Інструкція із застосування набору реагентів для визначення концентрації білка в сечі

ТІЛЬКИ ДЛЯ IN VITRO ДІАГНОСТИКИ!

ПРИНЦИП МЕТОДА.При взаємодії білка, що міститься в сечі, з сульфосаліциловою кислотою розвивається рівномірне помутніння за рахунок утворення осаду білка. Ступінь каламутності розчину пропорційна концентрації білка.

Разова порція сечі чи добова сеча. Термін зберігання досліджуваних зразків при температурі 2-8 про С протягом 12 год.

1. 3% розчин сульфосаліцилової кислоти.

2. Дистильована вода.

Лінійність – від 0,025 до 0,8 г/л.

До 1 мл сечі додати 3,5 мл 3% розчину сульфосаліцилової кислоти. Ретельно перемішати і через 5-10 хвилин зняти показання на ФЕК при довжині хвилі 590-650 нм проти дистильованої води в кюветі з довжиною оптичного шляху 1 см. Перед вимірюванням оптичної щільності слід добре перемішати вміст пробірки, ретельно стежити за тим, щоб весь осад перейшов розчин, домагаючись рівномірного помутніння. Недостатнє струшування може призвести до занижених результатів!

Розрахунок концентрації білкапроводиться за калібрувальним графіком. Для його побудови готують розведення стандартного розчину альбуміну сироваткового людини в 0,9% розчині хлориду натрію з концентраціями: 0,025; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8; г/л. Для кожного розчину виконують вимірювання так само, як для проби сечі.

Примітка. Якщо значення оптичної густини перевищує 1,0 (концентрація білка перевищує 1 г/л), зразок слід розвести в 10 разів, повторити визначення, а результат помножити на розведення.

ІНТЕРПРЕТАЦІЯ РЕЗУЛЬТАТІВ.У нормі виведення білка із сечею не перевищує 0,08-0,150 г/добу. Протеїнурія – збільшенняконцентрації білка в сечі вище 80-150 мг на добу.

Питання для закріплення знань

1. Чим відрізняється отримання сироватки від плазми. Назвіть маркування вакуумних одноразових пробірок для забору сироватки та плазми.

2. Які порушення при заборі крові можуть призвести до помилково завищених результатів щодо загального білка в сироватці крові?

3. Чому в плазмі відносно більше білка, ніж у сироватці крові?

4. Що таке відносна гіперпротеїнемія? Чим вона обумовлена?

5. Що таке відносна гіпопротеїнемія? Чим вона обумовлена?

6. Чому спостерігається гіпопротеїнемія при захворюваннях печінки?

7. Чому спостерігається гіпопротеїнемія при захворюваннях нирок?

8. Сформулюйте основний закон колориметрії. Напишіть формулу.

9. Як розрахувати фактор розрахунку концентрації білка в сироватці крові?

10. Напишіть формулу розрахунку концентрації білка з допомогою калібратора.

11. Поясніть, чому при концентрації загального білка в плазмі ˃100 г/л пробу необхідно розвести вдвічі і повторити визначення? Потім одержаний результат множать на ступінь розведення проби.

12. Як у нормі нирки обмежують екскрецію білків плазми?

13. Що таке протеїнурія? Які види протеїнурії Ви знаєте?

14. Чому через нирковий фільтр губляться насамперед альбуміни? Що таке селективна та неселективна протеїнурія?

15. Як називається якісна реакція виявлення індикану у сечі?

ЗАДАЧА 1.

Між якими амінокислотами у вказаному поліпептиді:

проходитиме гідроліз пептидного зв'язку під впливом:

а) пепсину; б) хімітріпсину; в) трипсину; г) карбоксипептидази;

Які ззазначених ферментів відносяться до ендопептидазу, а які до екзопептидаз? У яких травних соках міститься кожен із ферментів?

ЗАДАЧА 2.

У хворого, що надійшов до опікового центру, з метою оцінки білкового обміну розраховували показник азотистого балансу в динаміці. Результати представлені у таблиці:

Дні обстеження	Білок, що надійшов, г/сут	Загальний азот сечі, г/добу
1-ий	65 г
Другий	72 г
5-ий	99 г
12-ий	100 г

Завдання.1) Що таке азотистий баланс? Назвіть форми азотистого балансу. 2) Чому азотистий баланс використовують із оцінки білкового обміну в організмі. 3) Розрахуйте величину азотистого балансу (АБ) для кожного дня обстеження за такою формулою:

АБ (г) = [білок, що надійшов: 6,25] – [загальний азот сечі + 4]

де 6,25 - коефіцієнт перерахунку кількості білка в кількість азоту: 6,25 г білка = 1 г азоту; 4 г – виправлення на додаткові втрати азоту організмом.

4) Проведіть аналіз отриманих результатів: як змінювався азотистий баланс у період відновлення пацієнта і що це свідчить?

ЗАДАЧА 3.

У хворого внаслідок травми відзначено значну крововтрату. Як відшкодувальну терапію було введено фізіологічний розчин. У хворого розвинулися набряки.Завдання.1) Як змінюється показник загального білка в сироватці крові внаслідок крововтрати? 2) Яку роль виконують альбуміни плазми? 3) Чому у хворого розвинулися набряки після введення фіз. розчину?

---