Принципи лабораторної діагностики вірусних хвороб
На першому етапі діагностики використовують дані, які можна швидко зібрати у господарстві. До таких відносяться:
епізоотологічні дані, що включають відомості про охоплення хворобою даного поголів'я тварин, швидкість і територіальне поширення хвороби, види хворих тварин, динаміку виявлення хворих і т. д.;
Клінічні ознаки хвороби. Вони включають визначення (порівняно з нормою) температури тіла, частоти та форми дихання, частоти пульсу, порушення апетиту, поведінки, стану шкірних покривів та слизових оболонок, функціонування органів травлення, виділення тощо;
патологоанатомічні зміни, які зазвичай встановлюють при розтині загиблих або вимушено вбитих тварин. Розрізняють макроскопічні зміни (порівняно з нормою) форми, розміру, кольору, консистенції, поява вузликів, крововиливів, везикул та інші утворення, що не трапляються в нормі, а також мікроскопічні зміни в клітинах і тканинах, які виявляються гістологічними методами.
Остаточний діагноз на вірусну хворобу здебільшого може бути поставлений лише з урахуванням результатів лабораторних досліджень. У лабораторній діагностиці вірусних хвороб точність діагнозу насамперед залежить від правильності взяття матеріалу (проби) від хворих і полеглих тварин, його транспортування, якості приготування та техніки дослідження вірусного матеріалу.
Матеріал для дослідження слід брати якнайшвидше після прояву чітких ознак хвороби або не пізніше 1-2 годин після клінічної смерті або забою (пізніше починається бактеріальне обсіменіння, і в міру продовження інфекційного процесу кількість вірусу може зменшуватися ввнаслідок впливу захисних механізмів організму).
При взятті матеріалу для виділення вірусу слід виходити з патогенезу передбачуваної інфекції (вхідні ворота, шляхи поширення вірусу в організмі, місця його розмноження, клінічні ознаки та шляхи виділення). У лабораторію направляють той матеріал, який з ймовірністю може містити збудників хвороби. При цьому необхідно дотримуватися таких загальних правил:
матеріал має бути взятий строго асептично;
матеріал повинен бути негайно законсервований (поміщений у термос з охолоджувальною сумішшю або додаванням 50%-ного стерильного гліцерину), щоб запобігти руйнуванню вірусів;
матеріал зручніше брати в стерильні пробірки з гумовою пробкою або у флакончики з-під антибіотиків. Для дослідження цілком достатньо 5-10 г матеріалу;
на пробірках повинна бути етикетка, що не змивається; матеріал направляють із нарочним і супровідним листом, у якому вказують господарство, вид хворих тварин, попередній діагноз, вид та кількість патологічного матеріалу, на що слід провести дослідження, дату та прізвище лікаря.
Залежно від симптомів хвороби, а отже, і локалізації збудника від хворої тварини може бути взятий наступний матеріал:
змив зі слизової оболонки носа, очей, із задньої стінки глотки, прямої кишки та клоаки у птахів. Беруть їх стерильними ватними тампонами, які занурюють у пробірки або флакони, що містять 3-5 мл відповідної рідини (розчин Хенкса, середовища Голка, 199 та ін) з антибіотиками;
вміст везикул, пустул, стінки везикул, скоринки на шкірі; ^ фекальні маси безпосередньо з прямої кишки;
кров для виділення вірусу та кров для отримання парних сироваток крові для виявлення та визначеннятитру антитіл. Для цієї мети кров беруть двічі у однієї і тієї ж тварини - на початку хвороби і через 2-3 тижні, тобто на початку і в кінці хвороби.
Від трупів патологічний матеріал повинен бути взятий не пізніше 1-2 годин після клінічної смерті або забою тварини. Як патологічний матеріал беруть шматочки органів, які:
мають видимі відхилення від норми;
можуть бути уражені та містити вірус на підставі клінічної картини хвороби;
найчастіше містять вірус: селезінка, печінка, легені, нирки, головний мозок, лімфатичні вузли.
У лабораторії частину матеріалу беруть для дослідження, частину, що залишилася, зберігають у холодильнику на випадок додаткових досліджень. Потім становлять план дослідження надісланого матеріалу, який включає такі завдання: - виявлення (індикація) вірусу в матеріалі; виділення (ізоляція) вірусу із матеріалу; ідентифікація виділеного вірусу;
за потреби потрібно довести етіологічну роль виділеного вірусу;