ПЕРСПЕКТИВИ НЕІНВАЗИВНОЇ ДІАГНОСТИКИ ПОРУШЕНЬ ВІЛЬНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕННЯ ТА АНТИОКСИДАНТНОЇ
Процеси вільнорадикального окислення (СРО), які є універсальними та необхідні для нормальної життєдіяльності, повинні підтримуватись на фізіологічному рівні, що забезпечується АТЗ. Порушення регуляції окисного метаболізму призводить до посилення СРО, що супроводжується розвитком різних патологічних станів при ЦД 2 типу [16], у тому числі зростанням ускладнень з боку серцево-судинної системи.
У зв'язку з цим є актуальним дослідження виразності пероксидації та порушень ферментної ланки антиоксидантного захисту в ротовій рідині при ЦД 2 типу та його поєднанні з ішемічною хворобою серця.
Матеріали та методи дослідження
Обстеження пацієнтів та забір матеріалу проводили на клінічних базах: МБУЗ "Міська поліклініка №7 міста Краснодара" (м. Краснодар), відділення кардіології №3 ГБУЗ "Клінічний госпіталь для ветеранів воєн" (м. Краснодар), відділення ендокринології ДБУЗ "Краєва клінічна лікарня" №1 імені професора С.В.Очаповського" міністерства охорони здоров'я Краснодарського краю (м. Краснодар), ДБУЗ "Крайова консультативна поліклініка" (м. Краснодар). Матеріалом для дослідження була РШ хворих на ЦД 2 типу (9 чоловіків і 16 жінок, у віці – 64,9±2,2 роки, n=25, група 1), РШ хворих на ЦД 2 типу та ішемічну хворобу серця (n= 25, 10 чоловіків та 15 жінок у віці (M±m) – 61,5±2,6 року, група 2). Контрольну групу 3 склали 25 осіб (чоловіків 12 та жінок 13, у віці – 56,3±8,7 року) без патології пародонту, що не мають клінічних та лабораторних ознак ЦД 2 типу та ішемічної хвороби, порівнянних за статтю та віком з іншими обстеженими групами.
Визначення антиокислювальної активності проводили амперометрично на аналізаторі антиоксидантної активності"Яуза-01-ААА" за способом [4], яким спочатку при певному потенціалі (1,3 В) вимірювали електричний струм, що виникає при окисленні на поверхні робочого електрода стандарту (аскорбінової кислоти в концентрації від 0,1 до 8,0 мг/л), на підставі отриманих даних виконували побудову калібрувального графіка. Для оцінки виразності СРО в біорідинах визначали продукти пероксидації, що реагують з тіобарбітуровою кислотою (ТБК-РП). Визначення продуктів окисної модифікації біомолекул проводили на підставі кількісної оцінки забарвленого комплексу, що утворюється при взаємодії вторинних продуктів окисної модифікації, що містяться в РШ, з тіобарбітурової кислоти. Отримані результати виражали мікромолях ТБК-РП на 1 л РЖ [7].
Серед показників ферментної ланки антирадикального захисту вивчали активність глутатіонпероксидази (ГПО), глутатіонредуктази (ГР), супероксиддисмутази (СОД), каталази (КАТ). Активність ДПО визначали за рівнем витраченого внаслідок реакції окислення відновленого глутатіону. Відновлений глутатіон, що залишився після реакції, визначали за допомогою 5,5'-дітіобіс(2-нітробензойної) кислоти (реактив Елмана). Активність ДПО виражали в мкмоль/(хв • г білка) [2]. Активність ферменту ГР вимірювали за ступенем окиснення (НАДФН+Н+) у ході реакції відновлення окисленого глутатіону при довжині хвилі 340 нм. Активність ГР виражали в мкмоль/(хв • г білка) [2]. Активність СОД в РЖ визначали методом [9] і виражали в умовних одиницях, віднесених до 1г білка РЖ. Визначення активності КАТ в РШ проводили колориметричним методом [9], і виражали в мкмоль/(хв • г білка) в РЖ.
Статистичну обробку одержаних даних здійснювали методами варіаційної статистики з використанням t-критерію Стьюдента.Достовірним вважали відмінність при р