Пептидні гормони яєчників
Роль гонадотропініві стероїдних гормонів статевих залоз у процесі фолікулогенезу добре відома. Однак багато процесів, що відбуваються в яєчниках, припускають наявність інших внутрішньояєчникових факторів, які здійснюють «тонке налаштування» дії гонадотропінів і стероїдів статевих залоз. Наприклад, ініціація та припинення мейозу, а також різна швидкість дозрівання фолікулів, що забезпечує вибір домінантного фолікула, вказують на існування окремої внутрішньояєчникової регуляторної системи. Концепція гонадного фактора, що має ендокринну дію на гіпофізарному рівні, була висунута понад 70 років тому Моттрамом і Крамером. Першим виявленим компонентом даної системи був інгібіном, названий так за його пригнічуючу дію на гіпофіз. Після цього відбувся сплеск інформації про реальні та можливі внутрішньояєчникові регулятори, їх фізіологію, біохімію та біосинтез, а також про ідентифікацію їх рецепторів. До цих сполук, що стали предметомінтенсивного вивчення, відносяться пептидні гормони/фактори росту, цитокіни та нейропептиди. Вони можуть мати ендокринний, аутокринний або паракринний механізм дії.
Перший водорозчинний пептидний гормон з витяжки яєчок, що проявив інгібіторну активність на гіпофізарному рівні, був описаний в 1932 і названий інгібіном. Лише 1985 р. (50 років по тому) інгібін було виділено і було уточнено його структура. Надалі були ідентифіковані та описані два інші пептидні фактори (активін та фолістатин). Коли були клоновані гени а- і b-субодиниць інгібіну, стало зрозуміло, що інгібін та активін належать до надродини трансформуючого фактора росту b (ТФРb), до якого входять фактори росту та диференціювання клітин. Інгібін, як і активін, представляє особливий клінічний інтерес і вОстаннім часом інтенсивно вивчається.
Виявилося, що вони виконують безліч різних регуляторних функцій як в нормальних, так і в неопластичних клітинах. У цьому розділі ми також торкнемося фолістатину — глікопротеїну, який структурно відрізняється від інгібіну та активіну, але функціонально подібний до них.
Основними джереламиінгібінуслужать гранульозні клітини яєчників іклітини Сертолі яєчок. Інгібін також продукується під час вагітності плодом, плацентою, децидуальною оболонкою та плодовими оболонками. Найважливішою функцією інгібіну є селективне гноблення продукції ФСГ гіпофізом. Воно досягається модуляцією біосинтезу ФСГ за рахунок двох механізмів: зменшення кількості стабільної мРНК для ФСГ у гонадотрофах гіпофізу та зниження стабільності мРНК для ФСГ.
Інгібін єглікопротеїновимгетеродимером з молекулярною масою 32 кДа, що складається з двох субодиниць - а і b, з'єднаних дисульфідними містками. а-субодиниця однакова у всіх молекулах інгібіну, а b-субодиниця може бути двох типів: bА і bв. Відповідно дві іЗоформи інгібіну позначаються як інгібін А та інгібін В. Кожна субодиниця утворюється зі свого попередника: препроінгібіну а (364 амінокислотних залишку), препроінгібіну bА (424 амінокислотних залишку) і препроінгібіну bв (40). Попередники зазнають протеолітичного розщеплення до кінцевих форм. На додаток до кінцевих форм (a/b-димерів з молекулярною масою 32000) у фолікулярній рідині були виявлені більші форми димерних інгібінів з термінально подовженими за рахунок аміногруп а- та/або b-субодиницями. Вони також мали супресивну по відношенню до ФСГ біологічну активність.
Більш того, мономерні форми а-і b-субодиницьі деякіфрагменти(aN і про-aN-aC), що утворюються при перетворенні субодиниць, також знаходяться у фолікулярній рідині і мають внутрішню біологічну активність, відмінну від класичної інгібіноподібної активності.
Через те, що вциркулюючої кровіодночасно присутні багато молекулярних форм інгібіну, точне вимірювання його концентрації за допомогою звичайних методик РІА важко. Більшості з них бракує специфічності по відношенню до димерного інгібіну через варіабельну перехресну реактивність мономерних форм і різних фрагментів з антитілом, що використовується при аналізі. До того ж традиційні біотести на інгібін, засновані на супресії або вивільненні ФСГ культурою гіпофізарних клітин, недостатньо специфічні через ФСГ-модеруючу дію активінів і фолістатину. Біотести також мають недостатню чутливість при вимірюванні рівня циркулюючого інгібіну.
Ці недоліки були подолані за рахунок розробки методики двостадійного імуноаналізу, що використовує специфічні антитіла до a/b-димеру, завдяки якій стало можливим визначення концентрації обох форм інгібінових димерів (А і В). За допомогою цієї нової методики двостадійного імуноаналізу тепер можна визначати рівні інгібіну протягом менструального циклу.
Синтез двох ізоформінгібінурізний у різні фази менструального циклу. Максимальні рівні інгібіну В виявляються під час перехідної лютеїново-фолікулярної та ранньої фолікулярної фаз. Дослідження базальної секреції гранульозних клітин і вмісту інгібіну В у фолікулярній рідині дозволяють припустити, що він секретується дрібними антральними фолікулами, що розвиваються. Навпаки, рівень інгібіну А в ранню та середню фолікулярну фази відображаєстимульовану ФСГ та ЛГ секрецію інгібіну А всіма антральними фолікулами. Рівень інгібіну А в пізню фолікулярну фазу в основному відбиває секрецію домінантного фолікула. Таким чином, інгібіни А і можуть служити індикаторами розвитку фолікулів.
Проводилося також вивчення інгібінів як прогностичних маркерів для жінок, які проходять лікування в програмах допоміжних репродуктивних технологій. Зокрема, передбачалося, що визначення рівня інгібіну на ранніх стадіях стимуляції ФСГ для індукції овуляції може допомогти в прогнозуванні кількості отриманих ооцитів і моніторингу стимуляції яєчника для запліднення in vitro. Однак у зв'язку з тим, що рівні інгібіну можуть бути практично однаковими як при нормальному, так і при субнормальному відповіді яєчників, кориснішим може виявитися визначення рівня ФСГ на 3-й день циклу або проведення тесту з навантаженням кломіфеном. У жінок, які вступають у менопаузу (у ранньому перименопаузальному періоді), спостерігається суттєве зниження рівня інгібіну В (за збереження колишніх рівнів інгібіну А та естрадіолу), що корелює з деяким зниженням рівня ФСГ. Це зниження передує зниженню рівня інгібіну А, що дозволяє припустити роль інгібіну як чутливого індикатора початку менопаузи. У дослідженнях, присвячених ролі інгібінів у патофізіології синдрому полікістозних яєчників (СПКЯ), отримано суперечливі результати.
Так, є повідомлення про суттєве підвищення рівня інгібіну у сироватці крові в ранню фолікулярну фазу поряд з повідомленнями про відсутність будь-яких змін цього показника — все це передбачає подальше вивчення ролі інгібіну В при СПКЯ.
Під часвагітності інгібін Ав основному продукується фетоплацентарним.комплексом; рівень же інгібіну на всьому її протязі залишається низьким. При розвитку у плода синдрому Дауна рівень циркулюючого інгібіну А зростає вдвічі, що зумовлює клінічну значущість його визначення. Якщо доповнити вимір рівня інгібіну А визначенням альфа-фетопротеїну, віку матері та b-чХГ (квадро-тест), то пренатальна виявляє синдром Дауна зростає з 53 до 75%.
Інгібін Вє основним інгібіном, що секретується в чоловічому організмі. Він продукується клітинами Сертолі яєчок та за механізмом негативного зворотного зв'язку пригнічує секрецію ФСГ гіпофізом; його продукція регулюється також сперматогенез. Рівень інгібіну корелює з об'ємною кількістю сперматозоїдів і обсягом яєчок, але за його значенням неможливо провести диференціальну діагностику між гальмуванням сперматогенезу на стадії сперматид і обструктивною азооспермією, при яких об'ємна кількість сперматозоїдів залишається нормальним. Враховуючи все вищесказане, видається малоймовірним, що аналіз на інгібін В зможе замінити біопсію яєчка при діагностиці чоловічої безплідності.