Діізопропілфторфосфат ДПФ - Довідник хіміка 21
Хімія та хімічна технологія
Діізопропілфторфосфат ДПФ
Звичайним реагентом є діізопропілфторфосфат (ДПФ)[c.714]
ПРОНАЗА, суміш частково очищених протеолітичних ферментів з мікробів 31гер1отусе5 gri.seus, що містить нейтр. та щілин. протеїнази (див. Протеолітгтеські ферменти), а також протеїнази, близькі за характером дії хімотрипсину та карбоксипептидазам. Мовляв. м. компонентів 16000-20 ТОВ. Має широку субстратну специфічність, при pH 7-8 гідролізує в казеїні і альбумін 80-85% пептидних зв'язків. Активність разл. комнонентів П. пригнічується хелатами, діізопропілфторфосфатом, хлоркетонами. Активізується Са+, З+, Мп+, Застосування. при дослідженні будови білків ПРОПАЗИН. тріазин[c.480]
Якщо препарат карбоксипептидази вже звільнений від домішки ендопептидаз, обробку діізопропілфторфосфатом слід опустити. У цьому випадку кристали карбоксипептидази А (5 мг) суспендують[c.155]
Якщо на хімотрипсин впливали діізопропілфторфосфатом, міченим то P виявлявся міцно пов'язаним з ферментом ковалентним зв'язком. Подальші експерименти показали, що при денатурації міченого ферменту та подальшому його гідроліз кислотою вивільнення Р не відбувається. Радіоактивний фрагмент, що утворився, був[c.107]
Що являє собою група -у цьому рівнянні Досліди з діізопропілфторфосфатом вказують на те, що -0 -група належить ег-195. Однак цьому припущенню суперечить дуже слабка кислотність -СНгОН-групи. Крім того, згідно з іншими даними, роль групи виконує імідазольна група гістидину. Наприклад, відомо, що каталітична активність хімотрипсину при гідролізі складних ефірів змінюється зі зміною рН. У той час як кон-[c.108]
Діізопропілфторфосфат Синтетична речовина 3 10[c.761]
Г-проміж, продукти в синтезі інсектицидів, пластифікаторів, екстрагентів, вогнестійких гідравліч. рідин та ін Див, також Діізопропілфторфосфат, Метил-дихлорфосфат.[c.493]
Інгібітори X.- іони важких металів, борорг, к-ти, діізопропілфторфосфат та ін.[c.263]
У 1949 р. було показано, що одна з отрут нервово-паралітичної дії, діізопропілфторфосфат (ДФФ), інактує хімотрипсин.[c.107]
Гідроксильна група бічного ланцюга серинового залишку атакує молекулу діізопропілфторфосфату у атома фосфору, замінюючи атом фтору. Зауважимо, що ця реакція є реакцією нуклеофільного заміщення у атома фосфору (реакція типу 1.В, табл. 7-1), але в цьому випадку вона протікає на ферменті, що зазвичай каталізує реакцію заміщення у атома вуглецю карбонільної групи. Молекулу діізопропілфторфосфату можна розглядати як псевдосубстрат (квазісубстрат), який реагує з ферментом аналогічно справжньому субстрату, але який не забезпечує нормального завершення реакції.[c.107]
Така ж послідовність амінокислот в оточенні реакційноздатних залишків серину була незабаром виявлена в трипсині, тромбіні, еластазі та трипсиноподібному ферменті коконазі, який використовується тутовим шовкопрядом для звільнення з кокона [27]. Близька за хімічною структурою послідовність, що містить GIu-Ser-Ala, була виявлена в ацетилхолінестеразі. Таким чином, існує сімейство серинових пептидаз та естераз, для яких характерна загальна послідовність амінокислот навколо реакційноздатного серину та здатність інгібуватися діізопропілфторфосфатом [28].[c.108]
Несподіваним з'явився розрив зв'язку -ЦиЗОзН.Сер-під дієюхімотрипсину. У контрольних дослідах з хімотрипсином, який попередньо інкубувався зі специфічним інгібітором - діізопропілфторфосфатом, розриву[c.203]
Цей фермент може бути виділений з екстрактів підшлункової залози в чистому вигляді [128], але до використання для визначення послідовності амінокислот його рекомендується інкубувати з діізопропілфторфосфатом, щоб інактивувати можливі домішки хімотрипсину, трипсину і субтилізину [122, 267. Основні властивості і специфічність дії карбоксипептидази докладно розглянуті в ряді робіт [228 293]. У інших роботах [114, 136, 226, 320] наводяться дані про використання ферменту визначення послідовності амінокислот в білках. Карбоксн-Пептйдаза специфічна щодо С-кінцевих амінокислот[c.232]
Регулювання шляхом інгібування. Інгібування ферментів може бути незворотним і в цьому випадку зазвичай викликається зовнішніми факторами, наприклад, нагріванням, отрутами, денатуруючими агентами. Приклади незворотного інгібування - дія діізопропілфторфосфату на серинові ферменти, зв'язування гідроксильних або тіолових груп в активному центрі іонами важких металів, наприклад, при взаємодії пдра-хлормеркурибензоату з 8Н-групами залишків цистеїну в ферменті АЦ. Дія незворотних інгібіторів не регулюється.[c.34]
Хоча докази механізму з утворенням ацилферменту дуже численні, є лише трохи чітких вказівок на те, що центром ацилювання є гідроксильна група серину, а не, наприклад, азот імідазолу. Найбільш чітким доказом обов'язкової участі серину є, мабуть, експеримент, у якому АЛЕ-група видаляється. Це можливо через те, що атом кисню серину може бути ацильований і тим самим перетворений нахорошу групу, що йде, такими неспецифічними реагентами, як діізопропілфторфосфат (див. вище) і то-луол-м-сульфонілфторид. Тозиловий ефір (32), отриманий таким способом, відщеплює толуол-м-сульфонову кислоту при обробці[c.484]
Бекманівське перегрупування оксимів ацетофенону Декарбонілювання мурашиної кислоти Декарбоксилювання мезитинової кислоти Гідроліз діізопропілфторфосфату Гідроліз етилвіїїлового ефіру[c.68]
Функціональні групи активного центру хімотрипсину ідентифіковані за допомогою незворотних інгібіторів. Залишок Ser-195 був модифікований діізопропілфторфосфатом і феніл-метилсульфофторидом, а залишок His-57 - К-тозил-Ь-фенілалу-ннл-хлорметилкетоном Дивитися сторінки де згадується термінДіізопропілфторфосфат ДПФ :. ] [c.62] [c.145] [c.249] [c.696] [c.155] [c.561] [c.56] [c.352] [c.451] [c.542 ] [c.594] [c.107] [c.320] [c.234] [c.107] [c.231] [c.286] [c.13] [c.124] [c.422 ] [c.290] [c.1150] [c.660] [c.145] [c.233] Дивитись розділи в:
Органічна хімія. Т.2 (1970) - [c.714]
Органічна хімія Поглиблений курс Том 2 (1966) - [c.698]