Спосіб діагностики туберкульозу жіночих геніталій
Винахід відноситься до медицини і може бути використане для ранньої діагностики туберкульозу жіночих геніталій. Сутність винаходу полягає у постановці туберкулінової проби з використанням антигену в обсязі 0,1 і 0,01 ТЕ, що вводиться в область проекцій геніталій на передній черевній стінці з подальшим визначенням рівня протитуберкульозних антитіл у перитонеальній рідині з вмістом цистогідросальпінсу. 1 табл.
Пропонований винахід відноситься до медицини і може бути використане для ранньої діагностики туберкульозу жіночих геніталій, спосіб включає підготовку туберкулінового тесту - сегментарної проби Манту та визначення відхилення рівня протитуберкульозних антитіл щодо норми.
Туберкульоз нині перетворився на глобальну проблему, яку формує не тільки туберкульоз органів дихання, а й позалегеневий туберкульоз. Показник зростання останнього становить до 6% на рік. Позалегеневий туберкульоз має меншу контагіозність, ніж туберкульоз органів дихання, проте хворі часто виявляються в занедбаному стані і дають високий відсоток інвалідизації; у 96,6% жінок, які страждають на туберкульоз геніталій, є безпліддя (Жученко О.Г.) [1]. У структурі позалегеневих форм туберкульозу поразка жіночих статевих органів займає одне з основних місць і становить 16% (Колачевська О.М.) [2]. За нашими даними, питома вага таких хворих у 2000 році дорівнює 5,7%, що явно суперечить загальній тенденції. Щодо благополучні показники туберкульозу жіночої статевої сфери не відображають істинної картини. За рахунок недовиявлених хворих показник захворюваності занижено у Краснодарському краї до 35,6%. Це пов'язано в тому числі з біологічними властивостями, що різко змінилися, збудника туберкульозу, що вимагають підвищених зусиль для йоговиявлення та ідентифікації. Останнє ускладнює класичну діагностику туберкульозу, засновану на поєднанні клінічних, рентгенологічних і бактеріологічних даних. Для туберкульозу жіночих статевих органів і натомість найширшого поліморфізму характерно:
- мала частота виявлення збудника (18-22%) у патологічному матеріалі (Семеновський А.В. [3]);
- гістологічна картина, що враховує особливості патогістологічних змін при туберкульозі жіночих геніталій, достовірна лише у 30% випадків за активного процесу (Беллендер Е.Н, Реккель Ю.І.) [4].
Відомі різні способи діагностики туберкульозу жіночих статевих органів. Негативні результати морфологічного та бактеріологічного досліджень не виключають наявності туберкульозу геніталій, тому хворим проводять комплексне клініко-лабораторне обстеження. Обов'язковим вважається виконання рентгеноконтрастного дослідження матки та маткових труб. При цьому незначна деформація ампулярних відділів маткових труб зустрічається як на ранніх стадіях туберкульозного процесу, так і при неспецифічних ураженнях маткових труб, тобто неможливо використовувати гістеросальпінгографію для діагностики туберкульозу жіночих геніталій. Визначення активності генітального туберкульозу з використанням динамічної ультразвукової сонографії, запропоноване Кочоровою М.М. [5], спірно, оскільки ґрунтується на непрямих ознаках протікаючого процесу, вимагає великих матеріальних витрат, залежить від роздільної здатності використовуваної апаратури та кваліфікації дослідника.
У фтизіогінекології донедавна використовували провокаційну пробу - туберкулінова проба Коха з 20-50 ТЕ. Пробу Коха здійснюють шляхом підшкірного введення, готують строго дозованої кількостітуберкуліну ППД-Л. Потрібне розведення готують із сухого очищеного туберкуліну наступним чином: вміст ампули з препаратом розводять 1 мл розчинника, одержують основний розчин туберкуліну, що містить 1 мл 50000 ТЕ. Перше розведення туберкуліну, відповідне 10000 ТЕ в 1 мл, готують шляхом розведення основного розчину 4 мл розчинника. Друге розведення туберкуліну готують шляхом розведення першого вдесятеро, тобто. до 1 мл першого розведення додають 9 мл розчинника, в результаті отримують 1000 ТЕ в 1 мл (100 ТЕ в 0,1 мл). Третє розведення туберкуліну готують шляхом розведення другого в 10 разів, тобто. до 1 мл другого розведення додають 9 мл розчинника. Отримують 100 ТЕ в 1 мл (10 ТЕ в 0,1 мл). Доза туберкуліну 20 ТЕ відповідає 0,2 мл 3-го розведення. Цю дозу вводять підшкірно у верхню частину зовнішньої поверхні плеча. При цьому оцінюють місцеву, загальну та осередкову реакції. Оцінюючи осередкової реакції існує певна ступінь суб'єктивізму. Для її об'єктивізації Приймак О.О. в 1991 [6] запропонував вивчення в динаміці рівня церулоплазміну в сироватці крові. Але церулоплазмін є білком гострої фази, тому зростання його рівня спостерігається у хворих на гострі та хронічні інфекційні захворювання, цироз печінки, гепатити, інфаркт міокарда, системні захворювання, тобто цей показник неспецифічний для туберкульозного процесу. Відомий вимір біохімічних показників у зоні, максимально наближеній до вогнища ураження діагностики туберкульозу геніталій. Після проби Коха визначають кількість аденозиндезамінази в перитонеальній рідині (Олійник А.Є.) [7], але цей фермент, що бере участь в обміні пуринів і каталізує гідролітичне дезамінування аденозину, дуже нестабільний, тому процедура його визначення достатнятрудомістка, за його визначенні використовують дорогі важкодоступні реактиви, нашій країні їх випуск не налагоджений. Крім того, рівень аденозиндезамінази піднімається у хворих на перитоніт, перикардит, менінгіт, синовііт, тобто. цей показник неспецифічний туберкульозу.
Ці обставини спонукають до пошуків інформативних та доступних методів імунологічної діагностики туберкульозу жіночих геніталій. Серологічні дослідження значно доповнюють комплекс загальноприйнятих методик. Наявність у крові циркулюючих протитуберкульозних антитіл одна із характерних ознак туберкульозу, незалежно від виразності специфічної клітинної відповіді. Серед хворих на туберкульоз жіночих геніталій протитуберкульозні антитіла в крові виявляють у 40-60% випадків (Жученко О.Г.) [1]. Це явно недостатньо для встановлення діагнозу. Сучасні уявлення про роль патологічного вогнища у конкретних органах як джерела найбільш вираженої місцевої імунної відповіді роблять патогенетично обґрунтованими пошуки протитуберкульозних антитіл (ПТАТ) у біологічних рідинах із анатомічних зон ураження.
За прототип способу діагностики туберкульозу жіночих геніталій прийнято “Спосіб діагностики туберкульозного сальпінгоофориту (№2143699 від 27.12.99). У цьому випадку визначають протитуберкульозні антитіла (ПТАТ) у крові за допомогою імуноферментного аналізу (ІФА) до та після проби Коха з 20 ТЕ, виявляють протитуберкульозні антитіла (ПТАТ) у перитонеальній рідині Дугласового простору. Перитонеальну рідину Дугласового простору (ПДЖП) одержують шляхом пункції Дугласового простору у оглядовому кабінеті гінекологічного відділення під місцевою анестезією заднього склепіння піхви. У центр розтягнутого заднього склепіння на глибину до 2 см вводять довгу голку до 2 ммдіаметрі. Перитонеальну рідину Дугласового простору (ПДЖП) отримують шляхом пасивного відтоку, вносять в суху стерильну пробірку і доставляють в лабораторію. Однак у зв'язку зі значним туберкуліновим навантаженням та можливістю активації екстрагенітальних вогнищ туберкульозу підшкірна туберкулінова проба має низку протипоказань і не може бути застосована у всіх хворих. Крім того, при туберкуліновому навантаженні в 20-50 ТЕ спостерігається велика кількість хибнопозитивних і хибнонегативних результатів до 30% (Колачевська О.М.) [2].
Завдання: підвищити достовірність дослідження, зменшити матеріальні витрати на постановку правильного діагнозу та скоротити час подальшого лікування.
Сутністю пропонованого винаходу є спосіб діагностики туберкульозу жіночих статевих органів, що включає підготовку туберкулінового тесту - сегментарної туберкулінової проби Манту і визначення відхилення рівня протитуберкульозних антитіл щодо норми, при цьому новизною є те, що для туберкулінової проби використовують антиген в обсязі 0,1 ,01 ТЕ і вводять в область проекції геніталій на передній черевній стінці та антитіла до туберкульозу визначають не тільки в перитонеальній рідині, але і в ендоскопічно і проби використовують антиген в обсязі 0,1 і 0,01 ТЕ і вводять в область проекції геніталій на передній черевної стінки та антитіла до туберкульозу визначають не тільки в перитонеальній рідині, але і в ендоскопічно та пункційно отриманому вмісті маткових труб.
Спосіб апробовано на пацієнтах відділення урогенітального туберкульозу Краснодарського клінічного протитуберкульозного диспансеру департаменту охорони здоров'я Краснодарського краю. У роботі було використано тест-систему АКВА-ТУБ-2 (розробка Санкт-Петербурзького науково-дослідницького інституту фтизіопульмонології та Санкт-Петербурзького науково-дослідного інституту епідеміології та мікробіології ім. Пастера). Дослідження йшло за таким алгоритмом:
1) пошук протитуберкульозних антитіл (ПТАТ) у крові,
2) пошук протитуберкульозних антитіл (ПТАТ) у крові на тлі сегментарної проби Манту (до і через 72 години) у дозі 0,1 та 0,01 ТЕ в область проекції жіночих геніталій на передній черевній стінці. Потрібне розведення готують із сухого очищеного туберкуліну наступним чином: вміст ампули з препаратом розводять 1 мл розчинника, одержують основний розчин туберкуліну, що містить 1 мл 50000 ТЕ. Перше розведення туберкуліну, відповідне 10000 ТЕ в 1 мл, готують шляхом розведення основного розчину 4 мл розчинника. Друге розведення туберкуліну готують шляхом розведення першого вдесятеро, тобто. до 1 мл першого розведення додають 9 мл розчинника, в результаті отримують 1000 ТЕ в 1 мл (100 ТЕ в 0,1 мл). Третє розведення туберкуліну готують шляхом розведення другого в 10 разів, тобто. до 1 мл другого розведення додають 9 мл розчинника. Отримують 100 ТЕ в 1 мл (10 ТЕ в 0,1 мл).
Четверте розведення туберкуліну готують шляхом розведення третього в 10 разів, аналогічно попередньому, п'яте розведення туберкуліна готують також, отримують 1 ТЕ 1 мл розчину, шосте розведення готують з п'ятого шляхом розведення його в 10 разів, отримують 0,1 ТЕ в 1 мл.
3) виявлення протитуберкульозних антитіл (ПТАТ) у пунктаті з черевної порожнини, що містить цистогідросальпінкс.
Було обстежено 160 хворих із підозрою на туберкульоз жіночих геніталій. Серед них на першому етапі протитуберкульозні антитіла (ПТАТ) у крові виявлено у 85 осіб (що становить 53%). На наступному етапі отримано такі результати:протитуберкульозні антитіла (ПТАТ) після сегментарної проби Манту виявлено у 103 жінок.
Діагностична інформативність комплексу зросла на 12%. На третьому етапі протитуберкульозні антитіла (ПТАТ) у вмісті цистогідросальпінксу виявлено у 132 жінок (82,5%) (див. таблицю).
Остаточний діагноз туберкульозного сальпінгоофориту, підтверджений гістологічно, було поставлено у 146 хворих. Таким чином, ефективність імунодіагностики туберкульозного сальпінгоофориту достатньо висока - чутливість становить 90,4%, тому можна стверджувати, що застосування зазначеного тесту в комплексі з клініко-лабораторними обстеженнями хворих дозволяє з високим ступенем достовірності (коефіцієнт достовірності 21,5, що відповідає коефіцієнту Стью Винахід відноситься до галузі імунології та може бути використане при діагностиці захворювань, асоційованих з Н.pylori з використанням реакції коаглютинації (РКА)