Аналіз ПЛР - переваги, недоліки, показання
Аналіз крові на ПЛР – це найсучасніший метод лабораторного дослідження, що допомагає виявити збудники багатьох інфекційних хвороб. Трилітерний варіант – це скорочена абревіатура, що означає «полімеразна ланцюгова реакція». Саме ця назва методу і відбиває його суть. Пропонуємо докладніше розібратися, що ж являє собою ПЛР-діагностика і в яких випадках вона застосовується?
Принцип роботи
Суть методу аналізу ПЛР полягає у розпізнаванні збудників інфекційних патологій шляхом визначення їхнього генетичного матеріалу (ДНК або РНК) у пробах, взятих у пацієнта. Під час дослідження зразок біологічного матеріалу, в якому, ймовірно, знаходяться ДНК мікроорганізмів, поміщають у спеціальний реактор. Далі до цього зразка додають спеціальні ферменти, які забезпечують зв'язок із ДНК збудника захворювання та здатні синтезувати його копію. Останній процес відбувається за принципом ланцюгової реакції у два етапи: на першому з однієї молекули ДНК утворюються дві нові молекули, а на другому з цих двох молекул утворюються чотири нові, і т.д. Після закінчення кількох циклів реакції синтезу з однієї копії ДНК формуються кілька сотень або навіть тисяч копій. Отриману кількість копій ДНК збудника інфекції можна легко перевірити і порівняти з базою даних, що містить інформацію про структуру ДНК різних мікроорганізмів.
Матеріалом для виконання аналізу методом ПЛР може бути:
- Сироватка крові, плазма, кров.
- Слиз та інші біологічні виділення.
- Сеча (необхідна перша порція сечі, зібрана вранці).
- Зіскрібок епітеліальних клітин (з уретри у жінок і у чоловіків, а також з цервікального каналу).
- Мокрота.
- Біологічні рідини(Суглобова, плевральна, навколоплідна, спинномозкова рідини, сік простати, слина).
- Біопати дванадцятипалої кишки та шлунка.
За допомогою аналізу крові на ПЛР можна діагностувати безліч інфекцій: хелікобактеріоз, гепатит B, C, ВІЛ (СНІД), герпесну інфекцію, туберкульоз, папіломавірусну інфекцію, бактеріальний вагіноз, трихомоніаз, мікоплазмоз, кандидоз, хламідіоз.
Переваги
Безумовно, одна з основних переваг методу — його універсальність. Аналіз ПЛР допомагає виявляти будь-які РНК та ДНК, навіть якщо інші методи залишаються безсилими. Причому обладнання, за допомогою якого проводиться дослідження стандартно і не залежить від того, де саме і що конкретно потрібно знайти.
Ще одна перевага - висока специфічність (досягає 100%). У зразку, спрямованому на аналіз, розпізнається унікальна послідовність нуклеотидів, типова лише конкретного збудника. Крім того, спосіб характеризується високою чутливістю - можна виявити лише одну частину генетичного матеріалу збудника.
Також з допомогою аналізу ПЛР визначають наявність самого мікроорганізму, а чи не реакцію організму з його використання. Таким чином, ще в інкубаційному періоді, коли ніяких лабораторних або клінічних симптомів хвороби не відзначається, з'являється можливість діагностувати захворювання безпомилково.
Головна перевага – це оперативність. Постановка реакції триває всього кілька годин, завдяки чому все дослідження з моменту здачі матеріалу до отримання результату займає всього один день.
Недоліки
Звичайно ПЛР - не ідеальний спосіб, він має і деякі недоліки. Він досить високотехнологічний і вимагає дотримання суворих правил оснащеннялабораторії Так, наприклад, у приміщенні обов'язково має бути встановлений спеціальний фільтр біологічної очистки. Це пояснюється тим, що в повітрі постійно знаходиться неймовірний коктейль із часток ДНК різних живих організмів, і під час підготовки до виконання реакції зразок матеріалу може бути забруднений, а це, своєю чергою, стане причиною «хибного спрацьовування».
Ще одна вада – це негативний результат ПЛР-діагностики навіть за наявності яскраво вираженої клінічної картини. Причиною такого явища може бути неправильно взятий матеріал на дослідження. Зразок повинен брати лише кваліфікований лікар, дотримуючись усіх необхідних інструкцій, які йому виписує лабораторія.
Оцінювати результати аналізу ПЛР також має спеціаліст, який призначає лікування конкретного пацієнта. Справа в тому, що позитивна відповідь далеко не завжди означає наявність патології. Наприклад, хворий пролікувався від будь-якої хвороби, проте захисна система організму ще деякий час «розбиратиме на запчастини» збудник. Якщо в цей період зробити діагностику - результат виявиться позитивним.
Показання до аналізу
Також дуже важливо зробити аналіз ПЛР при вагітності, щоб вчасно виявити та провести лікування можливого захворювання, тим самим запобігши розвитку серйозних ускладнень. Дослідження призначається жінкам з великою кількістю лейкоцитів у мазку та після перенесеного аборту. Найчастіше, аналізПЛР під час вагітності проводять під час постановки на облік. Оскільки ця процедура робиться не у всіх лабораторіях та жіночих консультаціях, то лікар може виписати направлення до приватної клініки.
Аналіз ПЛР – ефективний та потужний діагностичний інструмент, що допомагає швидко та точно виявити збудників багатьох інфекцій. Як правило, його застосовують для діагностики саме хвороб, що передаються статевим шляхом. У жодному разі обмежуватися лише одним методом не можна. Бажано комбінувати різні способи діагностики – крім визначення самого збудника слід враховувати і імунну відповідь організму (визначається серологічними методами дослідження).