Хромогенні живильні середовища - ТОВ ХІМЛАБОРРЕАКТИВ

Більше півстоліття світу відома технологія створення хромогенних живильних середовищ для мікробіології. Але повноцінне її використання для аналізу зразків розпочалося лише останнє десятиліття.

Зменшити час отримання результату порівняно із традиційними методами
Ідентифікувати декілька мікроорганізмів на одному середовищі
Проводити аналіз візуально, без використання обладнання
Виконувати підтверджуючі тести без пересіву на додаткові середовища

Давайте познайомимося з хромогенними живильними середовищами ближче.

Що таке «хромогенні живильні середовища»?

Це живильні середовища мікробіології зі спеціальними хромогенними субстратами, які у присутності цільових мікроорганізмів викликають появу специфічного фарбування колоній. Хромогенні живильні середовища підходять для культивування, диференціації та селекції мікроорганізмів.

Як працюють хромогенні живильні середовища?

Розглянемо принцип роботи хромогенного живильного середовища на прикладі хромогенного агару для Enterobactersakazakii (ENTEROBACTER SAKAZAKII ISOLATION CHROMOGENIC AGAR (ESIA) ISO 22964). Enterobactersakazakii вважається причиною виникнення менінгітів та некротичних колітів у дітей зі смертністю на рівні 40-80%. Саме тому контроль наявності Enterobactersakazakii у дитячому харчуванні особливо важливий.

До складу хромогенного середовища входять:

Пептонна суміш
Чинники зростання
Інгібітори грамнегативної флори
Агар
Хромогенний субстрат, що розщеплюється ферментом Enterobactersakazakii, забарвлюючи колонії у синій колір

Мал. 1. Схема роботи хромогенного агару

Мал. 3. Чиста культураEnterobactersakazakii на хромогенному агарі виробництва Сонда, Іспанія (кат. 1446)

Таким чином, на середовищі можна одночасно ідентифікувати та виділити чисту колонію Enterobactersakazakii.

Які хромогенні живильні середовища можна використовувати для контролю якості харчових продуктів та води?

На сьогодні існує шістнадцять хромогенних поживних середовищ загального призначення та для контролю якості харчових продуктів:

Хромогенний агар ТВХ (ІSO 16649)

Хромогенний агар для E.coli та коліформ

Хромогенний агар для Pseudomonas

Агар хромогенний для виділення Enterobacter sakazakii

Хромогенний агар для Vibrio

Агар хромогенний для сальмонел

Хромогенний агар з лаурилсульфатом

Хромогенний бульйон з лаурилсульфатом

Хромогенний агар для E.coliі ентеробактерій

Основа хромогенного агару для E.coli 0157:H7

Хромогенне середовище m-EI

Основа хромогенного агару для ентерококів

Агар хромогенний для Listeria(ISO 11290)

Хромогенний агар для стафілококів

Хромогенний агар для коліформ ISO 9308

Чого чекати у майбутньому?

Поєднання класичної мікробіології та знань про біохімічні особливості мікроорганізмів дозволило створити потужний інструмент для швидкого та зручного аналізу в мікробіології – хромогенні живильні середовища. Вважаю, це далеко не повний перелік хромогенних поживних середовищ, адже дослідні лабораторії продовжують працювати над створенням нових, досконаліших формул.

На сьогодні існує кілька груп субстратів, з якими проводять дослідження:

Флуорогенні: продукт реакції «світиться» при опроміненні ультрафіолетом, за рахунок чого колонії добре помітні у світлі УФ-лампи
Хромогенні: розщеплення субстрату призводить до вивільнення речовини, що забарвлює колонію в характерний колір
Люміногенні: нанесення «проявляючого розчину» на поверхню чашки приводить в дію ферменти в клітинах мікроорганізмів, і колонії набувають характерного світіння; при цьому додаткове джерело опромінення, наприклад, УФ-лампа, не потрібне
Вторинної реакції: субстрат реагує з продуктом іншої реакції (первинної), що виникає в результаті метаболізму зростаючих мікроорганізмів

Отримання формули живильного середовища - справа копітка і тривала, адже необхідно не тільки підібрати субстрат і фермент, але і виключити можливість помилкових результатів, вплив на ростові якості. Також важливо, щоб склад залишався стабільним тривалий час і вимагав особливих умов зберігання.

На жаль, не багато формул виявляються життєздатними в умовах виробництва в промислових масштабах. Але ті, що пройшли перевірку, згодом завойовують прихильність користувачів і стають міжнародними стандартами. Так, наприклад, сьогодні серед стандартів ISO вже чотири хромогенні середовища:

Хромогенний агар для E.coli та коліформ (ISO 9308)
Хромогенний агар TBX для горизонтального підрахунку Escherichia coli (ISO 16649-2)
Основа хромогенного агару для Listeria (ІSO 11290)
Агар для ізоляції Enterobactersakazakii (ISO 22964)

Незважаючи на те, що хромогенні живильні середовища дорожчі за традиційні, все більше користувачів в Україні обирають саме їх. А Ви користуєтесь хромогенними середовищами?

куратор напряму «Мікробіологія»