Асоційована вакцина проти сибірки та некробактеріозу тварин
Власники патенту UA 2286174:
Винахід відноситься до галузі ветеринарії. Вакцина містить комплексні водорозчинні антигени F.necrophorum, сорбовані на гелі гідрату окису алюмінію, і суспензію спор вакцинного сибіркового штаму «55-ВНИИВВиМ» при наступному співвідношенні цих компонентів (об.%): водорозчинні7. 0; гель гідрату окису алюмінію 20,0-24,0; суспензія спор вакцинного сибіркового штаму 0,8-1,3. Вакцина має високу імуногенність, нешкідливість, ареактогенність та індукує формування рівноцінного напруженого імунітету, що забезпечує захист тварин від зараження культурами вірулентних штамів збудників сибірки та некробактеріозу. 2 табл.
Винахід відноситься до галузі ветеринарії, зокрема до застосування біологічних препаратів для одночасної специфічної профілактики сибірки та некробактеріозу тварин.
В даний час відома вакцина проти сибірки, що представляє собою суспензію живих спір безкапсульного авірулентного вакцинного штаму «55-ВНИИВВиМ» (ОСТ 10-19-002-00 "Вакцина жива зі штаму 55-ВНИИВиВиМ").
За кордоном для профілактики сибірки тварин застосовуються вакцини, виготовлені зі штаму Sterne (34 F2) збудника сибірки.
Відомі також інактивовані вакцини проти некробактеріозу тварин: виготовлена з декількох штамів F. necrophorum - "Вакцина проти некробактеріозу тварин інактивована" (ТУ 938-055-004941-85-95) і "Емульгована вакцина проти некробактеріозу", нагота .Д., Мачахтиров І. «Тваринник» 1998 №7, стор.24-25).
Для специфічної профілактики хвороб кінцівок великогорогатої худоби та овець в даний час застосовується кілька асоційованих препаратів - Нековак, Нековак-стимул, Овікон (Сідорчук А.А., Панасюк С.Д. та ін. «Ветеринарія» 1999 №6, стор.23-27).
Існуючі вакцини використовуються незалежно одна від одної, і їх застосування не може створити імунітет у тварин одночасно проти сибірки та некробактеріозу тварин. Використання цих вакцин окремо вимагає подвоєної кількості трудовитрат (особливо в оленярстві) і надає додатковий стресовий вплив на організм тварин.
Застосування пропонованої асоційованої вакцини проти сибірки та некробактеріозу тварин дозволяє уникнути зазначених недоліків роздільної імунізації.
Метою винаходу є створення асоційованої вакцини проти сибірки і некробактеріозу тварин, що володіє високою імуногенністю, нешкідливістю, ареактогенностью і індукує формування рівноцінного напруженого імунітету, що забезпечує захист тварин від зараження культурами вірулентних штамів збудників сибір.
Зазначена мета досягається змішуванням комплексних водорозчинних антигенів F. necrophorum, сорбованих на гелі гідрату окису алюмінію з суспензією спор вакцинного сибіркового штаму «55-ВНИИВВиМ» з наступним співвідношенням компонентів у вакцині 0, об'ємних. -80, 0; гель гідрату окису алюмінію 20,0-25,0; суспензія спор вакцинного сибіркового штаму 0,8-1,3.
Біологічна активність приготованої таким чином вакцини складає: по сибірковому компоненту 10,0-12,5 млн спор/см 3 , по некробактеріозному компоненту 7,5-10,0 мг/см 3 мікробного білка, що відповідає 1 щеплення в обсязі 2, 0 см 3 .
В результаті проведених експериментів встановлено, що пропонована асоційована вакцина створює імунітет у одноразово щеплених північних оленів та овець через 14-21 день одночасно проти сибірки тривалістю не менше 12 місяців і некробактеріозу - не менше 6 місяців. При цьому за імуногенністю вона не поступається моновакцинам, які застосовуються при цих хворобах.
Ефективність пропонованої асоційованої вакцини перевірено у виробничих випробуваннях на обмеженому поголів'ї північних оленів (50 голів віком близько 1 року) у ПСК «Оленевод» (м.Воркута). Щеплені тварини залишалися клінічно здоровими, післяствакцинальних ускладнень не спостерігалося. Через 4 місяці після вакцинації вибірково у 10 тварин було взято проби крові для дослідження сироваток на наявність специфічних антитіл. Результати визначення протисибіркових та протинекробактеріозних антитіл показали, що у всіх тварин у крові присутні специфічні антитіла (титри 1:80-1:160 та 1:400-1:800 відповідно), рівень яких забезпечує захист тварин від зараження відповідними збудниками хвороб. Серед щеплених тварин випадків захворювання на сибірку і некробактеріоз не спостерігалося.
Застосування даної вакцини у тваринництві дозволить суттєво знизити трудовитрати ветеринарних фахівців, зменшити стресовий вплив на організм тварин при проведенні щеплень, у більш короткі терміни створювати стійкий добробут щодо інфекційних хвороб мікробної етіології.
Приклади конкретного виконання:
До 78 мл комплексних водорозчинних антигенів F. necrophorum з концентрацією мікробного білка 12 мг/см 3 додають 21 мл гідрату гелю окису алюмінію і ретельно перемішують. До 99 см 3 гомогенної суспензії сорбованих на гелігідрату окису алюмінію комплексних водорозчинних антигенів F. necrophorum додають 1 мл суспензії спор штаму «55 ВНИИВВиМ» збудника сибірки з концентрацією 1,2 млрд спор/см 3 . Суміш ретельно перемішують та зберігають при температурі 4-8°С. Одна прищепна доза становить 2 мл суміші, що містить 12,0 млн спор/см3 вакцинного штаму «55 ВНИИВВиМ» збудника сибірки і 9,3 мг/см3 мікробного білка.
Вакцина має вигляд гомогенної суспензії, яка при стоянні розшаровується на дві частини: прозора надосадова рідина жовто-зеленого кольору та пухкий осад сірого кольору, який при струшуванні розбивається в однорідну суспензію.
В експериментах на морських свинках, кроликах, вівцях та північних оленях показано, що асоційована вакцина не поступається імуногенністю моновакцинам проти сибірки і некробактеріозу тварин, виготовлених з цих штамів.
Виживаність щеплених асоційованою вакциною овець, заражених вірулентним штамом №76 збудника сибірки через 12 місяців після вакцинації, склала 100%, як і у разі застосування протисибірчастої моновакцини (табл.1).
| Таблиця 1 Результати вивчення напруженості імунітету до сибірки у овець, щеплених моновакциною проти сибірки і пропонованої асоційованою вакциною. | ||
| Група тварин | Кількість заражених тварин | Вижили тварини, % |
| Щеплені моновакциною зі штаму 55-ВНІІВВіМ | 6 | 100 |
| Щеплені асоційованою вакциною | 6 | 100 |
| Нещеплені (контроль) | 6 | 0 |
Вакциновані тварини брали проби сироватки крові для дослідження на наявність відповідних антитіл. Оцінку рівня протинекробактеріознихантитіл проводили реакції аглютинації (РА). Результати оцінювали за величиною титрів аглютинуючих антитіл. Порівняльна оцінка рівня імунітету у овець та кроликів до некробактеріозу після щеплення асоційованої та моновакцинами показала, що величина титрів протинекробактеріозних антитіл у дослідних груп тварин була порівнянна з величиною титрів аглютинінів у тварин, щеплених комерційним препаратом - 1:1600-1:80 відповідно (табл.2).
Як додатковий критерій оцінки імуногенності асоційованої вакцини щодо сибіркового компонента використовували реакцію непрямої гемаглютинації (РНГА) з сибірковими антигенами. Максимальний рівень специфічних антибактеріальних антитіл спостерігався на 14, 21 добу та не відрізнявся від такого після застосування моновакцини.
| Таблиця 2 Порівняльна характеристика показників імуногенності моно- та асоційованої вакцин проти сибірки та некробактеріозу | |||
| Вакцина | Вид тварини | Титри антитіл | |
| РНДА | PA | ||
| Асоційована | Вівці | 1:80-1:160 | 1:800-1:1600 |
| Північні олені | 1:160-1:320 | 1:800-1:1600 | |
| Кролики | 1:10-1:20 | 1:800 | |
| Моновакцина проти сибірки | Вівці | 1:80-1:160 | - |
| Кролики | 1:10-1:20 | - | |
| Моновакцина проти некробактеріозу | Вівці | - | 1:800 |
| Північні олені | - | ||
| Кролики | - | 1:800 |
В результаті проведених експериментів встановлено, що пропонована асоційована вакцина проти сибірки та некробактеріозу тварин нешкідлива, ареактогенна, створюєу одноразово щеплених тварин напружений імунітет, що оберігає їх від зараження 10ЛД50 вірулентної сибірки, тривалістю не менше 12 місяців і проти некробактеріозу не менше 6-ти місяців з утворенням протинекробактеріозних антитіл у титрах не нижче ніж при введенні комерційної моновакцини.
1. ОСТ 10-19-002-00 "Вакцина жива зі штаму 55-ВНИИВВиМ проти сибірки тварин"
2. ТУ 938-055-004941-85-95 "Вакцина проти некробактеріозу тварин інактивована"
3. Караваєв Ю.Д., Мачахтиров І.Г. Некробактеріоз можна сказати «ні». // Тваринник. – 1998. – №7. – С.24-25.
4. Сидорчук О.О., Панасюк С.Д., Кружнов Н.М., Кирилов Л.В. та ін. Система заходів щодо боротьби з некробактеріозом великої рогатої худоби та копитною гниллю овець // Ветеринарія. – 1999. – №6. – С.23-27.
Асоційована вакцина проти сибірки та некробактеріозу тварин, що відрізняється тим, що містить комплексні водорозчинні антигени F.necrophorum, сорбовані на гелі гідрату окису алюмінію з концентрацією мікробного білка 7,5-10,0 мг/см 3 і суспензію спормязвенного -ВНИИВВиМ» у концентрації 10,0-12,5 млн спор/см 3 при наступному співвідношенні цих компонентів у вакцині, об.%:
| Комплексні водорозчинні | |
| антигени F.necrophorum | 75,0-79,0 |
| Гель гідрату окису алюмінію | 20,0-24,0 |
| Суспензія спір вакцинного | |
| сибіркового штаму | 0,8-1,3 |
Винахід відноситься до галузі ветеринарії