічного дослідження встановлено, що після 14 днів дії ацетату свинцю відбувається посилення повнокров'я капілярів ворсинок слизової оболонки тонкої кишки білих щурів. Відзначено посилення келихоподібними клітинами ворсин секреція слизу та виділення її у просвіті кишечника. Яскраво виражена десквамація епітеліальних клітин, у деяких ділянках спостерігається некроз ворсинок (рис. 1).
Мал. 1. Десквамація епітеліальних клітин ворсинки білих щурів. Забарвлення гематоксилін-еозин. Ув.40х10.
Морфометричні дослідження показали, що в дослідній групі тварин порівняно з контролем відбувається достовірне зменшення висоти, площі епітеліоцитів, площі ядер відповідно на 10,3% (p≤0,05), 37,23% (p≤0,001), 38, 73% (p≤0,001). Також порівняно з контролем відмічено достовірне збільшення кількості келихоподібних клітин у ворсинці на 56,31% (p≤0,001), водночас спостерігалося зменшення висоти, площі бокалоподібних клітин, площі їх ядер відповідно на 11,58% (p≤0, 05), 46,33% (p≤0,05), 59,94% (p≤0,05) (табл. 1, рис. 2, 3).
Таблиця 1 – Морфометричніпоказники слизової тонкого кишечника білих щурів