Глутамілтранспептидаза

Фермент γ-глутамілтранспептидазу (γ-ГТП, γ-глутамілтрансферазу, КФ 2.3.2.2) каталізує реакцію перенесення γ-глутамільного залишку будь-якого олігопептиду на акцепторну амінокислоту, інший пептид або воду (гідроліз). Найвища активність ферменту виявлена в нирках та підшлунковій залозі, значно менша активність виявлена у печінці, селезінці, мозку. У скелетних м'язах, серці, легенях активність ГТП майже дорівнює нулю. Зміна активності ферменту характеризує стан мембран клітин з високою секреторною, екскреторною та адсорбційною активністю (епітелій жовчних шляхів, печінкових канальців та проксимального відділу нефрону; ворсинки тонкого кишечника; панкреатична екзокринна тканина та вивідні протоки pancreas). У біологічних рідинах найбільш висока активність ферменту спостерігається у жовчі та сечі, у сироватці крові активність γ-ГТП у 4-6 разів нижча порівняно з сечею.

На поліакриламідному гелі виявлено 5 фракцій ізоензимів γ-ГТП (диск-електрофорез), при електрофорезі в гелі агару - 2 фракції, на папері - 3, на агарозних пластинах - 4, на мембрані ацетатцелюлози - 4 фракції. Фракції відрізняються один від одного вуглеводним складом, за лектин-зв'язуючими властивостями, за здатністю очищеного апоферменту утворювати агрегати та комплекси з ліпідами та протеїнами.

Методи визначення активності γ-глутамілтранспептидази розрізняються за субстратом, що використовується:

1. Фізіологічні субстрати - як субстрат застосовується глутатіон (-глутамілцистеінілгліцин). Ці методи трудомісткі, малочутливі й у час не використовуються.

2. Синтетичні субстрати - як донора глутамільної групи використовуються наступні сполуки: L-γ-глутаміл-β-нафтиламід, L-γ-глутаміланілін, L-γ-глутаміл-п-нітроанілін. Останнєз'єднання отримало найбільше застосування, особливо його більш розчинне похідне - L-γ-глутаміл-3-карбокси-4-нітроанілін. Як акцептор глутамильной групи використовується дипептид глицилглицин, оптимальна концентрація його пригнічує реакцію гідролізу, але з транспептидации.

Як уніфікований затверджений метод із субстратом L-γ-глутаміл-п-нітроаніліном у гліцингліциловому буфері.

Визначення активності γ-глутамілтранспептидази з субстратом L‑γ‑глутаміл‑ п-нітроаніліном за набором фірми "Lachema"

γ-Глутамілтранспептидаза переносить глутамільний залишок з L-γ-глутаміл-п-нітроаніліну на дипептидний акцептор, яким є гліцилгліцин, що служить одночасно і буфером. Концентрацію звільненого 4-нітроаніліну вимірюють колориметрично після зупинки реакції підкисленням.

Нормальні величини

Сироватка	чоловіки	вказаний метод	0,25-1,77 мккат/л
уніфік. метод	15-106 Е/л
або 250-1767 нмоль/с×л
жінки	вказаний метод	0,17-1,10 мккат/л
уніфік. метод	10-66 Е/л
або 167-1100 нмоль/с×л)

Клініко-діагностичне значення

Підвищення активності ферменту в сироватці крові спостерігається при внутрішньо- та позапечінковому холестазі (у поєднанні зі зростанням активності інших мембранозв'язаних ферментів), при інших захворюваннях печінки (гострі гепатити, цироз, пухлини та метастази в печінку), при гострих та хронічних панкреатитах, при алкоголі лікування протиепілептичними препаратами; при лікуванні туберкульозу рифампіцином; інфекційному мононуклеозі. При механічних жовтяницях відмічено зростання активності в 5-130 разів, при гострих панкреатитах - у25 разів. Наркотики, седативні засоби, етанол індукують активність ферменту печінки. Фермент є чутливішим показником захворювань печінки в дітей віком, ніж лужна фосфатаза. У період загострення процесу у хворих з хронічним гломерулонефритом, пієлонефритом, амілоїдозом нирок також спостерігається підвищення активності ГТП.