Апоптоз клітини
- Цитокіновий дисбаланс (IL-1Ra\NNFa) > 10.
Ці лабораторні критерії разом із клінічними ознаками досить точно визначають ступінь тяжкості ендотоксикозу. Так, середня тяжкість ендотоксикозу має місце при ЛІІ 6,0.
Для хворих з імунодепресією характерний і супутній цитокіновий дисбаланс із значною перевагою імуносупресорних цитокінів, і може розглядатися як додатковий критерій загальної імунодепресії.
Лабораторні критерії загальної імунодепресії є високоінформативними. Однак, якщо у септичних хворих відсутня лімфопенія, то для проведення надійної діагностики необхідне дабораторне забезпечення на рівні сучасного імунологічного аналізу, що передбачає обов'язкове використання:
1) культурального методу бласт-трансформованих мононуклеарних клітин;
2) імуноферментних методів визначення вмісту цитокінів у сироватці та культуральному середовищі;
3) проточної лазерної цитофлюориметрії.
У сукупності ці методи дозволяють оцінювати процеси клітинної проліферації, продукцію цитокінів клітинами, вираженість цитокінового дисбалансу, а також процеси апоптозу в клітинах, які забезпечують механізми імунореактивності.
Алгоритм основних ознак значної дисфункції імунної системи:
1) клінічні прояви інфекційного синдрому (наявність двох та більше критеріїв SIRS);
2) лімфопенія (зниження 9 \л абсолютної кількості лімфоцитів у периферичній крові);
3) зниження (2 стандартних відхилень від нормальних значень);
3) оцінка бактерицидності та здатності до фагоцитозу поліморфноядерних та мононуклеарних лейкоцитів периферичної крові (на більш пізніх стадіях септичного процесу значення обох названихфункціональних параметрів суттєво знижено);
4) оцінка проліферативної та іншої функціональної активності мононуклеарів периферичної крові (мітогеніндукована проліферація лімфоцитів, продукція ІЛ-2 у культурі мононуклеарних клітин у відповідь на мітоген, рівень експресії HLA-DRциркулюючими моноцитами та відносна кількість у периферичній крові-DR моноцитів) при сепсисі всі названі функціональніші характеристики суттєво знижено);
5) Визначення кількості апоптотичних лімфоцитів у периферичній крові та оцінка рівня спонтанного та мітогеніндукованого апоптозу лімфоцитів invitro (при сепсисі істотно зростає кількість апоптотичних лімфоцитів у периферичній крові та значно збільшується рівень активаційного апоптозу лімфоцитів).
Викладений вище алгоритм оцінки вираженості імунних розладів рекомендується для практичного використання у хворих на гнійно-септичну патологію. Ці показники імунного статусу можуть застосовуватися при моніторуванні ефективності терапії.
Виражена лімфопенія, що оцінюється за абсолютною кількістю лімфоцитів у периферичній крові, на тлі лейкоцитозу та паличкоядерного зсуву – абсолютно надійна лабораторна ознака важкої імунодепресії у хворих з гнійно-септичною патологією, що свідчить про розвиток загрозливого життя.
Найважливішим методом постановки діагнозу при сепсисі є мікробіологічне дослідження (мікроскопія та посів) крові, сечі, мокротиння, що відокремлюється з ран, плевральної порожнини, а також тканини гнійного вогнища.
Необхідно проводити не менше 4 парканів крові з інтервалом не менше 20 хв. з периферичної вени (10-20 мл) допризначення антибіотиків. При антибіотикотерапії, що проводиться, її слід перервати на 24 години, після чого здійснити паркан.
Загальновідомо, що навіть у найважчих хворих частота позитивних результатів при посіві крові не перевищує 50%.
Проблема встановлення діагнозу «СЕПСІС»
Бактеріємія не є обов'язковим атрибутом сепсису. Її відсутність має впливати на постановку діагнозу «сепсис» за наявності, зазначених вище, критеріїв сепсису.
Присутність мікроорганізмів у кровотоку в осіб без клініки (SIRS) розцінюється як транзиторна бактеріємія.