19. Антитоксини. Застосування антитоксичних сироваток у медицині.
Антитоксин – антитіла, що утворюються в організмі під впливом токсинів бактеріального, рослинного, тваринного походження, здатні нейтралізувати їх ушкоджуючі властивості. Є імуноглобулінами класу G. А. – діючий початок анти-токсинових сироваток, які отримують, імунізуючи тварин знешкодженими токсинами (токсоїдами) або малими дозами нативних токсинів. А. нейтралізують токсини, які ще зв'язалися клітинами організму.
Антитоксичні сироватки – імунопрепарати, що виготовляються з крові імунних людей та тварин та застосовуються для лікування пасивної імунопрофілактики токсинемічних інфекцій (дифтерії, правця, ботулізму, деяких форм стафілококової інфекції та ін.). Лікувальна та профілактична дія А. с. засновано на тому, що містяться в них антитоксини (див.) Створюють пасивний імунітет, який захищає організм від токсичного впливу токсинів з моменту введення до 30 - 40-го дня після введення. А. с. не надають прямої інгібуючої дії на мікроби, що продукують токсини, та їх ендотоксини. Силу А. с. вимірюють у міжнародних од. (ME) або АЕ, що відповідають мінімальній кількості с-ки, що нейтралізує стандартну од. того чи іншого токсину.
20.Аглютинини, реакція аглютинації, її різновиди.
Аглютинін — антитіло, яке виконує реакцію аглютинації клітин крові, бактерій та інших антигенних частинок. Аглютинін розташований у плазмі крові.
Аглютинини мають білкову структуру, аглютинують корпускулярні антигени, а також належать до імуноглобулінів. Альфа- і Бета-Аглютиніни, що є основними аглютинінами, що визначають групову приналежність крові, представлені як імуноглобуліни IgM, рідше як IgG. Їхня реакція як імунна відповідь протікає за принципом"антиген-антитіло".
Реакція аглютинації- проста за постановкою реакція, при якій відбувається зв'язування антитілами корпускулярних антигенів (бактерій, еритроцитів або інших клітин, нерозчинних частинок з адсорбованими на них антигенами, а також макромолекулярних агрегатів). Вона протікає за наявності електролітів, наприклад, при додаванні ізотонічного розчину натрію хлориду.
Застосовуютьсярізні варіанти реакції аглютинації: розгорнута, орієнтовна, непряма та ін. Реакція аглютинації проявляється утворенням пластівців або осаду (клітини, «склеєні» антитілами, що мають два або більше антигензв'язуючих центри — рис. 13.1). РА використовують для:
1)визначення антитілу сироватці крові хворих, наприклад, при бруцельозі (реакції Райта, Хеддельсона), черевному тифі та паратифах (реакція Відаля) та інших інфекційних хворобах;
2)визначення збудника, виділеного від хворого;
3)визначення груп кровіз використанням моноклональних антитіл проти алло-антигенів еритроцитів.
Для визначення у хворого антитілставлятьрозгорнуту реакцію аглютинації:до розведень сироватки крові хворого додають діагностикум (суспіль убитих мікробів,) і через кілька годин інкубації при 37 ˚С відзначають найбільше розведення сироватки (титр сироватки), у якому відбулася аглютинація, т. е. утворився осад.
Характер і швидкість аглютинації залежить від виду антигену і антитіл. Прикладом є особливості взаємодії діагностикумів (О та H-антигенів) зі специфічними антитілами. Реакція аглютинації з О-діагностикумом (бактерії, вбиті нагріванням, що зберегли термостабільний О-антиген) відбувається у вигляді дрібнозернистої аглютинації. Реакція аглютинації зН-діагностикумом (бактерії, убиті формаліном, що зберегли термолабільний джгутиковий Н-антиген) - великобавовняна і протікає швидше.
Якщо необхідно визначити збудник, виділений від хворого, ставлять орієнтовну реакцію аглютинації, застосовуючи діагностичні антитіла (аглютинуючу сироватку), тобто проводять серотипування збудника. Орієнтовну реакцію проводять на предметному склі. До краплі діагностичної аглютинуючої сироватки у розведенні 1:10 або 1:20 додають чисту культуру збудника, виділеного від хворого. Поруч ставлять контроль: замість сироватки наносять краплю розчину хлориду натрію. При появі в краплі з сироваткою і мікробами пластівеподібного осаду ставлять розгорнуту реакцію аглютинації в пробірках з розведеннями аглютинуючої сироватки, що збільшуються, до яких додають по 2-3 краплі суспензії збудника. Аглютинацію враховують за кількістю осаду та ступенем просвітлення рідини. Реакцію вважають позитивною, якщо аглютинація відзначається у розведенні, близькому до титру діагностичної сироватки. Одночасно враховують контролі: сироватка, розведена ізотонічним розчином натрію хлориду, має бути прозорою, завись мікробів у тому ж розчині — рівномірно каламутною, без осаду.
Різні споріднені бактерії можуть аглютинуватися однією і тією ж діагностичною аглютинуючою сироваткою, що ускладнює їх ідентифікацію. Тому користуються адсорбованими аглютинуючими сироватками, з яких видалені перехресно реагують антитіла шляхом адсорбції їх родинними бактеріями. У таких сироватках зберігаються антитіла, специфічні лише до цієї бактерії.