Лікування чуми та парвовірусного ентериту м’ясоїдними хіміопрепаратами та імуностимуляторами

на правах рукопису

ДАНИЛІВСЬКИЙ МИХАЙЛО ВАСИЛЬОВИЧ

ЛІКУВАННЯ ЧУМИ І ПАРВОВІРУСНОГО ЕНТЕРИТУ ПЛОТОЯДНИХ ХІМІОПРЕПАРАТАМИ ТА ІМУНОСТИМУЛЯТОРАМИ

16.00.03. – ветеринарна мікробіологія, вірусологія

епізоотологія, мікологія, імунологія

Дисертація на здобуття наукового ступеня

кандидата ветеринарних наук

Робота виконана у ветеринарній лікарні «Айболіт» м. Ульяновськ

доктор біологічних наук, професор ВАСИЛЬЄВ Д.А.

доктор біологічних наук, провідний науковий співробітник ОБУХІВ І.Л.

РАХМАТУЛЛІН Е.К. -д.в.н., професор УДСГА

СЕРЕДА А.Д.- д.б.н., ст. науковий співробітник ВНДІВВіМ

Провідна установа – Всеросійський науково-дослідний

інститут захисту тварин (ВНДІЗЖ)

Захист відбудеться «____» ___________2000 року в____годин на засіданні спеціалізованої вченої ради До 120.82.03 при Ульянівській державній сільськогосподарській академії.

Адреса: м. Ульяновськ, бульвар Новий Вінець, 1.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці УДСГА.

Автореферат розісланий «____»___________2000р.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради,

1. ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

1.1. Актуальність теми

Серед вірусних хвороб м'ясоїдних основне місце належить чумі та парвовірусному ентериту. Не заперечуючи провідної ролі вакцинопрофілактики у забезпеченні захисту від названих хвороб слід виходити з того, що зниження рівня поширення низки інфекційних захворювань м'ясоїдних та летальності від них може бути досягнуто за активного наукового пошуку препаратів різної спрямованості.

Практика показує, що господарі домашніх тварин звертаються до ветеринарних установ, як правило, у період прояву клінічних ознакінфекційних хвороб У цьому випадку ветеринарний лікар починає лікування, не маючи результатів лабораторного діагнозу. Чим ширший спектр дії препаратів, тим більша ймовірність позитивного результату лікування, оскільки в процесі розвитку вторинних імунодефіцитів при вірусних інфекціях починають проявлятися секундарні вірусні та бактеріальні хвороби. Тому науковий і практичний інтерес представляють комплексні препарати, що блокують або гальмують репродукцію вірусів і бактерій, що стимулюють імунну систему тварин.

Проблема неспецифічної стимуляції системи імунітету привертає дедалі більше уваги. Це зумовлено низкою причин: зниженням рівня годівлі, контролю над інфекційними хворобами, екологічним забрудненням. Імунодефіцитні стани супроводжуються, як правило, багатьма хворобами. Корекція імунної системи могла б значною мірою виправити становище. Одним із способів профілактики хвороб тварин, підвищення їхньої природної резистентності є застосування імуностимулюючих препаратів.

Речовини, здатні впливати на імунітет, за походженням можна поділити на три великі групи: екзогенні, ендогенні, синтетичні. Екзогенні – включають препарати мікробного походження, в основному бактеріального та грибкового. Ендогенні - поєднують екстракти з органів імунної системи, а також біологічно активні білки, що продукуються лімфоцитами та макрофагами. Синтетичні – препарати мікробного або тваринного походження; відомі лікувальні препарати, які мають додатково імунотропні властивості; отримані внаслідок спрямованого хімічного синтезу.

Ефективність імуностимулюючої терапії можна підвищити поєднаним застосуванням препаратів. Однак використаннюімуностимулюючої терапії перешкоджає відсутність даних про порівняльну ефективність монотерапії імуностимуляторами. Вищевикладене свідчить, що пошук засобів підвищення імунного статусу м'ясоїдних та способів лікування вірусних інфекцій є актуальним завданням ветеринарії.

В даний час спектр речовин, що мають виражену антивірусну активність, як у профілактичному, так і терапевтичному аспектах дуже обмежений. Тому, крім створення вітчизняних аналогів зарубіжних препаратів, науковий і практичний інтерес представляє оцінка застосування противірусних препаратів у практиці.

Найбільш перспективними напрямками попередження та терапії інфекційних хвороб є наступні:

-Блокування або гальмування репродукції вірусу в осередку ураження, а також зниження рівня вірусемії за допомогою високоефективних інгібіторів розмноження вірусів;

-Стимуляція імунної реакції організму за допомогою специфічних вакцинних препаратів, а також неспецифічних імуностимуляторів.

1.2.Мета та завдання дослідження

Метою даної роботи було визначити профілактичний та лікувальний ефект різних імуностимуляторів та хіміопрепаратів при чумі та парвовірусному ентериті м'ясоїдних.

Відповідно до поставленої мети вирішувалися такі завдання:

визначити ефективність противірусних хіміопрепаратів для лікування чуми та парвовірусного ентериту м'ясоїдних;
дослідити вплив імуностимуляторів на показники неспецифічної та специфічної резистентності м'ясоїдних тварин при експериментальному імунодефіциті, викликаному вакцинацією;
вивчити лікувальну ефективність імуностимуляторів на хворих на чуму та парвовірусний ентерит собак;
оцінити ефективністьпоєднаного застосування вакцин з імуностимуляторами;
дати рекомендації щодо лікування нервових форм чуми м'ясоїдних з використанням імуностимуляторів та хіміопрепаратів.

1.3. Наукова новизна

Встановлено, що рівень вірусемії у лікованих рибамідом тварин різко знижувався вже за добу після початку лікування.

Вперше запропоновано використовувати щеплені вакциною Vanguard 5/L собак як модель для вивчення імуномодуляторів при імуносупресивному стані.

Встановлено, що з шести досліджених імуностимуляторів лише імунофан та ГМДП стабілізує бактерицидну активність крові та концентрацію IgG у сироватці, скорочують термін лімфопенії, тобто. реально мають імуностимулюючі властивості.

Доведено, що імуностимулятори ГМДП та імунофан підвищують рівень поствакцинального гуморального імунітету.

1.4. Практична значимість

Запропоновано використовувати імунофан та ГМДП для лікування різних форм тяжкості хвороб, викликаних вірусами чуми м'ясоїдних та парвовірусного ентериту м'ясоїдних.

Розроблено оптимальні схеми лікування чуми та парвовірусного ентериту м'ясоїдними хіміопрепаратами ремантадин та риботан. Запропоновано схему лікування нервових форм чуми м'ясоїдним комплексом цих препаратів і рекомендується для впровадження в практику.

1.5. Апробація роботи

Результати дослідження доповідали на республіканських і науково – практичних конференціях з 1987 по 2000 р.

1.6. Публікації

1.7. Основні положення дисертаційної роботи, що висуваються на захист

Розроблена схема фармакологічного лікування інфекційних хвороб м'ясоїдним комплексом ремантадину та рибаміду забезпечує одужання понад 90% тварин.

Застосування імунофанута ГМДП підвищує імуногенність живих та інактивованих вакцин. Ці препарати можна як ад'юванти.

1.8. Обсяг та структура дисертації.

Дисертація викладена на 118 аркушах машинописного тексту та включає: запровадження, огляд літератури, матеріали та методи, результати власних досліджень, обговорення, висновки, практичні пропозиції та список літератури (92 джерел, у тому числі 42 вітчизняні). Робота ілюстрована 7 таблицями, 6 малюнками та доповнена додатками.

2. ВЛАСНІ ДОСЛІДЖЕННЯ

2.1. Матеріали

Дослідження проводили на собак у віці від 3 місяців до 8 років.

В роботі використовували вакцини Вакчум, Vanguard 5/L Мультікан-4; хіміопрепарати ремантадин (-метил-1-амінометиладамантан хлоргідрат), візазол (1-D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамід), продігіозан, мастим, риботан (1-D-рибофуранозил-1,2 ,4-триазол-3-карбоксамід), міксоферон, імунофан, N-ацетил-глюкозамініл-N-ацетилмураміл-L-аланін-D-ізоглутамін (ГМДП); глобулін проти ентериту, гепатиту, чуми.

2.2. Методи

Вакцинацію тварин проводили згідно з інструкціями виробників.

Фагоцитарну активність лейкоцитів крові враховували щодо відносної кількості фагоцитуючих нейтрофілів та середньої кількості частинок поглинених одним нейтрофілом.

Визначення лізоциму здійснювали за здатністю лізоциму лізувати клітинну стінку Micrococcus lysodeikticus (Блумберг І.А. та Дундуре Б.Л., 1987).

Визначення ВНС-антигенів у крові та антитіл у сироватці проводили з використанням реакції пасивної гемагглютинації (РПГА) та реакції затримки пасивної гемагглютинації (РЗПГА), відповідно.

Антигени збудника парвовірусного ентериту визначали у реакції гемаглютинації (ГРА), апротивірусних антитіл - у реакції гальмування гемаглютинації (РТГА).

Визначення концентрації сироваткових IgG проводили методом радіальної імунодифузії.

Статистичну обробку даних проводили з допомогою персонального комп'ютера IBM PC/AT 486.

2.2. Результати власних досліджень

2.2.1. Лікування чуми та парвовірусного ентериту м'ясоїдними хіміопрепаратами

Науковий та практичний інтерес становлять препарати, що блокують або гальмують репродукцію вірусів. Нами досліджено дію ремантадину та рибаміду у різних поєднаннях.

У першій серії експериментів хворих на чуму м'ясоїдних цуценят собак у міру їх надходження лікували за двома схемами. Загалом у досвіді було 26 тварин, яких поділили на дві групи (по 8 та 18 голів).

Перша, контрольна, група тварин (12 голів) була піддана лікуванню за традиційною схемою, спрямованої насамперед усунення блювоти, зневоднення організму, ацидозу і вторинних інфекцій. Починали з промивання шлунка 0.1% розчином перманганату калію, потім внутрішньом'язово ін'єктували церукал в дозі 2 мл до припинення блювання, одноразово - інтерферон в дозі 1.5-2 мл і специфічну тривалентну сироватку - 2 мл двічі на день протягом 3- . внутрішньовенно вводили по 15-20 мл 5%-ного розчину глюкози. Всередину давали сульфадимезин у дозі 0.25 г тричі на день протягом 3-5 діб.

Другій, дослідній групі (18 голів) замість інтерферону вводили ремантадин внутрішньом'язово в дозі 20 мкг/кг маси тіла щодня протягом 5 діб і одночасно препарат задавали з водою в дозі 40 мг/кг маси тіла щодня протягом 5 діб.

У першій групі впали 3 тварини (25 %), інші одужали, явні ознаки поліпшення клінічного стану спостерігали.через 3-4 дні від початку терапії. У другій групі впала одна тварина (5.6 %). Явні ознаки покращення клінічного стану спостерігали вже на 2-3 добу після початку терапії. Побічної дії препарату не зареєстровано.

У порівняльному аспекті була визначена вірусемія у собак, хворих на чуму або парвовірусний ентерит м'ясоїдних, лікованих без і з ремантадином. Було встановлено, що ремантадин пригнічує репродукцію збудника чуми м'ясоїдних, але не репродукцію збудника парвовірусного ентериту.

У другій серії експериментів досліджували ефективність рибаміду при лікуванні чуми та парвовірусного ентериту м'ясоїдних.

Хворі, ранжировані за віком тварини були поділені на 6 груп залежно від попереднього діагнозу хвороби та застосовуваного для лікування хіміопрепарату.

Схема 1 (контроль):

а) при парвовірусному ентериті лікування собак починали з промивання шлунка 0,1% розчином перманганату калію, потім внутрішньом'язово ін'єктували церукал в дозі 2 мл до припинення блювання, одноразово інтерферон в дозі 1,5-2 мл. Підшкірно вводили по 10-20 мл фізіологічного розчину, внутрішньовенно - по 10-20 мл 5% розчину глюкози. Всередину давали сульфадимезин у дозі 0,25 г тричі на день протягом 3-5 діб;

б) при чумі м'ясоїдних антибактеріальних засобів використовували внутрішньом'язово ампіцилін – 25 000 од., гентаміцин – 2,5 мг на 1 кг маси тіла двічі на добу. При порушенні функції шлунково-кишкового тракту призначали церукал – по 0.25 г тричі на добу. При діареї давали внутрішньо біфекол із розрахунку одна доза на 10 кг маси тіла двічі на добу. Крім того, при необхідності здійснювали краплинне введення суміші 0,5% розчину глюкози з ізотонічним розчином натрію хлориду.

Схема 2 –додатково до схеми 1 застосовували рибамід у перший день дворазово 40 та 20 мг/кг, у другий – 20 мг/кг трикратно, третього та четвертого – по 20 мг/кг дворазово.

Схема 3 додатково до схеми 1 застосовували рибамід в перший і другий день по 40 мг/кг одноразово.

Результати представлені у табл. 1.

Таблиця 1. Результати лікування рибамідом собак, хворих на чуму або парвовірусний ентерит м'ясоїдних.