Підготовка сперми трутнів для інструментального запліднення бджолиних маток
#1 OFFLINEСєрьога
- Місто Форум бджолярів Киргизстану
Виведення трутнів Для інструментального запліднення використовують статевозрілих трутнів відомого походження (виводять безпосередньо на племінній пасіці). З цією метою готують спеціальні батьківські бджолині сім'ї. Їх виділяють з числа найбільш продуктивних, зимостійких, здорових і типових для породи, що розмножується, або лінії бджіл.
У сильних сім'ях завжди є достатньо бджіл-годувальниць, здатних вирощувати трутнів. Тому батьківські сім'ї готують до вирощування личинок трутневих з осені. Для цього вибирають сильні бджолині сім'ї та забезпечують за ними оптимальний догляд. Найкраще їх вивезти в місця з медозбором, що підтримує. Якщо немає такої можливості, то бджолині сім'ї необхідно підгодовувати медопильцевим підживленням. При складанні гнізд на зиму в середину гнізда ставлять комбіновані стільники, в яких поряд з бджолиними осередками є трутневі. У такі стільники матки навесні охоче відкладають яйця. Забезпечують умови для нормальної зимівлі батьківських сімей. Щоб прискорити початок вирощування трутневого розплоду, батьківські сім'ї виставляють із зимівника для очисного обльоту на два тижні раніше від звичайного терміну.
З цією ж метою батьківські сім'ї готують до зимівлі з матками-трутівками. Такі сім'ї виходять із зимівлі вже з молодими трутнями у гнізді. Щоб одержати матку-трутування, від племінної матки виводять дочок, яких триразово з добовим інтервалом протягом 10 хв. обробляють вуглекислим газом. Оброблену матку витримують у клітині 5-10 діб, а потімпідсаджують у сильну, підготовлену сім'ю. Навесні сім'ї з маткою-трутівкою обов'язково періодично ставлять рамки зі зрілим друкованим розплодом від інших сімей.
Виставлені з зимівника батьківські сім'ї обробляють від варроатозу, гнізда їх скорочують, звільняють від підмору, добре утеплюють, якщо потрібно - підсилюють і дають спонукальне підживлення з білковими добавками. Бажано до появи у природі пилку сім'ї годувати медоперговой сумішшю, і навіть додавати їм у годівниці теплу воду.
Білковий корм трутні отримують протягом перших трьох днів життя, коли у них відбувається накопичення та дозрівання сперматозоїдів. Помічено, що протягом однієї години бджоли дають корм трутню, що тільки що вийшов з осередку, від 22 до 33 разів. Тільки на п'яту добу життя трутні здатні самостійно брати корм із осередків.
Трутні в батьківських сім'ях повинні бути присутніми протягом усього матовивідного сезону.
Часто бджоли починають виганяти трутнів серед літа при тимчасовому припиненні медозбору. І тут батьківські сім'ї починають підгодовувати чи відбирають в них матку. Безматкові сім'ї трутнів не виганяють, вони годують трутнів довше та краще, ніж нормальні сім'ї.
Іноді дуже важко отримати трутневий розплід від молодих плодових маток, а також виростити трутнів у сім'ях з інбредними матками. Запропоновано кілька способів отримання трутнів у будь-які терміни сезону:
Укладання матки на трутневому стільнику в рамковому ізоляторі з розділової решітки. Ізолятор з маткою ставлять між рамками з розплодом. Через три доби сотень із яйцями виймають із ізолятора і ставлять у гніздо, а матці в ізолятор ставлять новий.
Отримання яєць від маток-трутівок. Обробка безплідної матки вуглекислим газом описана вище. Трутівку можна отримати і навеснішляхом охолодження плодової матки при температурі 0-5 ° протягом 6-8 годин, два дні поспіль. Під час обробки матка впадає в заціпеніння, потім за нормальної температури вона приходить у нормальний стан і протягом 10 діб відкладає виключно незапліднені яйця.
Примушення робочих бджіл до відкладання яєць. Формують відведення з молодих бджіл, яких струшують на трутневі стільники. Бджіл зазвичай годують білковим кормом і вони починають функціонувати яєчники. Приблизно через десять діб бджоли починають відкладати яйця. Бажано стільники з трутневим розплодом від таких сімей переставляти на виховання сильним сім'ям з метою покращення якості трутнів.
Сім'ї з бджолами-трутівками, з матками-трутівками періодично підсилюють рамками з розплодом. Сім'ї з бджолами-трутівками краще підсилювати рамками з друкованим розплодом, тому що, виховуючи молодих личинок бджоли-трутівки можуть втратити здатність відкладати яйцяЗміст племінних трутнів. сім'ї поблизу лабораторії, що робить їх доступними для роботи у будь-який час. До теперішнього часу розроблено кілька способів утримання племінних трутнів у період роботи з інструментального запліднення бджолиних маток, найкращим з яких, на нашу думку, є метод, при якому трутні мають вільний виліт з вулика. При використанні цього методу обов'язковим є переміщення трутнів. За два дні до виходу трутнів з сотових осередків поміщають у рамковий ізолятор з розділової решітки і ставлять його між рамками з розплодом. Можна ізолятор із трутневим розплодом помістити в інкубатор, який знаходиться у лабораторії. Щойно трутні почнуть виходити з осередків, їх мітять фарбою потрібного кольору, краще розведеною ацетоном, т.к. вона швидко висихає. Для мічення готують заточеніпалички, кінець яких занурюють у фарбу, а потім торкаються грудки трутня. Фарба швидко висихає, і мічених трутнів випускають у гніздо, а стільник повертають в ізолятор до наступного дня. Для запліднення маток набирають лише мічених трутнів.
Відбір сперми у трутнів. Еякуляція. Наповнення шприца. Підготовлений до роботи шприц встановлюють у поле зору мікроскопа (при збільшенні у 8 разів), щоб чітко було видно кінець капіляра. Правою рукою відтягують поршень шприца, щоб набрати в капіляр трохи повітря для поділу фізіологічного розчину та сперми. З садка чи іншої клітини беруть трутня, дають йому попрацювати крилами, тримаючи його ніжки. Вимушений його політ збільшує об'єм черевця за рахунок нагнітання повітря в повітряні мішки, що є сприятливим при скороченні черевних м'язів. Потім швидким рухом пальців іншої руки здавлюють йому грудку чи відривають головку. Цей прийом зазвичай викликає скорочення м'язів і часткове вивертання ендофаллуса (а іноді і повне з еякуляцією).
Рис.1. Часткове вивертання ендофаллуса трутня Рис.2. Повне вивертання ендофаллуса трутня з еякуляцією Рис 3. Відбір сперми
Під тиском гемолімфи і повітря, що надходить з повітряних мішків, кінцева частина черевця трутня виходить назовні, відкриваючи отвір ендофаллусу. Потім виштовхується основа ендофаллуса з волосками та ріжками. Якщо трутні статевозрілі, ріжки їх помаранчевого кольору. Іноді виходить і шия. Це перша стадія вивертання, сперми у цей час немає.
У цій стадії цибулина з черевця виходить в основу ендофаллуса і тягне за собою сім'явивергувальний канал. Тонка хітинова плівка у його початку проривається і сперма, а за нею і мукус через сім'явивергувальний канал впорскуються в цибулину.
Щоб продовжитививертання ендофаллуса необхідно створити у ньому додатковий тиск. Здавлювання черевця від передньої частини до задньої стимулює скорочення черевних м'язів, яке можна відчути. За скороченням м'язів слідує рефлекторна еякуляція, цибулина проскакує через вузьку шийку і на її поверхні з'являється спочатку сперма кремового, а потім мукус білого кольору.
Еякуляція здійснюється шляхом перистальтичного скорочення м'язової тканини, починаючи від внутрішнього кінця насіннєвих бульбашок та придаткових залоз, що виштовхують сперму та мукус. Нормальну еякуляцію насіння не можна отримати без скорочення черевних м'язів. Вся підготовка трутня до еякуляції має бути спрямована не на видавлювання сперми, а на стимулювання скорочення черевних м'язів. Тільки скорочення черевних м'язів може спричинити рефлекторну еякуляцію.
Потім трутня, що здійснив еякуляцію, підносять лівою рукою до капіляра і поверхнею сперми торкаються його кінчика. Трутня злегка відтягують від капіляра, зберігаючи контакт між крапелькою сперми і капіляром, що створює умови втягування в капіляр чистої сперми, так як мукус в'язкіший і не втягується, як сперма. Слід уникати засмоктування мукуса, оскільки він швидко згортається і утворює пробку, що зупинить подальше проходження сперми. Якщо ж мукус потрапив у капіляр, необхідно подати поршень тому і звільнити прохід, і після цього відновити засмоктування сперми.
Коли підносять наступного трутня, з капіляра опускають крапельку попереднього сперми, щоб вона з'єдналася з новою порцією і, відтягнувши трохи трутня, засмоктують її знову. Для запліднення однієї правильно підготовленої матки необхідно відібрати порцію сперми в обсязі 8 мікролітрів (зазвичай не менше ніж від 10 трутнів). При цьому сучасне обладнання дозволяє набрати капіляр.4-6 таких порцій. Порції повітряними бульбашками не поділяють (як у разі відділення першої порції від физраствора). При цьому обсяг сперми, при її введенні у статеві шляхи матки, вимірюють спеціальними мітками на капілярі. Якщо протягом найближчих 3-5 хв після наповнення капіляра спермою запліднення маток не планується, щоб уникнути утворення пробки, в кінець капіляра втягують крапельку фізіологічного розчину і відводять шприц убік.